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考点39细胞工程第一关辨析判别夯基固本1．有关细胞全能性与组织培养的判断(1)棉花根尖细胞经诱导可形成幼苗能体现细胞的全能性。()(2)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性。()(3)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不会发生细胞的增殖和分化

。()(4)愈伤组织是外植体通过脱分化和再分化后形成的。()(5)经植物组织培养得到的胚状体用人工薄膜包装后可得到人工种子。()2．有关植物体细胞杂交技术的判断(1)利用物理法或化学法可以直接将两个植物细胞进行诱导融合。()(2)

用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性。()(3)再生出细胞壁是原生质体融合成功的标志。()(4)培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是细胞杂交。()3．有关动物细胞培养的判断(1)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白

酶处理。()(2)在对肝细胞的培养过程中，通常在培养液中通入5%的CO2以刺激细胞呼吸。()(3)在25℃的实验条件下可顺利完成大鼠神经细胞的培养。()(4)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。()(5)克隆培养法培养过程中，多数细胞的基因型会发生改

变。()(6)二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的。()4．有关动物细胞核移植的判断(1)动物细胞核移植的受体细胞必须是卵细胞。()(2)克隆动物的性状与供体动物完全相同。()(3)与“多利”羊等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植、动物细胞

培养和核移植。()(4)用于核移植的供体细胞一般都选用10代以内的培养细胞。()5．动物细胞融合与单克隆抗体的制备(1)植物原生质体融合与动物细胞融合原理是相同的。()(2)体细胞杂交技术可用于克隆动物

和制备单克隆抗体。()(3)小鼠骨髓瘤细胞的染色体数为40，B淋巴细胞的染色体数为46，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86。()(4)对杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎。()(5

)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞类型(若仅考虑两两融合的情况)。()第二关大题精做规范准练题组一模拟题1．[2023·浙江绍兴一模]植酸又名肌醇六磷酸，通常不能被猪等单胃动物吸收，传统的做法是在饲料中添加基因工程来源的外源性植酸酶，植酸酶能将植酸中的

有机磷降解为动物可吸收的无机磷，不仅可提高猪的生长效率，还能降低猪粪对环境的污染。回答下列问题：(1)培育生产植酸酶的转基因酵母时，将酵母菌与重组质粒共培养一段时间后，使用________法将培养物接种到含有特定抗生素的平板上进行筛选，再将平板上的______

__稀释后，分别接种到含植酸的液体培养基中进行扩大培养，选取培养基上________含量低的酵母菌种。用于酵母菌扩大培养的液体培养基，与分离所用的平板相比，最主要的差别是___________________

_____________________________________________________________________________________________________________________________。(2)培

育转植酸酶基因玉米时，由于农杆菌难以感染单子叶植物细胞，通常需要先使用________法制备原生质体，再进行显微注射。原生质体发育成试管苗的关键是培养基中生长调节剂的________。转基因玉米的果穗、秸秆可直接制成复合饲料，免去了________所需的成本。(3)近年来，科研人员又

进行了以猪腮腺作为生物反应器生产内源性分泌型植酸酶的研究。将无菌采集的猪胚胎组织建成胚胎成纤维细胞系，长满培养瓶后的细胞需经________后转移到多个培养瓶进行传代培养。将植酸酶基因导入胚胎成纤维细胞，使用的表达载体上需要具有绿色荧光蛋白EGFP基因以及猪

腮腺分泌蛋白基因的启动子和终止子，以便于________、________。收集EGFP表达阳性的细胞进行克隆，一部分细胞进行破碎后用限制酶切DNA，利用核酸分子杂交技术或PCR与________技术进行植酸酶基

因鉴定，另一部分细胞用于转基因克隆胚胎构建。通过比较转基因猪和非转基因猪粪便中________，可说明转基因模型猪腮腺生物反应器的表达效率。2．[2023·陕西省汉中中学模拟]2020年5月，中国科研团队发现了可有效阻断新冠病毒(SARS­CoV­2)感染的单克隆抗体，可用于抗新冠药物和疫苗的研发

。该单克隆抗体如注射进入人体，将抢先与新冠病毒的刺突蛋白(S蛋白)结合，使病毒无法感染人体细胞，从而被免疫系统清除。如图是单克隆抗体制备过程示意图，1～6代表相关过程，a～e代表相关细胞。请据图回答下列问题：(1)生产单克隆抗体一般不宜直接培养免疫过的B淋巴细胞，

主要原因是____________；通过过程5或6生产的单克隆抗体的优点是________________________________________________________________________

。(2)过程2是细胞融合，和植物细胞融合相比，特有的技术是用________处理。(3)e细胞是________________________________________________________________________，其特点是

________________________________________________________________________。3．[2023·广东开平市忠源纪念中学模拟]自2019年以来，由

新型冠状病毒(SARS－CoV－2)引起的新冠肺炎疫情在全球范围内广为传播，给人们的生产生活造成了严重影响。核衣壳蛋白N是SARS－CoV－2主要的结构蛋白之一，在病毒的复制与免疫调节中发挥着重要作用。研究人员为制备蛋白N的单克隆抗体，进行了如下实验。回答下列问

题。(1)重组质粒pET28a－N中的目的基因可根据SARS－CoV－2的基因序列进行________获得。步骤②中溶菌酶处理的目的是________________。实验中不直接从新型冠状病毒(SARS－CoV－2)中提取蛋

白N而通过BL21菌生产的原因可能是________________________________________________________________________________________________

________________________________________________________________________________________________________________________(答出一点即

可)。(2)步骤④中通常要多次注射，原因是____________________________________________________________________________________

____________________________________________________________。步骤⑧中在进行单克隆抗体生产前需要对目标细胞进行__________________________________________

______________________________。(3)蛋白N的单克隆抗体作用可能有__________________________________________________________________________

______________________________________________________________________。(至少答出2点)4．[2023·陕西西乡一中模拟]目前我国超过82万人感染艾滋病，预防工作迫在眉睫。科学工作者从

HIV感染自愈者体内采集相应免疫细胞，使之与骨髓瘤细胞融合，生产抗HIV抗体，具体过程如图所示，请据图回答问题：HIV自愈者免疫细胞骨髓瘤细胞――→融合甲――→①乙――→②丙――→分泌抗HIV单克隆抗体(1)HIV自

愈者免疫细胞是指________，甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是________，②过程的目的是筛选具有______________(特点)的杂交瘤细胞。(2)转基因技术被运用到HIV疫苗的研制工作中，该技术操作的核心步骤是____

________________，为使目的基因在受体细胞中正常表达，需要把目的基因片段插入到表达载体的______________之间。(3)用DNA­RNA分子杂交技术可确定目的基因是否完成了________过程。(4)科学工作者发现一种D蛋白，其31号位的色氨酸换

成酪氨酸后，就能与HIV表面的糖蛋白结合，从而使HIV病毒失去侵染T细胞的能力。制造这种新型蛋白质防治艾滋病，用到的现代生物工程技术是___________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________。5．[2023·广西北海市高三第一次模拟考试]人绒毛膜促性腺激素

(HCG)是妊娠后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于检测早孕。图甲是抗HCG单克隆抗体的制备流程示意图，其中X、Y表示细胞，a～f表示过程；图乙是医学上定量检测抗原的双抗体夹心法原理示意图，单克隆抗体可以增强该方法的效

果。回答下列问题：(1)a过程培养的Y细胞是____________，b过程常用的诱导细胞融合的方法有________________(答出三点即可)，d过程的目的是_____________________________

___________________________________________。(2)f过程表示将杂交瘤细胞注射到小鼠________；单克隆抗体最主要的优点在于它________________________。(3)据图分析，用双抗体夹心法检测抗原

数量时，酶标抗体的作用是______________________________。上述方法中抗原至少需要含有________个抗体结合位点。现有多种抗HCG的单克隆抗体，欲筛选出两种适用于双抗体夹心法的单克隆抗体，可

通过检测并比较________来确定。6．[2023·吉林省长春市实验中学模拟]下图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题：(1)图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有________________(填写抗体的名称)的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低，而

且纯度低。与其相比，单克隆抗体突出的优点在于它的________________，并能大量制备。(2)图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，说明细胞膜具有________；如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有________种

类型。(3)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出________________，筛选②的目的是筛选出________________________________________________________________________。(4)用于

治疗癌症的“生物导弹”就是由__________________________和__________________________相结合制成，请指出用“生物导弹”治疗癌症的优点__________

______________________________________________________________________________________________________________________________________。7．[高考改

编]某植物有A、B两品种。科研人员在设计品种A的组织培养实验时，参照品种B的最佳激素配比(如下表)进行预实验。品种B组织培养阶段细胞分裂素浓度(μmol/L)生长素浓度(μmol/L)Ⅰ诱导形成愈伤组织m1n1Ⅱ诱导形成幼芽m2n2Ⅲ诱导生根m3n3据表回答：(1)Ⅰ阶段时，通常选择

茎尖、幼叶等作为外植体，其原因是______________________________________________。(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是________阶段。(3)为确定品种A的Ⅰ阶段的最适细胞分裂素浓度，参照品种B的激素配比(m1>2.

0)，以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，细胞分裂素的最高浓度应设为________μmol/L。(4)Ⅲ阶段时，科研人员分别选用浓度低于或高于n3μmol/L的生长素处理品种A幼芽都能达到最佳生根效果，其原因是处理幼芽时，选用低浓度生长素时的处

理方法为________，选用高浓度生长素时的处理方法为________________。(5)在________阶段用秋水仙素对材料进行处理，最易获得由单个细胞形成的多倍体。题组二高考题8．[2022·海南卷]以我国科学家为主的科研团队将OSNL(即4个

基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写)导入黑羽鸡胚成纤维细胞(CEFs)，诱导其重编程为诱导多能干细胞(iPS)，再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs)，然后将iPGCs注射到孵化2.5天的白羽鸡胚血管中，最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代，实验流程如图。回

答下列问题。(1)CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的，为了获得单细胞悬液，鸡胚组织剪碎后需用__________________处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加________等天

然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。(2)体外获取OSNL的方法有________(答出1种即可)。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白，需构建基因表达载体，载体中除含有目的基因和标记基因外，还须有启动子和________等。启动子是______

__识别和结合的部位，有了它才能驱动___________________________________________________________________________________________________________

_____________________________________。(3)iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是_________________________________________________________________

_______。(4)诱导iPS细胞的技术与体细胞核移植技术的主要区别是__________________________________________________________________________________

______________________________________________________________________________________________________________________________________。(5)该实验流程中用到的生物

技术有______________________________________________________________________________________________________________________________________

__________(答出2点即可)。9．[2022·辽宁卷]某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段，制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制备，流程如图1（1）构建重组慢病毒质粒时，

选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，目的是______________________________________________________________________________________________________________________

__________________________。用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体（填“双分子层中”或“两层磷脂分子之间”）。（2）质粒在包装细胞内组装出由组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N蛋

白胞外段。Ⅱ.N蛋白胞外段单克隆抗体制备，流程如图2（3）用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用酶处理，制成细胞悬液，置于含有混合气体的中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合

。（4）用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行培养。用技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集，提取单克隆抗体。（5

）利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成，实现特异性治疗。10．[2019·全国卷Ⅲ]培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示。回答下列问题。（1）利用胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗。用分化的植物细胞可以培养成完整的植株，这是因为植物细胞具有_____

___________________________________________________________________。（2）步骤③切取的组织块中要带有形成层，原因是_____________________________________

___________________________________。（3）从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基，其原因是_________________________________________________________________________________

_______________________________________________________________。在新的培养基上愈伤组织通过细胞的过程，最终可形成试管苗。（4）步骤⑥要进行照光培养，其作用是______________________

__________________________________________________________________________________________________________________________。（5）经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的，这种

繁殖方式属于繁殖。11．[2020·全国卷Ⅰ，38]为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：（1）上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是___________________________________________

_____________________________。（2）写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：_____________________________________________________

___________________________________________________________________________________________。（3）为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进

行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于，使用该培养基进行细胞培养的结果是。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是。（4）若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有（答出2点即可）。12．[全国卷

Ⅲ]2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列问题：（1）“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程，核移植是指。通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色

体数目（填“减半”“加倍”或“不变”）。（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度（填“大于”或“小于”）体细胞核移植，其原因是。（3）在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞的常

染色体数目（填“相同”或“不相同”），性染色体组合（填“相同”或“不同”）。13．[2021·湖南卷]M基因编码的M蛋白在动物A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技

术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如下图所示。回答下列问题：（1）在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是，这类酶能将特定部位的两个核苷酸之间的断开。（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行

动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是______________________________________________________________________

__________________________________________________________________________。（3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是_______________

_________________________________________________________________________________________________________________________________。从早期胚胎中分离获得的胚胎

干细胞，在形态上表现为（答出两点即可），功能上具有。（4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路______

________________________________________________________________________________________________________________________

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