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考点39细胞工程第一关辨析判别夯基固本1．有关细胞全能性与组织培养的判断(1)棉花根尖细胞经诱导可形成幼苗能体现细胞的全能性。()(2)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性。()(3)在诱导离体菊花茎段形成幼苗的过程中，不会发生细胞的增殖和分化。()(4)愈伤组织是外植体

通过脱分化和再分化后形成的。()(5)经植物组织培养得到的胚状体用人工薄膜包装后可得到人工种子。()2．有关植物体细胞杂交技术的判断(1)利用物理法或化学法可以直接将两个植物细胞进行诱导融合。()(2)用纤维素酶和果胶酶水解法获得的植物原生质体失去了全能性。()(3)再生出细胞壁是原生

质体融合成功的标志。()(4)培养草莓脱毒苗所采用的主要技术是细胞杂交。()3．有关动物细胞培养的判断(1)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处理。()(2)在对肝细胞的培养过程中，通常在培养液中通入5%的CO2以刺激细胞呼吸。()(3)在25℃的实验条

件下可顺利完成大鼠神经细胞的培养。()(4)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞。()(5)克隆培养法培养过程中，多数细胞的基因型会发生改变。()(6)二倍体细胞的传代培养次数通常是无限的。()4

．有关动物细胞核移植的判断(1)动物细胞核移植的受体细胞必须是卵细胞。()(2)克隆动物的性状与供体动物完全相同。()(3)与“多利”羊等克隆哺乳动物相关的技术有胚胎移植、动物细胞培养和核移植。()(4)用于核移植

的供体细胞一般都选用10代以内的培养细胞。()5．动物细胞融合与单克隆抗体的制备(1)植物原生质体融合与动物细胞融合原理是相同的。()(2)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体。()(3)小鼠骨髓瘤细胞的

染色体数为40，B淋巴细胞的染色体数为46，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为86。()(4)对杂交瘤细胞进行体内培养，是为了获得能产生单克隆抗体的胚胎。()(5)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞

类型(若仅考虑两两融合的情况)。()第二关大题精做规范准练题组一模拟题1．[2023·浙江绍兴一模]植酸又名肌醇六磷酸，通常不能被猪等单胃动物吸收，传统的做法是在饲料中添加基因工程来源的外源性植酸酶，植酸酶能将植酸中的有机磷降解

为动物可吸收的无机磷，不仅可提高猪的生长效率，还能降低猪粪对环境的污染。回答下列问题：(1)培育生产植酸酶的转基因酵母时，将酵母菌与重组质粒共培养一段时间后，使用________法将培养物接种到含有特定抗生素的平板上进行筛选，再将平板上的________

稀释后，分别接种到含植酸的液体培养基中进行扩大培养，选取培养基上________含量低的酵母菌种。用于酵母菌扩大培养的液体培养基，与分离所用的平板相比，最主要的差别是_____________________________________________________

___________________________________________________________________________________________。(2)培育转植酸酶基因玉米时，由于农杆菌难以感染单子叶植物细胞，通常需要先使用___

_____法制备原生质体，再进行显微注射。原生质体发育成试管苗的关键是培养基中生长调节剂的________。转基因玉米的果穗、秸秆可直接制成复合饲料，免去了________所需的成本。(3)近年来，科研人员又进行了以猪腮腺作为生物反应器生产内源性分泌型植酸酶的研究。将无菌采集的猪胚胎组织建成

胚胎成纤维细胞系，长满培养瓶后的细胞需经________后转移到多个培养瓶进行传代培养。将植酸酶基因导入胚胎成纤维细胞，使用的表达载体上需要具有绿色荧光蛋白EGFP基因以及猪腮腺分泌蛋白基因的启动子和终止子，以便于________、________。收集EGF

P表达阳性的细胞进行克隆，一部分细胞进行破碎后用限制酶切DNA，利用核酸分子杂交技术或PCR与________技术进行植酸酶基因鉴定，另一部分细胞用于转基因克隆胚胎构建。通过比较转基因猪和非转基因猪粪便中________，可说明转基因模型猪腮腺生物反应器的表达效率。2．[2023·

陕西省汉中中学模拟]2020年5月，中国科研团队发现了可有效阻断新冠病毒(SARS­CoV­2)感染的单克隆抗体，可用于抗新冠药物和疫苗的研发。该单克隆抗体如注射进入人体，将抢先与新冠病毒的刺突蛋白(S蛋白)结合，使病毒无法感染人体细胞，从而被

免疫系统清除。如图是单克隆抗体制备过程示意图，1～6代表相关过程，a～e代表相关细胞。请据图回答下列问题：(1)生产单克隆抗体一般不宜直接培养免疫过的B淋巴细胞，主要原因是____________；通过过程5或6生产的单克隆抗体的优点是_______________

_________________________________________________________。(2)过程2是细胞融合，和植物细胞融合相比，特有的技术是用________处理。(3)e细胞是_____________

___________________________________________________________，其特点是________________________________________________________________________。3．[2

023·广东开平市忠源纪念中学模拟]自2019年以来，由新型冠状病毒(SARS－CoV－2)引起的新冠肺炎疫情在全球范围内广为传播，给人们的生产生活造成了严重影响。核衣壳蛋白N是SARS－CoV－2主要的结构蛋白

之一，在病毒的复制与免疫调节中发挥着重要作用。研究人员为制备蛋白N的单克隆抗体，进行了如下实验。回答下列问题。(1)重组质粒pET28a－N中的目的基因可根据SARS－CoV－2的基因序列进行________获得。步骤②中溶菌酶处理的目的是__________

______。实验中不直接从新型冠状病毒(SARS－CoV－2)中提取蛋白N而通过BL21菌生产的原因可能是___________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________________________________________________________(答出一点即可)。(2)步骤

④中通常要多次注射，原因是__________________________________________________________________________________________________________

______________________________________。步骤⑧中在进行单克隆抗体生产前需要对目标细胞进行________________________________________________________________________。(3)蛋白N的单

克隆抗体作用可能有__________________________________________________________________________________________________________________________________

______________。(至少答出2点)4．[2023·陕西西乡一中模拟]目前我国超过82万人感染艾滋病，预防工作迫在眉睫。科学工作者从HIV感染自愈者体内采集相应免疫细胞，使之与骨髓瘤细胞融合，生产抗HIV抗体

，具体过程如图所示，请据图回答问题：HIV自愈者免疫细胞骨髓瘤细胞――→融合甲――→①乙――→②丙――→分泌抗HIV单克隆抗体(1)HIV自愈者免疫细胞是指________，甲、乙、丙中只含杂交瘤细胞的是________，②过程的目的是筛选具有______________(特点)

的杂交瘤细胞。(2)转基因技术被运用到HIV疫苗的研制工作中，该技术操作的核心步骤是____________________，为使目的基因在受体细胞中正常表达，需要把目的基因片段插入到表达载体的______________之间。(3)用DNA­R

NA分子杂交技术可确定目的基因是否完成了________过程。(4)科学工作者发现一种D蛋白，其31号位的色氨酸换成酪氨酸后，就能与HIV表面的糖蛋白结合，从而使HIV病毒失去侵染T细胞的能力。制造这种新型蛋白质防治艾滋病，用到的现代生物工程技术是___________________

_____________________________________________________________________________________________________________________________。

5．[2023·广西北海市高三第一次模拟考试]人绒毛膜促性腺激素(HCG)是妊娠后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于检测早孕。图甲是抗HCG单克隆抗体的制备流程示意图，其中X、Y表示细胞，a～f表示过程；

图乙是医学上定量检测抗原的双抗体夹心法原理示意图，单克隆抗体可以增强该方法的效果。回答下列问题：(1)a过程培养的Y细胞是____________，b过程常用的诱导细胞融合的方法有________________(答出三点即可)，d

过程的目的是________________________________________________________________________。(2)f过程表示将杂交瘤细胞注射到小鼠________；单克隆抗体最主要的优点在于它_________________

_______。(3)据图分析，用双抗体夹心法检测抗原数量时，酶标抗体的作用是______________________________。上述方法中抗原至少需要含有________个抗体结合位点。现有多种抗HCG的单克隆抗体，欲筛选出两种适用于双抗体夹心法的单克隆抗体

，可通过检测并比较________来确定。6．[2023·吉林省长春市实验中学模拟]下图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题：(1)图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有________________(填写抗体的名称)的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低

，而且纯度低。与其相比，单克隆抗体突出的优点在于它的________________，并能大量制备。(2)图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，说明细胞膜具有________；如果仅考虑细胞的两两融

合，其融合细胞有________种类型。(3)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出________________，筛选②的目的是筛选出_____________________________________________________________

___________。(4)用于治疗癌症的“生物导弹”就是由__________________________和__________________________相结合制成，请指出用“生物导弹”治疗癌症的优点___________________________________

_____________________________________________________________________________________________________________。7．[高考改编]某植物有A、B两品种。科研人员在设计品种A的组织培养

实验时，参照品种B的最佳激素配比(如下表)进行预实验。品种B组织培养阶段细胞分裂素浓度(μmol/L)生长素浓度(μmol/L)Ⅰ诱导形成愈伤组织m1n1Ⅱ诱导形成幼芽m2n2Ⅲ诱导生根m3n3据表回答：(1)Ⅰ阶段时，通常选择茎尖、幼

叶等作为外植体，其原因是______________________________________________。(2)在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ阶段中发生基因选择性表达的是________阶段。(3)为确定品种A的Ⅰ

阶段的最适细胞分裂素浓度，参照品种B的激素配比(m1>2.0)，以0.5μmol/L为梯度，设计5个浓度水平的实验，细胞分裂素的最高浓度应设为________μmol/L。(4)Ⅲ阶段时，科研人员分别选用浓度低于或高于n3μmol/L的生

长素处理品种A幼芽都能达到最佳生根效果，其原因是处理幼芽时，选用低浓度生长素时的处理方法为________，选用高浓度生长素时的处理方法为________________。(5)在________阶段用秋水仙素对材料进行处理，最易获得由单个细胞形成的多倍体。题组二高考题8．[2022·

海南卷]以我国科学家为主的科研团队将OSNL(即4个基因Oct4/Sox2/Nanog/Lin28A的缩写)导入黑羽鸡胚成纤维细胞(CEFs)，诱导其重编程为诱导多能干细胞(iPS)，再诱导iPS分化为诱导原始生殖细胞(iPGCs)，然后将iPGCs注射到孵化2.5

天的白羽鸡胚血管中，最终获得具有黑羽鸡遗传特性的后代，实验流程如图。回答下列问题。(1)CEFs是从孵化9天的黑羽鸡胚中分离获得的，为了获得单细胞悬液，鸡胚组织剪碎后需用__________________处理。动物细胞培养通常需要在合成培养基中添加_______

_等天然成分，以满足细胞对某些细胞因子的需求。(2)体外获取OSNL的方法有________(答出1种即可)。若要在CEFs中表达外源基因的蛋白，需构建基因表达载体，载体中除含有目的基因和标记基因外，还须有启动子和________等。启动子是________识别和结合的部位，有了它才能

驱动_____________________________________________________________________________________________________________________________________________

___。(3)iPS细胞和iPGCs细胞的形态、结构和功能不同的根本原因是________________________________________________________________________。(4)诱导iPS细胞的技术与体细胞核移植

技术的主要区别是_______________________________________________________________________________________________________________

_________________________________________________________________________________________________________。

(5)该实验流程中用到的生物技术有________________________________________________________________________________________________________________________________

________________(答出2点即可)。9．[2022·辽宁卷]某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中，需要表达N蛋白胞外段，制备相应的单克隆抗体，增加其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗

原制备，流程如图1（1）构建重组慢病毒质粒时，选用氨苄青霉素抗性基因作为标记基因，目的是_________________________________________________________________________________________________________

_______________________________________。用脂质体将重组慢病毒质粒与辅助质粒导入病毒包装细胞，质粒被包在脂质体（填“双分子层中”或“两层磷脂分子之间”）。（2）质粒在包装细

胞内组装出由组成的慢病毒，用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分离、纯化N蛋白胞外段。Ⅱ.N蛋白胞外段单克隆抗体制备，流程如图2（3）用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后，取小鼠脾组织用酶处理，制成细胞悬液，置于含有混合气体的中培养，离心收集小鼠的B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞进行融合。（4）

用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选，获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行培养。用技术检测每孔中的抗体，筛选既能产生N蛋白胞外段抗体，又能大量增殖的单克隆杂交瘤细胞株，经体外扩大培养，收集，提取单克隆抗体。（5）利用N蛋白胞外段抗体与药物结合，形成，实现特异性治疗。

10．[2019·全国卷Ⅲ]培养胡萝卜根组织可获得试管苗，获得试管苗的过程如图所示。回答下列问题。（1）利用胡萝卜根段进行组织培养可以形成试管苗。用分化的植物细胞可以培养成完整的植株，这是因为植物细胞具有_______

_________________________________________________________________。（2）步骤③切取的组织块中要带有形成层，原因是___________________

_____________________________________________________。（3）从步骤⑤到步骤⑥需要更换新的培养基，其原因是_____________________________________________________________

___________________________________________________________________________________。在新的培养基上愈伤组织通过细胞的过程，最终可形成试管苗。（4）步骤⑥要进行照光培养，其作用是____

____________________________________________________________________________________________________________________________________________。（5）

经组织培养得到的植株，一般可保持原品种的，这种繁殖方式属于繁殖。11．[2020·全国卷Ⅰ，38]为研制抗病毒A的单克隆抗体，某同学以小鼠甲为实验材料设计了以下实验流程。回答下列问题：（1）上述实验前必须给小鼠甲注射病毒A，该处理的目的是__

______________________________________________________________________。（2）写出以小鼠甲的脾脏为材料制备单细胞悬液的主要实验步骤：__

_________________________________________________________________________________________________________________________________

_____________。（3）为了得到能产生抗病毒A的单克隆抗体的杂交瘤细胞，需要进行筛选。图中筛选1所采用的培养基属于，使用该培养基进行细胞培养的结果是。图中筛选2含多次筛选，筛选所依据的基本原理是。（4）若要使能产生抗病毒A的单克隆抗体

的杂交瘤细胞大量增殖，可采用的方法有（答出2点即可）。12．[全国卷Ⅲ]2018年《细胞》期刊报道，中国科学家率先成功地应用体细胞对非人灵长类动物进行克隆，获得两只克隆猴——“中中”和“华华”。回答下列

问题：（1）“中中”和“华华”的获得涉及核移植过程，核移植是指。通过核移植方法获得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目（填“减半”“加倍”或“不变”）。（2）哺乳动物的核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植获得克隆动物的难度（填“大于”或“小于”）

体细胞核移植，其原因是。（3）在哺乳动物核移植的过程中，若分别以雌性个体和雄性个体的体细胞作为核供体，通常，所得到的两个克隆动物体细胞的常染色体数目（填“相同”或“不相同”），性染色体组合（填“相同”或“不同”）。13．[2021·湖南卷]M基因编码的M蛋白在动物

A的肝细胞中特异性表达。现设计实验，将外源DNA片段F插入M基因的特定位置，再通过核移植、胚胎培养和胚胎移植等技术获得M基因失活的转基因克隆动物A，流程如下图所示。回答下列问题：（1）在构建含有片段F的重组质粒过程中，切割质粒DNA的工具酶是，这类酶能将特定部位的两个核

苷酸之间的断开。（2）在无菌、无毒等适宜环境中进行动物A成纤维细胞的原代和传代培养时，需要定期更换培养液，目的是___________________________________________________________________________________________

_____________________________________________________。（3）与胚胎细胞核移植技术相比，体细胞核移植技术的成功率更低，原因是__________________________

______________________________________________________________________________________________________________________。从早期胚

胎中分离获得的胚胎干细胞，在形态上表现为（答出两点即可），功能上具有。（4）鉴定转基因动物：以免疫小鼠的淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，筛选融合杂种细胞，制备M蛋白的单克隆抗体。简要写出利用此抗体确定克隆动物A中M基因是否失活的实验思路__________________________

____________________________________________________________________________________________________________________________________________

__________________________________________________。