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以下为本文档部分文字说明：

第2练微生物的培养技术及应用A级·大概念对点练概念点1微生物的培养技术1．巴氏杀菌乳是以生牛(羊)乳为原料，经巴氏杀菌等工序制得的液体产品，杀灭了牛奶中有害菌群的同时也保存了营养物质和纯正口感。据国家标准每毫升合格巴氏杀

菌乳中细菌总数不得超过50000个。某兴趣小组进行了新鲜牛奶合适的消毒温度的探究，相关实验操作不合理的是()A．配制牛肉膏蛋白胨培养基并在121℃、100kPa条件下处理15～30minB．将等量的新鲜牛奶分别置于60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理30minC．对处理后的牛

奶进行梯度稀释后，利用稀释涂布平板法接种在平板上并在37℃下培养24hD．统计培养基上全部菌落数，以菌落数最少组的处理温度作为牛奶最适消毒温度2．微生物实验需要严格的无菌操作以防止污染，下列说法错误的是()A．紫外

线用于实验室空气及实验台表面的消毒B．无菌技术可有效地避免实验操作者自身被微生物感染C．为防止DNA污染，PCR用水应来自加热煮沸的自来水D．使用后的培养基在丢弃前需要灭菌处理3．稀释涂布平板法是分离菌种常用的方法，下列相关叙述不恰当的是()A．固体培养基灭菌

后，应冷却至50℃左右时倒平板B．倒好的平板需立即使用，以免表面干燥，影响菌的生长C．稀释涂布平板法分离得到的单菌落需进一步划线纯化D．稀释涂布平板法既可用于微生物的分离，也可用于微生物的计数概念点2微生物的选择培养与计数4．解脂菌

能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色。下列说法错误的是()A．甲菌属于解脂菌B．实验中所用培养基以脂

肪为唯一碳源C．可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比D．该平板可用来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力5．一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维(PP)，某科研团队准备从土壤中筛选出高效降解一次性口罩的细菌。图甲表示PP分解菌分离与计数的过程，6号试管涂布的三个平板的菌落数为550、601、688；7

号试管涂布的三个平板的菌落数为58、73、97；8号试管涂布的三个平板的菌落数为8、15、28。图乙表示在培养基中加入能与PP结合而显色的染色剂，目的菌落周围出现透明圈的情况。下列说法正确的是()A.图甲、图乙所用培养基分别为选择培养基和鉴

别培养基，都以PP作为唯一碳源B．图甲、图乙所用接种方法分别为稀释涂布平板法和平板划线法，都需在酒精灯火焰旁进行C．1g土壤样品中含有PP分解菌的估算数目是7.6×1010个，此数值一般偏大D．可选择图乙

培养基中d/D比值大的PP分解菌作为目的菌种推广使用B级·素养提能练6.[2024·大连模拟]某种细菌的培养和分离过程示意图如下。图中①～③表示实验过程，A1、B1、B2和B3代表平板，a1、a2、b1、b2和b

3代表菌落，B1～B3中添加了适宜浓度的青霉素。有关叙述错误的是()A.实验操作过程中必须打开超净台上的紫外灯灭菌B．平板接种细菌后，放入恒温培养箱中倒置培养C．原始菌株的①扩大培养应选用液体培养基来培养D．依图示结果，说明b1、b2、b3

具备抗青霉素的特性7．[2024·泰安模拟]处理生活垃圾的有效方法之一是用微生物对其进行降解。下图表示筛选高效降解淀粉菌种的过程。相关分析正确的是()A.筛选所用培养基中的碳源应为牛肉膏和蛋白胨B．将菌液接种到培养基的方法是平板划线法C．菌落①与菌落②透明圈大小不同的原因是其对碘液的分

解能力不同D．扩大培养时用不加琼脂的液体培养基效果更好8．圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌组合可有效将餐厨垃圾中的有机质迅速分解成水和CO2。为制备分解餐厨垃圾的微生物菌剂，实现废物的资源化利用，研究人员采用稀释涂布平板法进行了两菌种的最佳接种量比例的探究实验，结果如图所示。下列叙述正确的是()A.由图

可知，制备所需菌剂时两菌种的最佳接种量比例为2∶1B．可采用平板划线法替代稀释涂布平板法统计图中的有效菌落数C．涂布平板的所有操作都应在酒精灯火焰旁进行，而系列稀释操作不需要D．制备好的菌剂可接种到固体斜面培养基上并放入4℃的冰箱中临时保藏9．[2024·菏泽模拟

]精氨酸依赖型谷氨酸棒状杆菌缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，但可作为鸟氨酸发酵的优良菌种。如图为野生型谷氨酸棒状杆菌经诱变获得精氨酸依赖型菌并进行筛选的过程示意图，过程①将紫外线照射处理

过的菌液接种在培养基甲上，待培养至菌落不再增加时，将甲中菌落转移到乙培养基中继续培养得到如图所示的结果。下列相关叙述错误的是()A．野生型菌液的培养皿中不会出现菌落B．乙培养基与甲相比可能缺少了精氨酸C．紫外线照射可导致谷氨酸棒状杆菌发生染色体变异D．乙中

的菌落是通过影印法接种获得的，菌落B为鸟氨酸发酵的优良菌种10．[2024·德州高三联考]聚羟基脂肪酸酯(PHA)是一类由微生物合成，在自然条件下可完全降解的生物塑料，可替代传统塑料成为新型生物材料。某科研团队以餐厨垃圾作为碳源，按

照如图所示流程从含盐量高的餐厨垃圾渗沥液处理系统中筛选分离出PHA合成能力较强的耐盐菌株，下列相关叙述错误的是()注：尼罗红是细胞内储存的脂类物质的荧光染色剂，在紫外光的照射下显示红色，灵敏度较高，可用于PHA和非PHA脂类物质荧光显微镜观察，并能在一定程度上将两者区分开来。A．配制

甲培养基时可适当提高培养基的盐浓度，接种后应置于摇床中振荡培养B．在乙培养基中加入尼罗红荧光染色剂，接种后将培养皿倒置在恒温箱中培养C．①过程采用稀释涂布平板法，②过程中应挑选有红色荧光的菌落进行培养D．经过多次稀释和筛选，形成的单菌落中所有细胞的遗传

物质均相同11．[2024·潍坊模拟]营养缺陷型菌株就是在人工诱变或自发突变后，微生物细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，使代谢过程中的某些合成反应不能进行的菌株。这种菌株能积累正常菌株不能积累的某些代谢中间产物，为工业生产提供大量的原料。以下是实验人员利用影

印法初检氨基酸缺陷型菌株的过程。下列说法合理的是()A.过程①的接种方法为稀释涂布平板法，过程②两种培养基的成分相同B．进行过程②培养时必须先将丝绒布转印至基本培养基上，顺序不能颠倒C.统计菌落种类和数量时要每隔24h观察统计一次

，直到各类菌落数目稳定，以防止培养时间不足导致菌落数目偏大D．营养缺陷型菌株细胞代谢调节机制中的某些酶被破坏，与核孔复合体的蛋白质空间结构发生改变有关12．抗生素是某些微生物产生的能杀死或抑制其他微生物生长的化学物质。下图表示从土壤

中筛选某种抗生素产生菌的过程，相关叙述正确的是()A.菌株的透明圈越大，其产生的抗生素抑菌效果越差B．没有透明圈产生的菌株一定不能产生抗生素C．接种测试菌3时，接种环可能在灼烧后未冷却D．测试菌2、5对该菌产生的抗生素具

有抗性13．“掌心对掌心，手心压手背，十指交叉摩，手握关节搓，拇指围轴转，指尖掌心揉，手腕别放过。”七步洗手法可以清除手部的污物和微生物，是预防新冠病毒感染的有效措施之一。某生物实验小组设计了“比较洗手前后手上细菌分布情况”的探究活动：各小组成员分别将拇指在甲组培养基上轻轻按一下，然后用肥皂将该手

洗干净，再将洗净后的拇指在乙组培养基上轻轻按一下。将这两组培养基放入恒温培养箱中，在适宜温度下培养24小时后，统计两组培养基中菌落数目。(1)该实验中用到的培养基中加入了牛肉膏、蛋白胨、NaCl和水，蛋白胨可以为微生物的生长提供______________

______________等营养物质，为了使配制的溶液呈固体状态，还需要加入________。为了防止外来杂菌的入侵，可以将培养基放入盛有适量________的高压蒸汽灭菌锅内灭菌15～30min。(2)实验中“将

拇指在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养操作中的________，该操作应该在酒精灯火焰附近进行，原因是___________________________________________________

____________________________________________________________。(3)统计甲乙两组培养皿中的菌落，乙组中菌落数比甲少得多，实验结果说明肥皂洗手不能彻底清除手

上的微生物。为避免手上微生物在无菌操作中污染培养基，洗过的手还应进行_________________________________________________________________________________________________________________

_______________________________等方法处理(答出1种即可)。(4)有同学认为乙中也有菌落产生，是因为培养过程受到杂菌污染，请你在本实验的基础上设计一个简单的方案验证他的猜想是否正确，并预期结果和结论。____________

__________________________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________________________________________________________________

_____。14．聚对苯二甲酸乙二酯(PET)是塑料类水瓶的重要原料，科学家发现了以PET为碳源和能量来源的细菌，该发现对PET类材料的回收利用、环境治理意义重大。请回答下列问题：(1)实验小组欲从土壤中

获取PET降解菌，需将土壤样品置于以________为唯一碳源的培养基中进行选择培养，其目的是________________________________________________________________________________________________

_____________________。(2)该实验小组选取PET浓度为800mg·L－1的富集液进行系列稀释，分别取10－3、10－4和10－5倍数的稀释液0.1mL涂布于培养基上，每个稀释倍数涂布三个平板，各平板的菌落数分别为(286、298、297)，(35、

32、31)，(36、7、2)，不适合用于计数的为________倍数的稀释液，用另外两组稀释倍数的稀释液进行计数得到的细菌数不一致的原因可能是__________________________________________

______________________________________________________________________________________________________。(3)倒平板时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是_________

_______________。在倒平板的过程中，如果培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，则这个平板不能用来培养目的菌，原因是__________________________________。用平板划线法纯化PET降解菌的过程中，在第二次及其后的划线操作时，须从上一次划

线的末端开始划线，原因是_____________________________________________________________________________________________________

___________________________________________。(4)在保藏PET降解菌菌种时，可采取________的方法进行长期保存。C级·真题实战练15.[2023·广东卷]研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄

角等废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线(如图)和选择培养基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是()A.a点时取样、尿素氮源培养基B．b点时取样、角蛋白氮源培养基C．b点时取样、蛋白胨氮源培养基D．c点时取样、角蛋白氮源培养基16．[2023·全国乙卷]某研究小组设计了

一个利用作物秸秆生产燃料乙醇的小型实验。其主要步骤是：先将粉碎的作物秸秆堆放在底部有小孔的托盘中，喷水浸润、接种菌T，培养一段时间后，再用清水淋洗秸秆堆(清水淋洗时菌T不会流失)，在装有淋洗液的瓶中接种酵母菌，进行乙醇发酵(酒精发酵)。实验流程如图所示。回答下列问题。(1

)在粉碎的秸秆中接种菌T，培养一段时间后发现菌T能够将秸秆中的纤维素大量分解，其原因是________________________________________________________________。(2)采

用液体培养基培养酵母菌，可以用淋洗液为原料制备培养基，培养基中还需要加入氮源等营养成分，氮源的主要作用是___________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________(答出1点即可)。通常，可采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行

灭菌。在使用该方法时，为了达到良好的灭菌效果，需要注意的事项有________________________________________________________________________

______________________________________________________(答出2点即可)。(3)将酵母菌接种到灭菌后的培养基中，拧紧瓶盖，置于适宜温度下培养、发酵。拧紧瓶盖的主要目的是______________。但是在酵母菌发酵过程中，还需适时拧松瓶盖

，原因是______________。发酵液中的乙醇可用______________溶液检测。(4)本实验收集的淋洗液中的________可以作为酵母菌生产乙醇的原料。与以粮食为原料发酵生产乙醇相比，本实验中乙醇生产方式的

优点是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。