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考点35微生物的培养与应用第一关辨析判别夯基固本1．判断关于微生物培养技术相关叙述的正误(1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质。()(2)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上。()(3)

消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害。()(4)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落。()(5)用稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时，只要稀释度足够高时，就能在培养基表面形成单个菌落。()2．判断关于微生物分离相关叙述的正误(

1)选择培养基可以鉴定某种微生物的种类。()(2)对细菌进行计数只能采用稀释涂布平板法，而不能用平板划线法。()(3)筛选能分解尿素的细菌所利用的培养基中，尿素是唯一的氮源。()(4)分解尿素的细菌在分解尿素时

，可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低。()(5)刚果红可以与纤维素形成透明复合物，所以可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。()第二关大题精做规范准练题组一模拟题1．[2023·陕西西安一模]回答下列关于微生物培养与纯化的问题：(1)微生物培养利用的培养基的类型很多，但培养基中一般

都含有水、无机盐、氮源、碳源、________。对微生物进行培养时，需对培养基、试管、培养皿等进行________处理。纯化菌种时常用的接种方法有____________________________________

____________________________________________________________________________________________________________。(2)某兴趣小组欲从土壤中分离分解尿素的细菌，可以将样

液接种到以________为唯一氮源的培养基上以筛选目的菌株，从功能上划分，该培养基属于________培养基。(3)有同学通过制备牛肉膏蛋白胨固体培养基来培养附着在校服表面的细菌。制备该培养基的操作步骤是计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。倒平板时需要在酒精灯火焰旁操作，待平板冷却凝固后，还

需要将平板________。(4)在平板上进行划线时，第二次及其后的划线都要从上一次划线的末端开始，其目的是_______________________________________________________

_________________。(5)将1mL样液稀释100倍，在5个平板上分别涂布接入0.1mL稀释液；经适当培养后，5个平板上的菌落数分别为5、51、50、50、49，据此可得出每升水样中的活菌数约为_

_______个。2．[2023·甘肃武威第六中学模拟]随着新冠疫情的持续，人类消耗了大量的一次性口罩，这些口罩不及时处理会对环境造成一定的污染。某科研人员欲筛选出能高效降解一次性口罩(主要成分是由C、H两种元素组成的聚丙烯纤维)的细菌，设计

了如图所示的流程。回答下列问题：(1)土壤是微生物的天然培养基，该培养基能为微生物的生长提供的四大营养物质分别是碳源、________。(2)通过相关实验选择较合适的土壤样品时，该实验的自变量是____

____，选择最合适土壤样品的指标是________________________________________________________________________。(3)图中“甲”指的是________________，使用的是________(填“固体”或“液

体”)培养基，目的是提高聚丙烯纤维降解菌的比例和密度。(4)分离纯化聚丙烯纤维降解菌时，为了使培养皿上出现的菌落尽可能都是单菌落，应采用的接种方法是_________________________________________________

_______________________。(5)将分离纯化得到的不同菌种分别接种到鉴别培养基上，鉴别培养基以________为唯一碳源，并加入了能与之结合的显色染色剂。设不同菌种的菌落面积为s，菌落周围透明圈的面积为S，那么，选择S/s的比值_

_______________的菌落，就是能高效降解一次性口罩的目的菌群。3．[2023·四川攀枝花一模]日前微博传言手机细菌比马桶多。央视和北京卫视通过实验展示的调查结果如图。回答下列相关问题：(1)为检测上述菌液中是否含有大

肠杆菌，将菌液适当稀释后，取样涂布在含有______的平板培养基上，观察是否出现________色的菌落。(2)两电视台均采用了相同的接种方法，通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数，其原理是________________；按图示取样，

将所得菌悬液进行梯度稀释后，分别取0.1mL稀释倍数为103的样品液接种到三个培养基上，培养一段时间后，统计菌落数分别为62、64、66，则该手机屏幕的细菌数为________个/平方厘米；该接种方法需要________(多选)。A．接种

环B．酒精灯C．移液管D．涂布器E．无菌水(3)两电视台取样操作的要求是________________________________________________________________________________________________________

________________________________________(答出两点即可)；两电视台实验操作均正确且完全一致，但实验结果截然不同，你认为原因是______________________________________________________

__________________________________________________________________________________________。4．[2023·黑龙江佳木斯一中三模]垃圾分类是垃圾终端处理设施运转

的基础，实施生活垃圾分类，可以有效改善城乡环境，促进资源回收利用。厨余垃圾富含淀粉、蛋白质、脂肪等，利用微生物发酵处理不仅可以减少环境污染，还可以生产大量的微生物菌体蛋白(可做饲料)，实现厨余垃圾的无害化和资源化利用。(1)厨余垃圾废液中的

微溶性物质，可以被微生物在体外分解，原因是微生物能合成并分泌________。(2)研究发现圆褐固氮菌和巨大芽孢杆菌处理厨余垃圾废液效果很好。为研究这两种菌种处理某餐厨垃圾废液的最佳接种量比，研究者将两种菌液进行不同配比，分别接种

于等量相同餐厨垃圾废液中。培养3天后测定活菌数，取一定量菌液进行______，然后分别取0.1mL的菌液采用________接种于完全培养基中培养，并选取菌落数在________范围内的平板计数。实验结果如下图所示。由实验结果可知两菌种接种量比例为________时，废液中两

种菌种的有效活菌数能够实现同步最大化。(3)用此方法统计的数值往往比显微镜直接计数法统计的数目少，原因是_______________________________________________________

_________________________________________________________________________________________。(4)本实验的研究者还需进一步检测________，以确定两种菌种接种量

对该餐厨垃圾废液中微溶性物质的降解效果。5．[2023·金太阳大联考]褐煤碳化程度低、易挥发、易自燃，易污染环境，不利于储存和远距离运输。利用微生物处理对褐煤进行气、液转化降解，形成清洁、经济有效的能源物质，对保护环境及油气安全供应有着重要意义。回答

下列相关问题：(1)为了筛选到能高效降解褐煤的细菌，应选择的采集样本的场所为__________；筛选时采用的培养基应该以________为唯一碳源，可用________________法接种。(2)研究者利用营养肉汁琼脂培养基(如下)进行实验，拟从4种备选细

菌中筛选出对某地褐煤降解效率高的菌种。蛋白胨氯化钠牛肉浸取物琼脂蒸馏水5.0g5.0g3.0g15.0g1.0LpH值调至7①营养肉汁琼脂培养基中，蛋白胨的作用是________________________，琼脂的

作用是________________________________________________________________________。②完成筛选的实验思路：在适宜条件下分别培养等量的4种备选细菌，分别加入________________，一段时间后_________

_____________________________________________________________________________________。6．[2023·湘豫名校联考]某研究人员筛选到

能高效降解尿素的细菌，培养基成分如下表所示。请回答下列问题：KH2PO4Na2HPO4MgSO4·7H2O葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g10g1g15g(1)依据培养基的功能，该培养基属于____________，加入的琼脂的功能是___

_______。(2)降解尿素的细菌中含有________酶，该酶能催化尿素分解形成________________。(3)土壤中的巴氏芽孢杆菌能高效降解尿素。为了从土样中筛选出巴氏芽孢杆菌，需将土样置于选择培养液中培养24

h，目的是________________。此研究过程中的摇床转速为200r/min，推测培养巴氏芽孢杆菌过程中需要使用摇床的原因：__________________________________________________

______________________________________________________________________________________________。(4)某湖水中含有巴氏芽孢杆菌。请写出准确测定湖水中巴氏芽孢杆菌数量的实验思

路：________________________________________________________________。题组二高考题7．[2022·全国甲卷]某同学从被石油污染的土壤中分离得到A和B两株可以降解石油的细菌，在

此基础上采用平板培养法比较二者降解石油的能力，并分析两个菌株的其他生理功能。实验所用的培养基成分如下。培养基Ⅰ：K2HPO4，MgSO4，NH4NO3，石油。培养基Ⅱ：K2HPO4，MgSO4，石油。操作步骤：①将A、B菌株分别

接种在两瓶液体培养基Ⅰ中培养，得到A、B菌液；②液体培养基Ⅰ、Ⅱ中添加琼脂，分别制成平板Ⅰ、Ⅱ，并按图中所示在平板上打甲、乙两孔。回答下列问题：(1)实验所用培养基中作为碳源的成分是____________。培养基中NH4

NO3的作用是为菌株的生长提供氮源，氮源在菌体内可以参与合成______________________(答出2种即可)等生物大分子。(2)步骤①中，在资源和空间不受限制的阶段，若最初接种N0个A细菌，繁殖n代后细菌的数量是________。(3)为了比较A、B降解石油的能力，某同学利用步骤②

所得到的平板Ⅰ、Ⅱ进行实验，结果如表所示(“＋”表示有透明圈，“＋”越多表示透明圈越大，“－”表示无透明圈)，推测该同学的实验思路是_________________________________________

_______________________________________________________________________________________________________。(4)现有一贫氮且被石油污染的土壤，根据上表所示实验结果，治理

石油污染应选用的菌株是________，理由是__________________________________________________________________________________________________________________________

______________________。8．[2022·全国乙卷]化合物S被广泛应用于医药、食品和化工工业。用菌株C可生产S，S的产量与菌株C培养所利用的碳源关系密切。为此，某小组通过实验比较不同碳源对菌体

生长和S产量的影响，结果见表。碳源细胞干重(g/L)S产量(g/L)葡萄糖3.120.15淀粉0.010.00制糖废液2.300.18回答下列问题。(1)通常在实验室培养微生物时，需要对所用的玻璃器皿进行灭菌，灭菌的方法有______________________(答出2点即可)。(2)由实验

结果可知，菌株C生长的最适碳源是________________；用菌株C生产S的最适碳源是________________。菌株C的生长除需要碳源外，还需要________________(答出2点即可)等营养物质。(3)由实验结果可知，碳源

为淀粉时菌株C不能生长，其原因是____________________。(4)若以制糖废液作为碳源，为进一步确定生产S的最适碳源浓度，某同学进行了相关实验。请简要写出实验思路：______________________

__________________________________________________________________________________________________________________________。(5)利用制糖废液

生产S可以实现废物利用，其意义是____________________________(答出1点即可)。9．[2022·广东卷]研究深海独特的生态环境对于开发海洋资源具有重要意义。近期在“科学号”考察船对中国南海科考中，中

国科学家采集了某海域1146米深海冷泉附近沉积物样品，分离、鉴定得到新的微生物菌株并进一步研究了其生物学特性。回答下列问题：(1)研究者先制备富集培养基，然后采用____________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培养

一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物，为了获得纯种培养物，除了稀释涂布平板法，还可采用____________法。据图分析，拟杆菌新菌株在以____________为碳源时生长状况最好。(2)研究发现，将采集的样品置于各种培养基中培养，仍有很多微生物不能被分离筛选出来，

推测其原因可能是______________________________________________________________________________________________________

__________________________________________。(答一点即可)(3)藻类细胞解体后的难降解多糖物质，通常会聚集形成碎屑沉降到深海底部。从生态系统组成成分的角度考虑，拟杆菌对深海生态系统碳循环的作用可能是_____________________

___________________________________________________________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。(4)深海冷泉环境特殊，推测此环境下生存的拟杆菌所分泌的各种多糖降解酶，除具有酶

的一般共性外，其特性可能还有________。10．[2021·湖南卷]大熊猫是我国特有的珍稀野生动物，每只成年大熊猫每日进食竹子量可达12～38kg。大熊猫可利用竹子中8%的纤维素和27%的半纤维素。研究人员从大熊猫粪便和土壤中筛选纤维素分解菌。回答下列问

题：(1)纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即________。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以________为唯一碳源的固体培养基上进行培养，该培养基从功能上分类属于________培养基。(

2)配制的培养基必须进行________灭菌处理，目的是________。检测固体培养基灭菌效果的常用方法是________。(3)简要写出测定大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数的实验思路____________________________________________________

____________________________________________________________________________________________。(4)为高效降解农业秸秆废弃物，研究人员利用从土壤中筛选获得的3株纤维素分解菌，

在37℃条件下进行玉米秸秆降解实验，结果如表所示。在该条件下纤维素酶活力最高的是菌株________，理由是________________________。菌株秸秆总重(g)秸秆残重(g)秸秆失重(%)

纤维素降解率(%)A2.001.5124.5016.14B2.001.5323.5014.92C2.001.4229.0023.3211.[全国卷Ⅰ]将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。回答下列问题：(

1)M培养基若用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制______________的生长，加入了链霉素的培养基属于______________培养基。(2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有____________(答出两点即可)。

氮源进入细胞后，可参与合成的生物大分子有____________(答出两点即可)。(3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂筛选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是______________，该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是____

_____________________________________________________________________________________________________________________

_______________________。(4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133；乙同学涂布了3个平板，统计的菌

落数分别是27、169和176，取平均值124。有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是________________________________________________________________________。12．[全国卷Ⅱ]在生产、生活和科

研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。回答下列问题：(1)在实验室中，玻璃和金属材质的实验器具________(填“可以”或“不可以”)放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法，与煮沸消毒法相比，这两种方法的优点是_________________

_______。(3)密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒，其原因是紫外线能________。在照射前，适量喷洒________，可强化消毒效果。(4)水厂供应的自来水通常是经过________(填“氯气”“乙醇”或“高锰酸钾”)消毒的。(5)某同学

在使用高压蒸汽灭菌锅时，若压力达到设定要求，而锅内并没有达到相应温度，最可能的原因是______________________________________________________________________________________

__________________________________________________________。