【文档说明】四川省内江市第一中学2023-2024学年高二下学期期中考试生物试题 Word版含解析.docx，共(28)页，1.570 MB，由管理员店铺上传

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内江一中高2025届高二（下）半期考试生物试题（时间：75分钟满分：100分）一、单选题（共60分，每小题2分）1.牛奶中富含多种营养物质，但牛奶也是多种病原体的传播载体，比如牛奶中可能存在金黄色葡萄球菌，该菌是一种高度耐盐的兼性厌氧微生物，可引起人类肺炎和肠炎等

疾病。金黄色葡萄球菌在血平板（培养基中添加适量血液）上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌，操作流程如图所示。下列说法错误的是（）A.配制好的肉汤培养基应采用湿热灭菌法进

行灭菌B.振荡培养有利于微生物的生长繁殖C.在血平板上的接种方法是稀释涂布平板法D.用7.5%NaCl进行培养可增加金黄色葡萄球菌的数量【答案】C【解析】【分析】培养基的主要成分：①主要成分：水、碳源、氮源、无机盐。②其他成分：还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的需求。【详解】A、

配制好的肉汤培养基应采用湿热灭菌法如高压蒸汽灭菌法进行灭菌，A正确；B、振荡培养有利于微生物与营养物质的接触，也有利于增大溶氧量，促进微生物的生长繁殖，B正确；C、结合图示可知，在血平板上的接种方法是平板划线法，C错误；D、金黄色葡萄球菌是一种高

度耐盐的兼性厌氧微生物，用7.5%NaCl进行培养可增加金黄色葡萄球菌的数量，D正确。故选C。2.如表是某微生物培养基的成分，下列有关说法错误．．的是（）编号①②③④⑤成分（NH）2SO4KH2PO4FeSO4CaC

l2H2O含量/g0.44.00.50.5100mLA.此培养基可用来培养自养型微生物B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源C.此培养基可用于观察所培养的微生物的菌落特征D.培养基中若加入氨基酸，则它可充当

碳源、氮源【答案】C【解析】【分析】题表分析，表中所示的营养成分中，除了水之外，（NH4）2SO4、KH2PO4、FeSO4和CaCl2都属于无机盐，其中（NH4）2SO4可为微生物的生长提供氮源。因缺

乏有机物，该培养基可用来培养自养型微生物。【详解】A、此培养基没有有机物，且没有碳源，因而可用来培养自养型微生物，A正确；B、此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源，不含碳源，B正确；C、此培养基中没有加入琼脂，因而为液体培养基，因而不可用于观察所培养的微生物的菌

落特征，因为菌落是在固体培养基上生长出来的，C错误；D、培养基中若加入氨基酸，由于氨基酸中含有碳元素和氮元素，因而可充当碳源、氮源，D正确。故选C。3.将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式处理，并放置在不同

温度的环境中，培养24小时后，所得结果如表：编号abcdef处理方法接种大肠杆菌接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素X的圆纸片接种大肠杆菌，并覆一吸有抗生素Y的圆纸片接种大肠杆菌，表面全被醋覆盖接种大肠杆菌无接种菌温度40℃40℃40℃

40℃0℃40℃观察结果全表面呈浑浊纸片周围呈现一片清晰区，其余表面呈浑浊全表面呈浑浊全表面清晰全表面清晰全表面清晰根据上述实验结果所作出的判断，错误的是（）A.编号a和f比较可知，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊B.根据编号b和c的观察结果，可知抗生素Y比抗生素X的杀菌能力强C.将编号

e和a的结果比较可知，0℃的环境不适合大肠杆菌生长D.若揭开编号f的盖子，24小时后培养基表面会出现浑浊【答案】B【解析】【分析】表格分析：表中表示将大肠杆菌接种到适宜的细菌培养基上，加盖后，以不同的方式处理

，并放置在不同的温度环境中，培养24小时后，观察所得的结果。比较a和f可知有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊；比较b和c可知抗生素X比抗生素Y的杀菌能力强；比较e和a可知0℃不适合大肠杆菌生长。【详解】A

、根据对照原则，a、f的区别在于是否接种了大肠杆菌，比较a、f的观察结果，有大肠杆菌培养基的表面会变浑浊，同时说明所用培养基合格，A正确；B、根据编号b和c的观察结果，含有X抗生素的纸片覆盖在大肠杆菌的培养基上

，可观察到纸片周围呈现一片清晰区，其余表面呈浑浊，说明抗生素X能起到消灭大肠杆菌的作用，而含有抗生素Y的c组结果为全表面浑浊，说明抗生素Y基本不起抑制大肠杆菌的作用，即抗生素X比抗生素Y的杀菌能力强，B错误；C、e、a形成对照，其自变量是温度，根据实验结果可知0℃

不适合大肠杆菌生长，C正确；D、f暴露在空气中后，会自然接种菌种，形成菌落，即24小时后培养基表面会出现浑浊，D正确。故选B。4.下列关于发酵工程及其应用的叙述，正确的是（）A.酵母菌发酵产生的单细胞蛋白，

可制成微生物饲料B.菌种的选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可从自然界筛选出来C.酱油制作中利用黑曲霉将原料中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸D.啤酒发酵过程中糖的分解和代谢物的生成主要在后发酵阶段完成【答案】C【解析】【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定

功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。【详解】A、用单细胞蛋白制成的微生物饲料，其中的单细胞

蛋白是微生物菌体，并不是酵母菌发酵产生的单细胞蛋白，A错误；B、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，B错误；C、黑曲霉可产生蛋白酶、脂肪酶等多种酶，酱油制作中利用黑曲霉将原料中蛋白质分解成小分子的肽的和氨基酸，C正确；D、啤酒发酵过程中糖的分

解和代谢物的生成主要在主发酵阶段完成，D错误。故选C。5.若棒状杆菌中缺乏将鸟氨酸转化为精氨酸的酶，不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长，则称之为精氨酸依赖型菌。野生型棒状杆菌经诱变、筛选获得精氨酸依赖型菌的过程如图所示，过程①将紫外线照射处理

过的菌液接种在甲培养基上，待培养至菌落不再增加时，将甲培养基中的菌落转移到乙培养基中继续培养得到如图所示的结果。下列相关叙述正确的是（）A.实验过程中用到的培养基和培养皿必须采用高压蒸汽灭菌法灭菌B.培养基乙中缺乏精氨酸，是一种选择培养基C.下一步应从

培养基乙中选出A菌株作为所需菌种D.紫外线照射还可以导致谷氨酸棒状杆菌发生染色体结构变异【答案】B【解析】【分析】图中①表示将紫外线照射处理的菌液接种在含精氨酸的培养基上，②表示继续培养在缺乏精氨酸的培养基上，甲中有A、B两种菌落

，乙中只有A菌落，精氨酸依赖型菌不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长,因此，甲中A表示野生型菌株，B为精氨酸依赖型菌株。【详解】A、实验过程中用到培养皿可以使用干热灭菌，A错误；B、甲中有A、B两种菌落，乙中只有A菌落，精氨酸依赖型菌不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长,所以甲中A表示野生型菌株，B为

精氨酸依赖型菌株，培养基甲是完全培养基，培养基乙中缺乏精氨酸，B不能生长，培养基乙是选择培养基，B正确；C、甲中有A、B两种菌落，乙中只有A菌落，精氨酸依赖型菌不能在缺少精氨酸的培养基上正常生长,所以甲中A表示野生型菌株，B为精氨酸依赖型菌

株，下一步应从培养基甲中选出B菌株作为所需菌种，C错误；D、谷氨酸棒状杆菌是原核生物，无染色体，不能发生染色体变异，D错误。故选B。6.体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生、拯救濒危动物等方面有着广泛的应用前景。下列关于动物细胞核移植技术应用的叙述，错误的是（）A.哺乳动物体细胞核移植的难度明

显高于胚胎细胞核移植的B.克隆动物与供核动物的遗传性状完全相同，原因是遗传物质主要分布在细胞核中C.利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物，可作为生物反应器生产医用蛋白D.将患者细胞核移植到胚胎干细胞，

诱导重组干细胞发育形成的器官可避免免疫排斥反应【答案】B【解析】【分析】动物体细胞核移植技术的应用：①加速家畜遗传改良进程，促进良畜群繁育；②保护濒危物种，增大存活数量；③生产珍贵的医用蛋白；④作为异种移植的供体；⑤用于组织器官的移植等。【详解】A、由于胚胎细胞的分裂能力比体细胞强，所以哺乳动物体

细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植的，A正确；B、克隆动物与供核动物的遗传性状不完全相同，原因是供核动物的细胞质中的遗传物质也会影响克隆动物的性状，B错误；C、利用体细胞核移植技术培育的转基因克隆动物可以作为生物反应器，生产珍贵的医用

蛋白，C正确；D、以患者作为供体培育的人核移植胚胎干细胞诱导形成的组织、器官等，可避免免疫排斥反应，D正确。故选B。7.荔枝果肉多汁酸甜可口，营养价值很高。如图是科研人员利用现代生物科技培育无核荔枝的流程图。下列叙述错误的是（）A.过程①获得的原生质体具有的结构包括细

胞膜、细胞质及细胞核B.过程②需要用秋水仙素处理诱导细胞壁再生C.过程③获得的无核荔枝可能具有荔枝A和荔枝B的优良性状D.三倍体荔枝的培育过程中用到了植物体细胞杂交技术、植物组织培养技术等【答案】B【解析】【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物

的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。【详解】A、过程①表示去除细胞壁，获得的原生质体包括

细胞膜、细胞质及细胞核，A正确；B、过程②细胞壁再生，不需要秋水仙素处理，秋水仙素是诱导染色体加倍的，B错误；C、由于无核荔枝具备荔枝A单倍体和荔枝B的遗传物质，所以无核荔枝可能具有荔枝A和荔枝B的优良性状，C正确；D、三倍体荔枝的培育过程中用到了植物体细胞杂交技术、植物

组织培养技术等，D正确。故选B。8.某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（）A.若某濒危哺乳动

物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育B.获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异C.XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化D.营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制【答案】D【解析】【分析】干细胞是一类具有自我复制能力及多向分化潜能的细胞，在一

定条件下，它可以分化成多种功能细胞。根据干细胞的发育潜能分为三类：全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞。【详解】A、若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法即获得有功能的卵母细胞，进而用于繁育，实现濒危物种的保护，A正确；B、XO胚胎干细胞中丢失了Y染色体，因而该细胞

的获得过程发生了染色体数目变异，B正确；C、XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化，即细胞的功能发生了特化，因而发生了细胞分化，C正确；D、胚胎干细胞不能无限增殖，营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞也会发生接触抑制，D错误。故选D。9.卡铂为广谱抗肿瘤药，通过抑制D

NA复制而起效。卡铂溶于水，溶液中的Cl-会促进其分解。相关实验的设计思路如下图所示，下列说法正确的是（）注：卡铂试剂、DNA复制抑制剂、卡铂试剂+DNA复制抑制剂均由5%葡萄糖溶液配置而成。A.本实验的自变量是卡铂

试剂有无、DNA复制抑制剂的有无B.本实验可用生理盐水代替5%葡萄糖溶液来配制卡铂试剂C.本实验预期结果为①与④组数据接近，②与③组数据接近D.宫颈癌细胞培养时的气体环境是95%的氧气和5%二氧化碳【答案】A【解析】【分析】分析题意可知，本实验的目的是研究卡铂引发癌细胞数

量减少的具体机理；在实验思路中，用DNA复制抑制剂和卡铂甘露醇溶液添加到宫颈癌细胞悬液中，研究它们单独和共同作用下宫颈癌细胞数量变化，因此该实验的自变量是卡铂试剂和DNA复制抑制剂的有无，因变量是宫颈癌细胞数

量变化，药剂浓度、Cl－和其他影响细胞代谢的因素为无关变。【详解】A、由分析可知，本实验的自变量是卡铂、DNA复制抑制剂的有无，A正确；B、由题意可知，溶液中的Cl－会促进卡铂分解，而生理盐水中的含Cl－，会促进卡铂的分解，失去疗效，因此不可用生理盐水代替5%葡萄

糖溶液来配制卡铂试剂，B错误；C、①组不会抑制DNA的复制，④组会抑制DNA的复制，所以预期实验结果不相近，C错误；D、宫颈癌细胞培养时的气体环境是95%的空气和5%二氧化碳，D错误。故选A。10.下列关于动物细胞工程叙述正确的是（）A.细胞需要经过

脱分化形成愈伤组织，培养环境中同时需要O2和CO2B.干细胞是从胚胎中分离提取的细胞，其中造血干细胞可以分化成各种血细胞C.灭活病毒诱导动物细胞融合的基本原理是利用手段对细胞膜结构进行失活处理D.单克隆抗体制备过程中，需要用特定的选择培养基筛选融合的杂交瘤细胞【答案

】D【解析】【分析】1、单克隆抗体制备的原理：B淋巴细胞能产生特异性抗体，在体外不能无限繁殖；骨髓瘤细胞不产生专一性抗体，体外能无限繁殖。杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体。2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经

免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、动物

细胞培养不需要经过脱分化过程，A错误；B、胚胎干细胞是从早期胚胎或原始性腺中分离提取的细胞，B错误；C、灭活病毒诱导动物细胞融合的基本原理是利用病毒表面糖蛋白对细胞膜结构进行处理，C错误；的D、单克隆抗体制备过程中，需要用特定的选择培养基

筛选融合的杂交瘤细胞，D正确。故选D。11.为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得诱导多能干细胞（iPS细胞），继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图所示。下列叙述不正

确的是（）A.诱导优良模型鼠体细胞转化为iPS细胞的过程类似于植物组织培养的脱分化B.iPS细胞能分化成小鼠多种组织细胞是因为它具有不同于其他细胞的特定基因C.胚胎移植后，还需对受体进行妊娠检查，来保证胚胎能正常发育D.为确定克隆鼠培育是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵

抗的相关检测【答案】B【解析】【分析】1、哺乳动物胚胎干细胞是由早期胚胎或原始性腺中分离出来的一类细胞；胚胎干细胞的细胞核一般较大，核仁明显，而细胞质相对较少；在功能上具有发育的全能性。2、植物组织培养的脱分化：让已经分化的

细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而转变成未分化细胞的过程。【详解】A、优良模型鼠体细胞在诱导因子的作用下转化为iPS细胞的过程与植物组织培养中的脱分化过程类似，是组织细胞恢复分裂能力的过程，A正确；B、iPS细胞能分化成小鼠多种组织细胞是基因选择性表达的结果，

B错误；C、胚胎移植后，还需对受体进行妊娠检查，来保证胚胎能正常发育，C正确；D、据图示，最终得到了黑色鼠3个体，实验最终目的为“开发出胰岛素抵抗模型鼠”，故为确定克隆鼠培有是否成功，须对黑色鼠3进行胰岛素抵抗的相

关检测，D正确。故选B。12.线粒体置换技术是将母亲携带突变线粒体的卵子细胞核移植到去核的健康线粒体捐赠者卵胞浆中获得的重构卵母细胞，与携带者丈夫的精子进行受精，从而获得重构胚胎的技术，由重构胚胎发育而来的就是三亲婴儿。下列有关说法错误的是（）A.培育三亲婴儿

的过程中运用了核移植技术，但不属于无性繁殖B.子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应是胚胎移植的生理学基础C.为获得较多的卵母细胞，可对捐献者和母亲注射性激素D.卵母细胞捐献者携带的白化病基因不会遗传给三亲

婴儿【答案】C【解析】【分析】试管婴儿是指人的卵细胞和精子在体外完成受精作用，发育到早期胚胎的一定阶段，再移入到母体子宫内继续发育到足月诞生的婴儿，由于受精过程和早期胚胎发育通常在试管中完成，所以叫试管

婴儿。【详解】A、培育三亲婴儿过程中用到了核移植技术，但该过程中存在精子和卵细胞结合过程，不属于无性繁殖，A正确；B、子宫对外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是外来胚胎移植存活的关键，是胚胎移植的理论基础，B正确；C、为获得较多的卵

母细胞，可对捐献者和母亲注射促性腺激素，而不是性激素，C错误；D、发育成三亲婴儿的受精卵的细胞质来自捐献者，选择无线粒体遗传病捐献者可降低发病概率，卵母细胞捐献者只提供了细胞质基因，白化病基因存在于细胞核中，不能遗传给“三亲婴儿”，D正确。故选C。13.下图代表培育能分

泌血清白蛋白的荷斯坦奶牛的实验流程图，①~⑦代表实验步骤。下列叙述错误的是（）A.将血清白蛋白基因导入单个细胞最常用的方法是显微注射法B.用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理可将组织分散成单个细胞C.图中培育荷斯坦奶牛的技术体现了动物细胞具有全能性的D.取

囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定可以挑选出雌性胚胎进行移植【答案】C【解析】【分析】图中①②表示用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织获得单细胞，③表示取出细胞核，④表示细胞核移植，⑤表示重组细胞激活发育，⑥表示胚胎移植，⑦表示妊娠分娩。【详解】A、将目的基因导入动物细胞，最常用的方法是显微注射技术，因此常用

显微注射技术将人血清白蛋白基因导入受体细胞，A正确；B、动物细胞培养过程，用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理可将组织分散成单个细胞，B正确；C、图中培育荷斯坦奶牛运用了细胞核移植技术，体现了动物细胞核具有全能性，C错误；D、此方法是从动物的乳汁中提取血清白蛋白，需要培养出雌性动

物，因此取囊胚的滋养层细胞进行性别鉴定可以挑选出雌性胚胎进行移植，D正确。故选C。14.下列有关细胞工程的叙述，正确的有（）①植物体细胞杂交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍②动物细胞培养时不能用机械的方法将组织分散成单个细

胞③利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体④利用核移植技术可以培育试管婴儿⑤卵子是否受精的标志是卵细胞膜和透明带之间是否出现两个极体⑥桑葚胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”⑦胚胎移植一般只包括从供

体、受体的选择到移植结束，而不包括后续的检查过程A.2项B.3项C.4项D.5项【答案】B【解析】【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞，进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。【详解】①植物体细胞杂

交技术，能克服远缘杂交不亲和的障碍，①正确；②在进行细胞培养时，将动物组织分散成单个细胞，可采用机械的方法，或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间，②错误；③制备单克隆抗体的过程利用了动物细胞培养技术和细胞融合技术，③正确；④利用体外受精、胚

胎移植技术可以培育试管婴儿，④错误；⑤卵子是否受精的标志是卵细胞膜和透明带之间是否出现两个极体，受精完成的标志是雌雄原核融合，⑤正确；⑥囊胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化”，⑥错误；⑦胚胎移植一般包括从供体、受体的选择到移植结束，

以及后续的检查过程，⑦错误。归纳：①、③、⑤正确，共三项正确。B正确，ACD错误。故选B。15.如图是利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列关于该过程的分析，错误的是（）A.②过程通常将胚胎培养到囊胚或原肠胚再进行分割B.在进行①过程之前，需要对采集到的卵子继续培养、对精子进行获

能处理C.③过程中可从滋养层取样，做DNA分析，鉴定性别D.⑤过程是胚胎移植，移植前需要对供体、受体进行同期发情处理【答案】A【解析】【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，分析题图，①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割

，④是分割后胚胎的恢复，⑤是胚胎移植。【详解】A、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚，将它移入盛有操作液的培养皿中，然后在显微镜下用分割针或分割刀分割，A错误；B、在进行①过程之前，需要对采集到的卵子继续培养至MⅡ期、对

精子进行获能处理，B正确；C、内细胞团将来发育成胎儿各种组织，③过程中可用分割针从滋养层取样，做DNA分析，鉴定性别，C正确；D、⑤过程是胚胎移植，移植前需要对供体、受体进行同期发情处理，D正确。故选A。16.单峰骆驼在野外几乎灭绝，科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼，进

行了如图所示研究。请据图分析，下列说法正确的是（）的A.为使A野化单峰骆驼超数排卵，可注射适量的促性腺激素B.为提高胚胎利用率，可采用体外受精等无性繁殖技术C.卵裂期，胚胎的总体积不增加，但有机物总量增加D.

若①表示体外受精，可直接利用B野化单峰骆驼的新鲜精子与处于MⅡ期卵母细胞完成受精作用【答案】A【解析】【分析】体外受精主要包括：卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能、受精。【详解】A、促性腺激素是作用于性腺细胞的激素,属于

促进性激素生成，为使A野化单峰骆驼超数排卵，可注射促性腺激素，A正确；B、为提高胚胎利用率，可采用胚胎分割、移植等无性繁殖技术实现，通过胚胎分割获得的胚胎遗传特性相同，B错误；C、卵裂期，胚胎的总体积不增加，但由于细胞呼吸对有机物的消耗，因而有机物总量减少，C错误；D、若①表示体外受精，不可直

接利用B野化单峰骆驼的新鲜精子与处于MII期卵母细胞完成受精作用，因为获能后的精子才具备受精能力，D错误。故选A。17.DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶。下列相关叙述正确的是（）A.限

制性内切核酸酶主要是从病毒中分离纯化而来B.真核细胞中任意一个DNA片段都能被限制酶切割C.被SmaI酶切割后的DNA可以用T4DNA连接酶连接D.DNA连接酶可以将游离的单个脱氧核苷酸连接成双链结构【答案】C【解析】【分析】基因工程中的操作工具酶及其作用：①分子手术刀——限制性核酸内切酶（限制

酶），能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性；②分子缝合针——DNA连接酶，E·coliDNA连接酶，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；

而T4DNA连接酶能缝合黏性末端和平末端。【详解】A、限制性内切核酸酶主要是从原核生物中分离纯化而来，A错误；B、限制性内切核酸酶需要识别特定的核苷酸序列进行切割，任意一个DNA片段不一定能被限制酶进行切割，

B错误；C、被SamI酶切割后的DNA片段为平末端，T4DNA连接酶可以连接黏性末端和平末端，C正确；D、DNA连接酶可以将DNA片段连接成双链结构，对游离的单个脱氧核苷酸进行连接的是DNA聚合酶，D错误。故选C。18.下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。下列

相关叙述正确的是（）A.②的构建需要限制性内切核酸酶和DNA聚合酶参与B.③导入④后，重组Ti质粒整合到④的染色体DNA上C.②到③过程，需要钙离子处理，有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中D.⑤只

要表现出抗虫性状就表明植株发生了不可遗传变异【答案】C【解析】【分析】基因工程的工具酶包括限制酶和DNA连接酶。农杆菌特点：易感染双子叶植物和裸子植物，对大部分单子叶植物没有感染力；Ti质粒的T-DNA可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体

上。目的基因导入受体细胞后需要进行检测和鉴定，才能确定其是否导入或成功表达。【详解】A、②重组质粒的构建需要限制性内切核酸酶和DNA连接酶参与，DNA聚合酶一般用于DNA复制过程，A错误；B、③侵染④植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到植物细胞

的染色体上，B错误；C、将重组质粒导入农杆菌，常用钙离子处理，使农杆菌处于感受态，易于吸收周围的DNA分子，有助于促进重组Ti质粒转化到农杆菌细胞中，C正确；D、⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异，D错误。故选C。19.用A和B两种限制酶分别处理同一DNA片段（限制酶在对应切点一定能切

开），电泳分离结果如图1和图2所示。下列叙述错误的是（）A.图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶A的酶切位点B.用酶A和酶B同时处理图1中DNA片段可增加6个游离的磷酸基团C.若用酶A和酶B同时处理该DNA片段，则电泳后得到5种产物D.电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料

能与DNA结合，便于在紫外灯下观察【答案】C【解析】【分析】限制酶酶切，是一项基于DNA限制酶的基因工程技术，其基本原理是利用限制酶对DNA上特定序列的识别，来确定切割位点并实现切割，从而获得所需的特定序列。【详解】A、图2的结果①得到的碱基对数分别是500、3500、6000，结果

②得到的碱基对数分别是2000、8000，结合图1可推测Y是限制酶A的酶切位点，X代表的碱基对数为4500，即图1中有两个限制酶A的酶切位点，切割完后得到三个长度的片段：3500、（4500+1500）、500，正好与图2的酶①结果相符，A正

确；B、限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段，可断开6个磷酸二酯键，最终得到6个游离的磷酸基团，B正确；C、由题干信息限制酶在对应切点一

定能切开，可知用酶A和酶B同时处理该DNA可以得到4个DNA片段，电泳后得到4种产物，C错误；D、用电泳缓冲液配制的琼脂糖溶液中加入的核酸染料能与DNA分子结合，便于在紫外灯下观察条带，D正确。故选C。20.荧光定量PCR是一种定量

计算待测样品的初始模板量的方法。在PCR反应体系中加入特异性的荧光探针，荧光探针可以掺入新合成的DNA链中，每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，通过对扩增反应中的荧光强度进行实时检测，最后通过标准曲线定

量计算初始模板量。如图为某荧光定量PCR的标准曲线。下列说法错误的是（）A.一定范围内，荧光强度与扩增出的DNA量呈正相关B.每个反应管内荧光探针的量相同C.样品甲的初始模板量大于样品乙D.荧光强度不再变化时PCR反应停止【答案】D【解析】【分析】P

CR的原理是DNA双链复制，步骤包括高温变性、复性、延伸，该过程需要耐高温的DNA聚合酶催化，需要四种游离的脱氧核苷酸做原料。【详解】A、在PCR反应体系中加入特异性的荧光探针，荧光探针可以掺入新合成的DN

A链中，每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，因此一定范围内，荧光强度与扩增出的DNA量呈正相关，A正确；B、最终各反应管的荧光强度一样，说明每个反应管内添加的荧光探针的量相同，B正确；C、PCR扩增时，相

同时间内形成的DNA数量越多，每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，因此DNA数量越多，荧光强度越大，样品甲达到最大荧光强度所用的时间短于乙，因此样品甲的初始模板量大于样品乙，C正确；D、荧光强度不再变化可能是因为荧光探针或原料等消耗尽，若为前者，此后PCR反应仍在进行，D错误。故选

D。21.科学家为了提高某种果实的储藏时间，从该植物体内提取Ers1基因（乙烯受体基因），按照下图示的流程将Ers1基因重新导回该植物，使该植物原有Ers1基因的翻译受到抑制。已知限制酶Hpal切割后为平末端，Xhol和BamH1切割后露出的黏性末端碱基序列不同，

据图分析，提取的目的基因PCR时两端需添加的限制酶识别序列为（）注：LB、RB分别为T-DNA的左边界、右边界A.目的基因A端添加Hpal的识别序列，B端添加Xhol的识别序列B.目的基因A端添加Xho1的识别序列，B端添加Hpal的识别序列C.目的基因

A端添加Xhol的识别序列，B端添加BamH1的识别序列D.目的基因A端添加BamH1的识别序列，B端添加Xhol的识别序列【答案】B【解析】【分析】构建基因表达载体前，需要运用PCR技术对含有目的基因的DNA片段进行扩增。【详解】由于质粒的启动子内有Bam

HI的切割位点，所以目的基因两端不能添加BamHI的识别序列；若要使插入的目的基因能抑制原有Ersl基因的表达，该目的基因应反向插入T-DNA中，使其转录的mRNA与细胞中原有Ersl基因转录的mRNA互补而抑制其翻译，再结合目的基因的转录

方向，可确定目的基因A端添加XhoI的识别序列，B端添加HpaI的识别序列；目的基因A端添加HpaI的识别序列，B端添加HpaI的识别序列，不能确保目的基因反向插入T-DNA中，ACD错误，B正确。故选B。22.棉蚜体

内有多种寄生蜂的卵。初级寄生蜂将卵产于棉蚜体内，幼虫取食棉蚜组织导致棉蚜死亡，形成僵蚜。重寄生蜂的卵在初级寄生蜂的幼虫体内孵化并从中获得营养。现利用PCR技术对僵蚜及其体内寄生蜂种类进行检测，为了一次鉴定出多种目标昆虫

，加入同一PCR体系的引物应满足（）①每对引物扩增的序列对应一种昆虫②每对引物扩增的序列对应多种昆虫③每对引物扩增的产物长度不同④每对引物扩增的产物长度相同⑤所有引物之间不能相互配对⑥所有引物的长度相同A.

①③⑤B.②④⑥C.②③⑥D.①④⑤【答案】A【解析】【分析】引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸，且引物之间不能发生碱基互补配对。【详解】要用多对引物一次鉴定出多种生物，那么每种生物要有对应的引物与其DNA特有的碱基序列配对，引物之间不能互补配

对，扩增的产物长度要有所不同，以便在电泳时可以区分出不同生物的片段，即①③⑤符合题意，A正确，BCD错误。故选A。23.模型构建是生命科学教学、研究和学习的一种重要方法。下图是生物概念模型，相关分析或理解错误的是（）A.若图示

为动物体细胞融合技术，则D可能是杂交瘤细胞B.若图示为基因工程，则C为重组质粒，D为受体细胞C.若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞D.若图示为试管婴儿技术，D为婴儿，C→D的过程在试管中进行【答案】D【解析】【分析】试管婴儿是体外受精－胚胎

移植技术的俗称，是指采用人工方法让卵细胞和精子在体外受精，并进行早期胚胎发育，然后移植到母体子宫内发育而诞生的婴儿。【详解】A、若图示为动物体细胞融合技术，D是C经过筛选得到的，则D可能是杂交瘤细胞，A正确；B、若图示为基因工程，则C为重组质粒

，是目的基因和载体相连形成的，D为受体细胞，为重组质粒的表达提供条件，B正确；C、动物核移植需要将供体的细胞核或细胞移植到去核卵母细胞中，若图示为核移植技术，则B可能为去核卵母细胞，此时A可能是细胞核供体细胞，C正确；D、若图示为试管婴儿技术，D为婴儿，C→D的早期

胚胎发育过程在试管中进行，但胚胎移植之后的过程在母体子宫中进行，D错误。故选D。24.在Mg2+存在的条件下，DNA聚合酶可被激活。下列相关说法正确的是（）A.细菌细胞的DNA聚合酶发挥作用不需要Mg2+B.PCR技术中的DNA聚合酶在90℃条件下不会失活C.DNA聚合酶

需先与启动子结合，继而从引物的3'端延伸子链D.真核细胞内的DNA聚合酶均属于在细胞核内发挥作用的亲核蛋白【答案】B【解析】【分析】PCR技术的条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（

Taq酶）；PCR的操作过程：①高温变性：DNA解旋过程（PCR扩增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开）；低温复性：引物结合到互补链DNA上；③中温延伸：合成子链。【详解】A、细菌细胞的DNA聚合酶发挥作用也需要M

g2+，A错误；B、DNA聚合酶在90℃条件下不会失活，B正确；C、DNA聚合酶需不与启动子结合，C错误；D、真核细胞内的DNA聚合酶也可以在细胞质发挥作用，D错误。故选B。25.基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的。下列

哪些成果为基因工程的诞生奠定了基础（）①科学家完成人类基因组的测序工作②穆里斯等人发明快速扩增目的基因的PCR技术③科学家证明质粒可将外源基因导入受体细胞并成功表达④肺炎链球菌转化实验证明了遗传物质DNA可在同种生物不同个体间转移A.①②B.②③C

.①④D.③④【答案】D【解析】【分析】肺炎链球菌转化实验包括格里菲思体内转化实验和艾弗里体外转化实验，其中格里菲思体内转化实验证明S型菌中存在某种转化因子，能将S型菌转化为R型菌；艾弗里体外转化实验证明DNA是遗传物质

【详解】①、科学家完成人类基因组的测序工作是在基因工程之后，①错误；②、穆里斯等人发明快速扩增目的基因的PCR技术也是在基因工程问世之后，②错误；③、科学家证明质粒可将外源基因导入受体细胞并成功表达，为基因工程奠定基础，③正确；④、肺炎链球菌转化实验证明了遗传物质DNA可在同种生物不同个体

间转移，让重组DNA成为可能，④正确。故选D。26.下列技术或方法与原理相符的是（）A.人参细胞的大量培养和动物细胞培养——细胞增殖B.植物组织培养和单克隆抗体的制备——细胞的全能性C.动物细胞培养和人鼠细胞融合——细胞膜的流动性D.转基因抗虫棉和克

隆羊多利的培育——基因重组【答案】A【解析】【分析】1、细胞的全能性指高度分化的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能；植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性；2、单克隆抗体的制备过程没

有将细胞培养成个体，其原理属于细胞增殖；3、动物细胞培养进行的是有丝分裂，没有体现细胞膜的流动性；\4、人鼠细胞融合涉及细胞膜的融合过程，故体现细胞膜的流动性这一结构特点；5、转基因抗虫棉的培育利用的是

基因工程技术，其原理是基因重组；6、克隆羊多利的培育运用的是核移植技术，其原理是动物细胞核的全能性。【详解】A、人参细胞培养和动物细胞的培养中细胞要进行有丝分裂，故体现了细胞增殖这一原理，A正确；B、植物的组织培养是将离体的细胞培养成植株的过程，体现细胞的全能性，单克隆抗体的制备过程没有将细胞

培养成个体，其原理属于细胞增殖，B错误；C、动物细胞培养进行的是有丝分裂，体现了细胞的增殖能力，没有体现膜的流动性，人鼠细胞融合体现了细胞膜的流动性，C错误；D、转基因抗虫棉的培育是基因工程，原理是基因重组，克隆羊多利的培育是核移植，胚胎移植，无基因重组，D错误。故选A。27.蛋

白质工程是研究蛋白质结构和功能的重要手段，下列关于蛋白质工程的叙述，正确的是（）A.蛋白质工程中可以不用构建基因表达载体B.通过蛋白质工程改造后获得的性状不能遗传给后代C.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作D.蛋白质工程可

以通过增加酶内部二硫键数目提高酶的热稳定性【答案】D【解析】【分析】蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。蛋白质工程是通过修改基因或创造合成新基因来改变生物的遗

传和表达形状，合成新的蛋白质。蛋白质工程是对基因进行修饰改造或重新合成，然后进行表达，须构建基因表达载体；蛋白质工程获得的是自然界没有的蛋白质；蛋白质工程是在基因水平上改造基因。【详解】A、蛋白质工程是基因工程的延伸，需要构建表达载体，A错误；B、由于蛋白质工程是直接对基因进行修饰或合成基因，改造

后的性状可以遗传给后代，B错误；C、基因的结构决定蛋白质的结构，因此，要对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过改造基因来完成，而不是直接对蛋白质分子进行操作，C错误；A、蛋白质工程可以通过增加二硫键数目来提高热稳定性，例如为了提高T4溶菌酶的耐热性，将3

号位的异亮氨酸换成半胱氨酸，在3号和97号半胱氨酸之间形成一个二硫键，使得T4溶菌酶耐热性得到提高，D正确。故选D。28.干扰素是动物细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白，可用于对抗病毒的感染和癌症，但体外保存相当困难。下图是利用蛋白质工程设计生产干扰素的流程图，错误的是（）A.

图中构建新的干扰素模型的主要依据是蛋白质的预期功能B.图中新的干扰素基因必须插入质粒上的起始密码子和终止密码子之间才能表达C.图中改造干扰素结构的实质是改造干扰素基因的结构D.图中各项技术环节中，有些需要通过基因工程实现【答案】B【解析】【分析】蛋白质工程是将控制蛋白

质的基因进行修饰改造或合成新的基因，然后运用基因工程合成新的蛋白质。蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列（基因）。蛋白质工程得到的蛋白质一般不是天然存在的蛋白质。【详解】A、由

题干可知，题图是利用蛋白质工程设计生产干扰素的流程图，而蛋白质工程的主要依据是蛋白质的预期功能，因此图中构建新的干扰素模型的主要依据是蛋白质的预期功能，A正确；B、启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，从而驱动转录，而终止子提供转录终止的信号

，因此图中新的干扰素基因必须插入质粒上的启动子和终止子之间才能表达，B错误；C、蛋白质工程的实质是对基因进行操作，操作简单，且能遗传给后代，即图中改造干扰素结构的实质是改造干扰素基因的结构，C正确；D、合成新的干扰素基因后，要构建基因

表达载体在受体细胞中表达，这属于基因工程技术，D正确。故选B。29.抗虫和耐除草剂玉米双抗12-5是我国自主研发的转基因品种。为给监管转基因生物安全提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。下列叙述正确的是（）A.预变性过程可促进模板DNA边解旋边复制B.后延伸过程

可使目的基因的扩增更加充分C.延伸过程无需引物参与即可完成半保留复制D.转基因品种经检测含有目的基因后即可上市【答案】B【解析】【分析】PCR过程为：①变性，当温度上升到90℃以上时，氢键断裂，双链D

NA解旋为单链；②复性，当温度降低到50℃左右是，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合；③延伸，温度上升到72℃左右，溶液中的四种脱氧核苷酸，在DNA聚合酶的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。【详解】A、预变性是使模板DNA充分变性，A错误；B、后延伸过程后延

伸是为了让引物延伸完全并让单链产物完全退火形成双链结构，可使目的基因的扩增更加充分，B正确；C、延伸过程需引物参与，C错误；D、转基因品种不只需要检测是否含有目的基因，还要检测是否表达，还有安全性问题，D错误；故选B。30.生物技术是以现代生命科学理论

为基础，在个体、细胞及分子水平上研究及制造产品或改造动物、植物、微生物等，并使其具有所期望的品质和特性。下列叙述错误的是（）A.干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，但也可能面临安全性问题B.蛋白质工程是在基因操作水平上改造或创造新的蛋白质C

.治疗性克隆的研究与应用必须受到相应法律法规的规范限制D.生物武器主要影响人畜健康，对植物的影响不大【答案】D【解析】【分析】干细胞：动物或人体内保留的具有分裂和分化能力的细胞，在一定的条件下，干细胞可以分化

成其他类型的细胞。【详解】A、干细胞培养在临床医学等领域前景广泛，但可能存在安全性问题，A正确；B、蛋白质工程通过设计蛋白质结构进而对基因进行操作来改造或创造新的蛋白质，B正确；C、治疗性克隆的研究与应用必须受到相应法

律法规的规范限制，我国明令禁止生殖性克隆，C正确；D、生物武器对人畜、植物等均可能造成重大伤害，D错误。故选D。二、非选择题（共40分）31.人类很早就能制作果酒，并用果酒进一步发酵生产果醋。（1）人们利用水果及附着在果皮上的______菌，在18～25℃、无氧条件下酿造

果酒；在利用醋酸菌在______条件下，将酒精转化成醋酸酿得果醋。酿造果醋时，得到了醋酸产率较高的醋酸菌群，为进一步纯化获得优良醋酸菌菌种，采用的接种方法是_______________。（2）先酿制果酒再生产果醋的优势有______（填

编号）。①先酿制果酒，发酵液能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率②酿制果酒时形成的醋酸菌膜，有利于提高果醋的产率③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中（3）果酒中的酒精含量对果醋的醋酸产率会产生一定的影

响。某技术组配制发酵液研究了初始酒精浓度对醋酸含量的影响，结果见图。该技术组使用的发酵液中，除酒精外还包括的基本营养物质有_______________（填写两种）。据图可知，醋酸发酵的最适初始酒精浓度是______；酒精浓度为10%时醋酸含量最低，此时，若

要尽快提高醋酸含量，可采取的措施有____________________________（填写两个方面）。【答案】（1）①.酵母菌②.30～35℃，有氧③.#稀释涂布平板法##平板划线法#（2）①③（3）①.氮源、无机盐

、水②.6%③.适当降低初始酒精浓度，增加氧气供应，适当提高温度等【解析】【分析】1、在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。醋酸菌是好氧菌，最是生长温度为30～35℃。微生物最常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。2、酿制果酒，发酵液中产生的酒精能

抑制杂菌的生长。3、培养基的成分，四大基础营养物质分别是碳源、氮源、水、无机盐。【小问1详解】在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。醋酸菌是好氧菌，最适生长温度为30～35℃。微生物最常用的接种方法是稀释涂布平板法和平板划线法。【小问2详解】①先酿制果酒，发酵液

能抑制杂菌的生长，有利于提高果醋的产率，①正确；②酿制果酒时形成的醋酸菌膜会造成局部缺氧，导致果醋产率不高，②错误；③果酒有利于溶出水果中的风味物质并保留在果醋中，增加果醋风味，③正确。故选①③。【小问3详解】微生物生长基本营养物质：氮源，碳源，

水，无机盐等，题中酒精作为碳源。酒精浓度为6%时，醋酸含量最高，是发酵的最适浓度。提高醋酸含量，可采取的措施有适当降低初始酒精浓度，增加氧气供应，适当提高温度等。32.美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期

起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下。回答下列问题：（一）基因工程抗原的制备（1）根据美西螈CD14基因核苷酸序列，合成引物，利用PCR扩增

CD14片段。已知DNA聚合酶催化引物的3’—OH与加入的脱氧核苷酸的5’—P形成磷酸二酯键，则新合成链的延伸方向是_____（填“5’→3’”或“3’→5’”）。（2）载体和CD14片段的酶切位点及相应的酶切抗性基因序列如图1

所示。用XhoI和Sal1分别酶切CD14和载体后连接，CD14接入载体时会形成正向连接和反向连接的两种重组DNA．可进一步用这两种限制酶对CD14的连接方向进行鉴定，理由是_____。培养能表达CD14蛋白的大肠杆菌，分离纯化目的蛋白。（二）抗CD14单克隆抗

体的制备流程如图2所示：（3）步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射_____和_____。（4）步骤②所用的SP2/0细胞的生长特点是_____。（5）吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需

加入①进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是②。（6）步骤⑥从_____中提取到大量的抗CD14抗体，用于检测巨噬细胞。的【答案】（1）5'→3'（2）正向连接的重

组DNA有这两种酶切位点（限制酶的识别序列）；而反向连接的重组DNA会形成新的序列，没有这两种酶的酶切位点（没有限制酶的识别序列）（3）①.CD14蛋白/CD14抗原②.分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞（4）能在体外无限增殖（5）①.CD14蛋

白②.参与形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，有的不能分泌抗CD14抗体（6）小鼠腹水【解析】【分析】1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子

链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。2、单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定

抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培

养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【小问1详解】PCR扩增时，DNA聚合酶催化引物的3'-OH与加入的脱氧核苷酸的5'-P形成磷酸二酯键，因此新链合成的方向是从5'→3'。【小问2详解】可进一步用限制酶XhoⅠ和SalⅠ对CD14的连接方向进行鉴定，是因为正向连接的重组DNA有这

两种酶切位点（限制酶的识别序列）；而反向连接的重组DNA会形成新的序列，没有这两种酶的酶切位点（没有限制酶的识别序列）。【小问3详解】步骤①是注射特定抗原，针对本实验目的可知，要获得抗CD14单克隆抗体，故应该注射CD14蛋白/CD14抗原；步骤⑤是将分泌抗CD14抗体的杂交瘤细

胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体。【小问4详解】步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞，特点是能在体外无限增殖。【小问5详解】根据抗原—抗体杂交原理，应该用CD14蛋白检测其中是否含抗CD14蛋白的抗体。因为形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，因此有

些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体。【小问6详解】从制备单克隆抗体的流程可知，将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔后，最终要从小鼠的腹水中提取抗CD14抗体。33.妊娠与子宫内膜基质细胞的功能密切相关。某研究小组通过如

图所示的实验流程获得了子宫内膜基质细胞，以期用于妊娠相关疾病的研究。（1）手术获得的皮肤组织需在低温下运至实验室，低温对细胞中各种蛋白质的作用为_____。（2）过程①中，诱导形成PS细胞时，需提高成纤维细胞中4个基因的表达量，可采用_____技术将这些基因导入该细胞。这4

个基因的主要作用为：M基因促进增殖，S基因和C基因控制干细胞特性，K基因抑制凋亡和衰老。若成纤维细胞形成肿瘤细胞，最有可能的原因是_____基因过量表达。（3）培养iPS细胞时，应对所处环境定期消毒以降低细胞被污染风险。可用紫外线进行消毒的是_____（多选）。A.培养

基B.培养瓶C.细胞培养室D.CO2培养箱（4）过程②中，iPS细胞经历的生命历程为_____。PCR技术可用于检测子宫内膜基质细胞关键基因的mRNA水平，mRNA需经过_____才能作为PCR扩增的模板。【答案】（1）抑制酶的活性（降低蛋白质或酶的活性），防止蛋白质变性（2）①.转基因②.

M（3）CD（4）①.增殖分化②.逆转录/反转录【解析】【分析】1、构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳定存在并且可以遗传给下一代并表达和发挥作用。基因表达载体的组成：复制原点+目的基因+启动子+终止子+标记基因。2、动物细胞培养的条件

：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物。（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和pH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7

.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。【小问1详解】低温可以抑制酶的活性，防止蛋白质变性，使细胞中的蛋白质维持正常的生理功能。【小问2详解】将外源基因导入细胞内，通常需要转基因技术。即过程①中，诱

导形成PS细胞时，需提高成纤维细胞中4个基因的表达量，可采用转基因技术将这些基因导入该细胞。M基因促进增殖，S基因和C基因控制干细胞特性，K基因抑制凋亡和衰老。肿瘤细胞（癌细胞）具有无限增殖的能力，因此若成纤维细胞形成

肿瘤细胞，最有可能的原因是M基因过量表达造成的。【小问3详解】培养iPS细胞时，应对所处环境定期消毒以降低细胞被污染风险。可用紫外线对细胞培养室和CO2培养箱进行消毒处理，而对培养基和培养瓶需要进行灭菌处理，

因此AB错误，CD正确。故选CD。【小问4详解】由图可知，过程②中，iPS细胞经过细胞的分裂分化，即增殖分化，形成了体腔上皮。PCR扩增的模板为DNA，因此若想利用PCR技术检测子宫内膜基质细胞关键基因的mRNA水平，mRNA需经过逆转录过程形成DN

A，才可作为PCR的模板。34.用DNA重组技术可以赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人类需要的生物产品。在此过程中需要使用多种工具酶，其中4种限制性核酸内切酶的切割位点如图所示。回答下列问题：（1）常用的DNA连接酶有E.coliDNA连接酶和T4DNA连

接酶。上图中__________酶切割后的DNA片段可以用E.coliDNA连接酶连接。上图中___________酶切割后的DNA片段可以用T4DNA连接酶连接。（2）DNA连接酶催化目的基因片段与质粒载体片段之间形

成的化学键是____________。（3）DNA重组技术中所用的质粒载体具有一些特征，如质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能___________；质粒DNA分子上有______________，便于外源DNA插入；质

粒DNA分子上有标记基因（如某种抗生素抗性基因），利用抗生素可筛选出含质粒载体的宿主细胞，方法是______________。（4）表达载体含有启动子，启动子是指__________________。【答案】①.EcoRI、PstI②.Ec

oRI、PstI、SmaI和EcoRV③.磷酸二酯键④.自我复制⑤.一至多个限制酶切位点⑥.用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞，能够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞⑦.位于基因首端的一段特殊DNA序列，是RNA聚合酶识别及结合的部位，能驱动转录过程【解析】【分析】基因工程至少需要三种工具：限制性

核酸内切酶（限制酶）、DNA连接酶、运载体。【详解】（1）限制酶EcoRI和PstI切割形成的是黏性末端，限制酶SmaI和EcoRV切割形成的是平末端，E.coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来，

而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端，但连接效率较低。因此图中EcoRI和PstI切割后的DNA片段（黏性末端）可以用E.coliDNA连接酶连接，除了这两种限制酶切割的DNA片段，限制

酶SmaI和EcoRV切割后的DNA片段（平末端）也可以用T4DNA连接酶连接。（2）DNA连接酶将两个DNA片段连接形成磷酸二酯键。（3）质粒是小型环状的DNA分子，常作为基因表达的载体，首先质粒上含有复制原点，能保

证质粒在受体细胞中自我复制。质粒DNA分子上有一个至多个限制性核酸内切酶的酶切位点，便于目的基因的导入。质粒上的标记基因是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，具体做法是用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞，能够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞。（4）启动子是一段特殊结构的DNA片段

，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得需要的蛋白质。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节

，能结合所学的知识准确答题。