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姓名班级考号密○封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题全书综合测评全卷满分100分考试用时75分钟一、选择题(本题共15小题,每小题2分,共30分。每小题只有一个选项符合题目要求。)1.我们的祖先通过自然发酵等方法生产各种
发酵产品,丰富了中华民族特有的饮食文化。下列关于传统发酵技术应用的叙述,正确的是()A.酿制葡萄酒时对葡萄的处理是先清洗葡萄再去除枝梗B.变酸的酒表面有白膜出现,是醋酸菌有丝分裂形成的C.腐乳制作过程利用的是毛霉产生的淀粉酶和脂肪酶D.制作果醋、泡菜、果酒的过程中发酵液pH不变2.鞣质(单
宁)是一种具有止血、杀菌等作用的中药成分,在植物中广泛分布。为探究鞣质对自然界中生存条件相同的甲、乙、丙三种细菌的杀伤能力,某科研小组将等量的甲、乙、丙三种细菌接种到含有适量鞣质的完全培养基和不含鞣质的完全培养基上,在相同且适宜的条件下培养一段时间,观察菌落大小,结果
如图所示。下列相关说法不正确的是()A.实验中用的培养皿等玻璃器材的灭菌,可以采用干热灭菌的方法B.由图中结果可知,鞣质对甲细菌的杀伤能力最强C.为排除杂菌污染,本实验设置的实验组和对照组比较合理D.接种前,可以用显微镜直接计数法判断三种细菌接种量是
否相等3.秸秆(富含纤维素)燃烧会对环境造成污染,工业上利用微生物发酵技术将秸秆中的纤维素进行加工来生产酒精,其工艺流程如图所示。下列说法错误的是()A.工业上一般采用单一菌种进行发酵B.微生物A可能是纤维素分解菌C.乙醇在微生物B的线粒体基质中生成D.
微生物A、B利用的碳源可能不一样4.我国科研人员构建了一株嗜盐单胞菌H,并以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液,含较多蔗糖)或餐厨垃圾等为原料,在实验室生产PHA等新型高附加值可降解材料,工艺流程如图。下列分析不合理的是()A.搅拌器能使菌株H与培养液充分接触,提高原料利用率B.嗜盐单胞菌H的选育和扩
大培养是该发酵工程的中心环节C.发酵罐内应严格控制温度、pH等条件,可采用提取、分离、纯化措施获得PHA产品D.以蔗糖为唯一碳源并不断增大其浓度,可获得对蔗糖耐受能力和利用效率较高的菌株H5.我国南部边疆的守
卫者,饱受蚊虫叮咬。科学家将天竺葵和香茅草的原生质体诱导融合,利用如图技术培育出含有香茅醛的驱蚊草。有关说法正确的是()A.过程Ⅱ常用的诱导方法有电融合法、灭活病毒诱导法等B.图中两细胞融合完成的标志是两个原生质体核的融合C.植物体细胞杂交技术克服了不同物
种间杂交不亲和的障碍D.若诱导组织生芽,则f培养基中生长素含量应高于细胞分裂素6.胚胎工程的许多技术,实际上是在体外条件下,对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。因此,了解哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律十分重要。下列相关叙述错误的是()A.在自然条件下,哺乳动物的受精过程在
子宫中完成B.精子入卵后,卵细胞膜会立即发生生理反应,阻止其他精子入卵C.胚胎发育早期,细胞的数量不断增加,但胚胎的总体积并不增加D.囊胚期会出现透明带破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程叫作孵化密○封○装○订○线密
○封○装○订○线密封线内不要答题7.下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程。据图分析相关叙述错误的是()A.选用胰蛋白酶处理肌肉组织,不能选用胃蛋白酶B.生物反应器中充入一定比例CO2的主要作用是维持培养液的pHC.培养液中的支架提供了更多的细胞吸附
面积,有利于细胞贴壁生长D.“人造牛肉”的培养体现了细胞的全能性8.2017年,医学研究者首次使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”(培育过程如图)。下列相关叙述正确的是()A.该婴儿的遗传物质来自提供细胞核的母亲和提供精子的父亲B.从体内采集的精子可直接与重组细胞
进行受精C.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代D.图中捐献者的卵母细胞需在体外培养至MⅠ期再去核9.抗PD-L1单克隆抗体能与肿瘤细胞膜表面的PD-L1特异性结合,因而具有治疗某些癌症的作用。如图表示制备抗PD-L1单克隆抗体的部分流程。下
列叙述不正确的是()A.分离B淋巴细胞前,需要对小鼠注射PD-L1抗原B.经PEG诱导后融合的细胞即杂交瘤细胞C.图中细胞群a~d既能大量增殖,又能产生抗体D.图中细胞群a可用于大规模培养,生产抗PD-L1单克隆抗体1
0.实验小组进行“DNA的粗提取与鉴定”实验,如下为实验流程。下列相关叙述正确的是()①取材→②破碎细胞→③获得滤液→④去除杂质→⑤进一步提纯→⑥DNA鉴定A.取材时可选用猪血、洋葱、香蕉、菜花等富含D
NA的材料进行实验B.进行④时,对③所得滤液中加2mol/L的NaCl溶液,会析出白色丝状物DNAC.④可以通过离心后弃上清液,将离心管底沉淀物晾干获得粗提取的DNAD.DNA鉴定时可通过是否加入二苯胺
试剂设置对照实验来观察实验现象11.《诗经》中有“投我以木瓜,报之以琼琚”的诗句。番木瓜易感染番木瓜环斑病毒(PRSV)而获病。我国华南农业大学的科研人员利用农杆菌转化法,成功培育出转基因番木瓜“华农一号”,大致流程如图所示。下列分析错误的是()A.过程①称为逆转录,此
过程中用到的酶有逆转录酶等B.过程②用限制酶BamHⅠ在Ti质粒切开一个切口暴露出两个游离的磷酸基团C.过程③将重组质粒转入农杆菌之前,需先用Ca2+载体处理农杆菌D.过程⑤产生的番木瓜植株即使有抗PRSV基因也不一定具有抗PRSV的性状12.亨廷顿舞蹈病是一种由控制合成
享廷顿蛋白(HTT)的基因突变所导致的疾病。我国科学家利用基因编辑技术(CRISPR/Cas9),成功培育出世界首例亨廷顿舞蹈病的基因“敲入”猪模型,操作过程如图所示。下列说法不正确的是()姓名班级考号密○
封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题A.上述操作过程的原理有基因重组、动物细胞核全能性等B.过程②为动物细胞融合技术,通常采用灭活病毒诱导C.过程④为胚胎分割,该技术的关键是将内细胞团均等分割D.基因“敲入”猪模型所携带的人突变HTT基因片段可遗传给后代1
3.如图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图(其中AmpR为氨苄青霉素抗性基因)。下列叙述正确的是()A.质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞和促进目的基因的表达B.选用限制酶PstⅠ、AluⅠ对含目的基因的DNA和质粒进行剪切C.过程②可用农杆菌转化
法将含目的基因的表达载体导入受体细胞D.④过程中可利用含氨苄青霉素的培养基对植株进行筛选14.新型冠状病毒是一种单链RNA病毒,其通过表面刺突蛋白(S蛋白)的受体结合域(RBD)与人体细胞表面的ACE2受体相互作用而感染人体细胞
。科学家设计了一种自然界中不存在的蛋白质LCB1,可与S蛋白的RBD紧密结合,以干扰新型冠状病毒的感染。下列有关说法正确的是()A.为了得到LCB1,需要用PCR技术对基因文库中获取的LCB1基因进行扩增B.可以
通过蛋白质工程直接改造现有蛋白质的空间结构获得LCB1C.可通过设计特定引物进而通过PCR得到改造后的基因D.新型冠状病毒S蛋白与人体细胞ACE2的结合体现了细胞间的信息交流15.转基因抗虫棉在我国的种植面积已占全国棉花种植面积的90%。研究者利用PCR技术检测杂草中有无转基因成分
,得到如图所示结果。相关分析错误的是()A.空白实验是未加入DNA模板得到的电泳结果B.推测棉田杂草6、7与抗虫棉的亲缘关系较近C.结果说明校园杂草与棉花间一定存在生殖隔离D.转基因成分进入杂草体内可能会引发生态
问题二、选择题(本题共5小题,每小题3分,共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求,全部选对得3分,选对但不全的得1分,有选错的得0分。)16.科研人员研究发现,微藻能合成很多独特地对人体非常有益的生物活性物质,如EPA和DHA等不饱和脂肪酸。科研人员将
自养的绿色巴夫藻和既可自养又能异养的四鞭藻进行融合,经筛选获得融合藻株。在自养培养条件下,测定它们的生长速率和EPA、DHA产率,结果如表所示。下列有关说法正确的是()藻体生长速率[g/(L·d)]EPA(%)DHA(%)绿色巴夫藻0.0580.2120.073四鞭藻0.1400.0580.00
0融合藻0.2410.0670.054A.融合藻具有生长迅速又能合成EPA和DHA的优点B.诱导融合前用纤维素酶等处理两种藻以获得原生质体C.细胞诱导融合完成后培养体系中应有3种类型的细胞D.获得的融合藻还需进行克隆化培养和EPA、DH
A检测17.野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长,赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。如图为以野生型菌株为材料,诱变纯化赖氨酸营养密○封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题缺陷型突变株的部分流程图,数字代表培养基,a
、b、c表示操作步骤。下列有关说法中不正确的是()A.野生型大肠杆菌能够合成所需的全部氨基酸,因此培养基中无需提供氮源B.①②④培养基中需添加赖氨酸,而③培养基中不能添加赖氨酸C.步骤b采用的接种方法是稀释涂布平板法D.从④培养基中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需突
变株18.阿霉素是一种抗肿瘤抗生素,可抑制RNA和DNA的合成。阿霉素没有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对机体其他细胞造成伤害。科研人员将阿霉素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合制成抗体—药物偶
联物(ADC),ADC通常由抗体、接头和药物三部分组成,作用机制如图所示。下列有关叙述正确的是()A.阿霉素对肿瘤细胞和已经分化的组织细胞都有杀伤作用B.将肿瘤抗原反复注射到小鼠体内,从小鼠的血清中分离出的抗体为单克隆抗体C.含ADC的囊泡与溶酶体融合后,溶酶体裂解释放药物,最终细胞凋亡D
.ADC与肿瘤细胞识别后,被肿瘤细胞以主动运输的方式吸收进入细胞19.载体是基因工程中携带外源DNA片段(目的基因)进入受体细胞的重要运载工具,常见的载体类型主要有基因克隆载体和基因表达载体。如图是利用细菌生产人胰岛素的基本流程
示意图,下列相关叙述正确的是()A.重组载体A、重组载体B分别是基因克隆载体和基因表达载体B.载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点、复制原点和标记基因C.必须把目的基因插入重组载体A的启动子和终止子之间D.培养细菌
A和细菌B的培养基在营养成分和功能上没有明显差异20.人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓,但给心梗患者注射大剂量基因工程t-PA蛋白会诱发颅内出血。研究证实,将t-PA蛋白第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降
低其出血副作用。对天然t-PA基因进行改造,并使其在大肠杆菌细胞内表达,可制造出改良t-PA蛋白。如图表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒,新霉素为抗生素。有关叙述正确的是()A.制造出性能优异的改良t-PA蛋白的过程属于蛋白质工程B.用XmaⅠ和BglⅡ切开pCLY11,才能使其
与t-PA改良基因高效连接C.选择有新霉素抗性的大肠杆菌作为受体细胞进行重组质粒的筛选D.区分重组质粒和原有质粒可以观察LacZ基因的表达情况姓名班级考号密○封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题三、非选择题(本题共5小题,共55
分。)21.(9分)图1所示装置既可用于生产果酒,又可用于生产果醋;图2为腐乳的制作流程图;图3为某兴趣小组为了制作泡菜而查阅资料得到的相关指标变化示意图。回答下列相关问题。图1图2图3(1)制备果醋时,原料可以是葡萄糖,也可以是酵母菌产生的。若用图1所示的装置制备果醋,则开关1和
开关2的控制操作是,原因是。(2)图2中豆腐发酵的过程①主要长出,经过该微生物的发酵,豆腐中的蛋白质被水解成,所以腐乳味道鲜美并易于消化和吸收。(3)据图3可知,在制作泡菜的过程中,亚硝酸盐含量的变化规律是,pH下降的主要原因是。制作泡菜时,需要经常向泡菜
坛的水槽中补充水,目的是。22.(10分)牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物,其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌,设计了如下实验。请分析并回答下列问题。实验步骤:Ⅰ.取样:从刚宰杀的
牛的瘤胃中取样,将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。Ⅱ.培养基的配制和灭菌①配制全营养LB固体培养基,配方:水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂(一种凝固剂)。②配制尿素固体培养基,配方:水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂。Ⅲ.制备瘤胃稀释液并接
种,如图1所示。Ⅳ.在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。(1)全营养LB固体培养基和尿素固体培养基都含有微生物生长所需的基本营养物质:。(2)该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。在无菌条件下,利用稀释涂布平板法进行分
离,需要用到图2中的实验器材有。(3)为检测该培养基灭菌是否彻底,应采用的检测方法是。为了判断尿素培养基是否具有选择作用,实验时还需要同时接种全营养平板,如果同一浓度梯度下,尿素培养基上的菌落数(填“大于”“等于”或
“小于”)全营养培养基上的菌落数,则说明尿素培养基具有选择作用。密○封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题(4)为了避免混淆,本实验中使用的平板需要在培养皿的(填“皿盖”或“皿底”)做好标记。然后在30~37℃的恒温培养箱中培养1~2d,每隔24h统计一次菌落数目,
选择菌落数目稳定时的记录作为结果,其目的是。(5)若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养,培养后平板上出现的菌落数如图1所示,则10mL瘤胃样品中约含有目标活菌个。该方法统计获得的菌落数往往比实际的活菌数,原因是。23.(11分)紫花苜蓿是全世界栽培历史最悠久、利用
最广泛的豆科牧草,但易造成家畜臌胀病。百脉根富含单宁,单宁可与植物蛋白质结合,不引起家畜采食后臌胀。为培育抗臌胀病的苜蓿新品种,科研人员利用野生型清水紫花苜蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究。研究主要流程如图1(注:
IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段,R-6G可阻止线粒体的呼吸作用,二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同)。图1(1)培育抗臌胀病的苜蓿新品种依据的生物学原理有。(2)在实验前需通过预实验来研究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度,实验的设计思路是:将获取的原
生质体分别放置在不同浓度的溶液中,培养一段时间后,观察原生质体再生情况。(3)步骤②到步骤③需要更换新的培养基,其原因是经过过程诱导形成愈伤组织和诱导愈伤组织再分化形成试管苗所需的(激素名称)比例和营养条件不同。(4)植物原生质体融合过程常利用化学试剂诱导
,在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记苜蓿和里奥百脉根的原生质体膜上的蛋白质,根据细胞膜表面荧光颜色不同可观察到种不同的原生质体(只考虑细胞两两融合的情况)。若利用此技术获得单宁,培养到阶段即可。(5)若苜蓿细胞内有m条染色体,里
奥百脉根细胞内有n条染色体,则“苜蓿—里奥百脉根”细胞在有丝分裂后期含条染色体。若杂种细胞培育成的“苜蓿—里奥百脉根”植株为四倍体,则此杂种植株的花粉经离体培养得到的植株属于植株。(6)为了提高原生质体的产量,保证实验的成功率,还需考虑酶液的渗透压、酶解时间等因素
。分别检测上述两个因素对原生质体产量的影响,结果如图2、图3。甘露醇能维持稳定的渗透压,由图2可知,酶解时宜选用的甘露醇浓度为。由图3可知,最适宜的酶解时间为。24.(13分)人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同
的亚基组成,即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体,科研人员完成了以下过程。请回答相关问题:(1)动物细胞培养时,培养基除了添加葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等必要的营养
成分外,往往还需加入一定量的,以满足动物细胞培养的营养需要。动物细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的主要作用是。为了防止细胞姓名班级考号密○封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的。为了防止有害代谢物的积累,可采用的方法,以
便清除代谢物。(2)每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次,共注射3次,其目的是。最后一次免疫后第3天,取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合,常用的与植物原生质体融合方法不同的诱导方法是。为了获得所需的杂交瘤细胞,应将甲放在培养基上进行培养。②过程表示将乙细胞接种到多孔培养板上,进
行检测,之后稀释、培养、再检测,并多次重复上述操作,其目的是筛选获得抗cTnI抗体产量大、纯度高的杂交瘤细胞丙。通过该技术获得的单抗特点是。(3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法,具体原理如图所示
:①据图分析,固相抗体和酶标抗体均能与同一抗原结合,这是由于不同抗体能与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中,酶标抗体的作用是。②研究人员获得三种抗cTnI单克隆抗体,分别记为A、B、C,为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法,科研人员需要进行(填“3”“6”
或“9”)组实验,检测并比较各组实验的产物量。25.(12分)人的血清白蛋白(HSA)在临床上需求量很大,通常从人血中提取。但艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。图一是以基因工程技术获取HSA的两条途径,其中报告基因表达的产物能催化无色物质K呈现蓝
色。图二为HSA基因两侧的核苷酸序列。图三为相关限制酶的识别序列和切割位点。据图回答下列问题:(1)基因工程的核心步骤是,完成过程②所需要的技术手段是。(2)采用PCR技术扩增HSA基因,根据其两端序列,则需要设计的引物序列是:、。(3)依据图一、图二和图三分析,成功建构的重组
质粒用酶C处理将得到个DNA片段。(4)图一过程①中需将植物细胞与混合后共同培养,旨在让整合到植物细胞染色体DNA上,除尽农杆菌后,还需转接到含的培养基上筛选出转化的植物细胞。(5)过程④前对卵母细胞供体母牛进行处理。通常将受精卵培养至阶段进行移植。过程⑤中鉴定胚胎性
别时常取细胞做DNA分析。(6)为检测HSA基因的表达情况,可提取受体细胞的,用抗血清白蛋白的抗体进行杂交实验。密○封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题答案全解全析1.A2.C3.C4.B5.C6.A7.D8.C9
.B10.C11.C12.B13.C14.C15.C16.ABD17.AD18.AC19.AB20.ABD1.A榨汁前对葡萄的处理是先清洗葡萄再去除枝梗,这样能够防止去除枝梗时露出的果肉不被杂菌污染,A正确;变
酸的酒表面出现的白膜是醋酸菌产生的,但醋酸菌是原核生物,不进行有丝分裂,B错误;腐乳制作主要是利用毛霉等微生物产生的蛋白酶和脂肪酶将豆腐中的蛋白质和脂肪分解为小分子物质,C错误;制作果醋、泡菜、果酒的过程中发酵液pH会有所下降,D错误。2.C培养皿等玻
璃器材可以采用干热灭菌法进行灭菌,A正确;相比对照组1,含鞣质的完全培养基中,甲细菌的菌落变小最明显,故鞣质对甲细菌的杀伤能力最强,B正确;为排除杂菌污染,本实验还需设置未接种细菌的含鞣质的完全培养基作为空白对照,C错误;显微镜直接计数法是一种常用的、快速直观的测定微生物数量
的方法,故接种前,可以用显微镜直接计数法判断三种细菌接种量是否相等,D正确。3.C过程②常用的微生物是酵母菌,乙醇在其细胞质基质中生成,C错误。4.B搅拌器能使菌株H与培养液充分接触,提高原料利用率,A正确;发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵,B错误;发酵罐内应严格控制温度、pH等条件,如果发酵
产品是代谢物,可根据产物的性质采取适当的提取、分离和纯化措施来获得产品,故可采用提取、分离、纯化措施获得PHA产品,C正确;人为提供有利于目的菌生长的条件(包括营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他
微生物的生长,可以选择人们需要的微生物,以蔗糖为唯一碳源并不断增大其浓度,可获得对蔗糖耐受能力和利用效率较高的菌株H,D正确。5.C过程Ⅱ是诱导植物原生质体融合,不能用灭活病毒诱导,A错误。图中两细胞融合完成的标志是再生出
细胞壁,B错误。若诱导组织生芽,则f培养基中生长素含量应低于细胞分裂素;若诱导组织生根,则f培养基中生长素含量应高于细胞分裂素,D错误。6.A在自然条件下,哺乳动物的受精过程在输卵管中完成,A错误。防止多精入卵的两道屏障:①精子触及卵细胞膜的瞬间,卵细胞
膜外的透明带迅速发生生理反应,阻止后来的精子进入透明带;②精子入卵后,卵细胞膜立即发生生理反应,拒绝其他精子再进入,B正确。胚胎发育早期,细胞的数量不断增加,但胚胎的总体积并不增加,C正确。囊胚期,囊胚的扩大会导致透明带破裂,胚胎从其中伸展出来,这一过程叫作孵化
,D正确。7.D胃蛋白酶的最适pH为1.5,而多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4,胃蛋白酶在此环境下没有活性,所以不能用胃蛋白酶处理肌肉组织,A正确;“人造牛肉”的培养不能体现细胞的全能性,D错误。8.C图中“三亲婴儿”是经过核移植和体外受精产生的,其细胞核基因一半来自母
亲,一半来自父亲,细胞质基因来自卵母细胞捐献者,因此“三亲婴儿”体内拥有三个亲本的遗传物质,A错误;采集到的精子需要进行获能处理才具备受精能力,B错误;图中“三亲婴儿”的细胞质基因来自卵母细胞捐献者,因此可避免母亲携带的线粒体遗传病基因传递给后代,C正确;图中捐献者的卵母细胞需在体外培养至M
Ⅱ期再去核,D错误。9.B在分离B淋巴细胞前,需要对小鼠注射PD-L1抗原进行免疫,使小鼠产生已免疫的B淋巴细胞,A正确;经PEG诱导后融合的细胞不全为杂交瘤细胞,用特定的选择培养基筛选得到的细胞为杂交瘤细胞,B错误;图中细胞群a~d表示杂交瘤细胞,其特点是既能大量增殖,又能产生抗体,C正确;图
中加入PD-L1抗原后,细胞群a呈阳性,则细胞群a可用于大规模培养,生产抗PD-L1单克隆抗体,D正确。10.C哺乳动物(猪)成熟的红细胞中没有细胞核和众多细胞器,因此不可选用猪血来提取DNA,A错误;DNA在2mol/L的N
aCl溶液中溶解度较大,对③所得滤液中加2mol/L的NaCl溶液,不会析出白色丝状物DNA,④过程可为对③所得滤液加入体积分数为95%的冷酒精溶液,B错误;DNA不溶于酒精溶液,但细胞中的某些蛋白质溶于酒精,滤液中
加入冷酒精,静置2~3min,可获得粗提取的DNA,或将溶液倒入塑料离心管中进行离心,弃上清液,将离心管底沉淀物晾干,获得粗提取的DNA,C正确;DNA鉴定时,实验组和对照组中均加入二苯胺试剂,混合均匀后,将试管置于
沸水中加热5min,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,根据溶液是否变蓝鉴定DNA,D错误。11.C分析题图:图中①为逆转录过程,②为基因表达载体的构建过程,③④是采用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞,⑤是再分化过程。过程①是以RNA为模板合成DNA
的过程,为逆转录,需要逆转录酶,A正确;质粒为环状DNA分子,用限制酶BamHⅠ在Ti质粒切开一个切口将暴露出两个游离的磷酸基团,B正确;过程③将重组质粒转入农杆菌之前,需先用Ca2+(不是Ca2+载体)处理农杆菌,使其处于一种能吸收周围环境中DNA分
子的生理状态,Ca2+载体可用来激活重构胚,C错误;由于导入的目的基因不一定表达,因此过程⑤产生的番木瓜植株即使有抗PRSV基因也不一定具有抗PRSV的性状,D正确。姓名班级考号密○封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题12.B题图所示过程涉及基因工程和动物
细胞核移植技术等,因此涉及的生物学原理有基因重组和动物细胞核全能性等,A正确;分析题图可知,过程①为显微操作取出成纤维细胞的细胞核,过程②将该细胞核注入去核的卵细胞中(不是动物细胞融合),B错误;由图可知,过程④是将体外培养获得的囊胚进行胚
胎分割,该技术的关键是对内细胞团均等分割,C正确;基因“敲入”猪模型所携带的人突变HTT基因片段整合到了猪的HTT基因中,属于基因重组(可遗传变异的一种),因此可以遗传给后代,D正确。13.C质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞,但不
能促进目的基因的表达,A错误。目的基因两侧和质粒上均含有限制酶PstⅠ和SmaⅠ的切割位点,所以可同时选用限制酶PstⅠ、SmaⅠ对含目的基因的DNA和质粒进行切割,使用双酶切可保证目的基因与质粒的正确连接;限制酶AluⅠ的切割位点在目的基因内部,用其切割会破坏目的基因
,B错误。图中过程④是进行移栽,不能利用含氨苄青霉素的培养基来筛选含有目的基因的植株,应该在个体生物学水平上进行抗冻实验检测,D错误。14.CLCB1是自然界中不存在的蛋白质,只能对相关基因进行改造,不可以直接从基因文库中获取LCB1基因,A错误;获
得LCB1需要通过蛋白质工程,但蛋白质工程不直接修改蛋白质,B错误;可根据改造后基因的序列,通过设计特定引物,进而通过PCR得到改造后的基因,C正确;新型冠状病毒没有细胞结构,其表面的S蛋白与人体细胞ACE2的结合不能体现细胞间的信息交流,D错误。1
5.C空白实验是未加入DNA模板得到的电泳结果,作为空白对照,A正确;由图可知,棉田杂草6和7含有转基因成分,说明棉田杂草6和7可能与抗虫棉的亲缘关系较近,B正确;根据图中结果不能确定校园杂草与棉花间一定存
在生殖隔离,C错误;转基因成分进入杂草体内,可能导致杂草获得转基因特性,从而引发生态问题,D正确。16.ABD由表格可知,融合藻的生长速率最大,且能合成EPA和DHA,A正确;细胞诱导融合完成后培养体系中应有未融合的绿色巴夫藻细胞、四鞭藻细胞以及两个绿色巴夫藻细胞融合体、两个四鞭藻细
胞融合体、一个四鞭藻细胞和一个绿色巴夫藻细胞融合体等,C错误;获得的融合藻还需进行克隆化培养和EPA、DHA检测,以便获得符合要求的融合细胞,D正确。17.AD野生型大肠杆菌菌株虽然能合成所需的全部氨基酸,但培养基中仍需
提供氮源供大肠杆菌利用,A错误。由图中③和④的原位影印培养结果可知,步骤b采用的接种方法是稀释涂布平板法,C正确。结合图示可知,①②④培养基中添加了赖氨酸,③培养基中未添加赖氨酸,甲在③培养基中无法生长,在④培养基中可生长,说明甲是
赖氨酸营养缺陷型菌落,故从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养即可获得所需突变株,B正确,D错误。18.AC由题干可知,阿霉素没有特异性,在杀伤肿瘤细胞的同时还会对机体其他细胞造成伤害,所以阿霉素对肿瘤细胞和已经分
化的组织细胞都有杀伤作用,A正确。将肿瘤抗原反复注射到小鼠体内,从小鼠的血清中分离出的抗体类型较多,无法得到单克隆抗体;从小鼠的体内获得已免疫的B细胞,再让其与骨髓瘤细胞融合,经过选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞进行克隆化培
养和抗体检测,经多次筛选,就可获得能分泌所需抗体的细胞,B错误。ADC含单克隆抗体,为大分子物质,与肿瘤细胞识别后,被肿瘤细胞以胞吞的方式吸收进入细胞,D错误。19.AB题图中重组载体A导入受体菌后随着受体菌的繁殖而扩增,因此是基
因克隆载体;而重组载体B导入受体菌后,表达产生胰岛素,因此是基因表达载体,A正确。作为运载体必须具备的条件有:含有限制酶的切割位点(便于目的基因的插入)、复制原点(便于目的基因的扩增)及标记基因(便于筛选含有目的基因的受体细胞)等,因此载体A和载体B都必须含有限制酶切割位点
、复制原点和标记基因,B正确。培养细菌A的目的是扩增目的基因,不需要获得表达产物,因此目的基因不一定要插入重组载体A的启动子和终止子之间,C错误。培养细菌A的目的是扩增目的基因,培养细菌B的目的是获得胰岛素,因此培养两者的培养基在营养成分和功能上有明显差
异,D错误。20.ABD根据题干“对天然t-PA基因进行改造,并使其在大肠杆菌细胞内表达,可制造出改良t-PA蛋白”可知,制造出性能优异的改良t-PA蛋白的过程属于蛋白质工程,A正确;通过观察各限制酶的识别序列和切割位点可知,切割目的基因所使用的限制酶为XmaⅠ和Bgl
Ⅱ,要想把目的基因与载体pCLY11拼接起来需要得到相同的黏性末端,因此载体pCLY11也需要用XmaⅠ和BglⅡ切割,B正确;由于质粒上以新霉素抗性基因作为标记基因,所以选择不具有新霉素抗性的大肠杆菌作为受体细胞进行重组质粒的筛选
,C错误;重组质粒破坏了LacZ基因,因此重组质粒中LacZ基因不能表达,菌落呈现白色,而原有质粒LacZ基因完整,可以表达,所以菌落呈现蓝色,D正确。21.答案(除标注外,每空1分)(1)酒精(乙醇)开关1和开关2都需要打开醋酸菌属于好氧细菌,只能进行有氧呼吸,打开开关1可以向发酵瓶中充气,剩
余的气体需要通过排气口排出(2分)密○封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题(2)毛霉小分子的肽和氨基酸(3)先增加后减少,最终维持在较低的水平乳酸菌发酵过程中产生了乳酸维持泡菜坛内无氧的环境解析(1)制备果醋时,原料可以是葡萄糖,也可以是酵母菌产生的酒精(乙醇),醋酸菌可将酒精
(乙醇)变为乙醛,再将乙醛变为乙酸。醋酸菌是好氧细菌,只能进行有氧呼吸,需要通入氧气,打开开关1可以向发酵瓶中充气,剩余的气体需要通过排气口排出,因此开关1和开关2都需要打开。(2)腐乳发酵的主要微生物是毛霉,图2中豆腐发酵的过程①主要
长出毛霉。毛霉可以分泌蛋白酶,将蛋白质分解为小分子的肽和氨基酸,使腐乳味道鲜美并易于消化和吸收。(3)据图3可知,亚硝酸盐的含量先增加后减少,最终维持在较低的水平。乳酸菌发酵过程中产生了乳酸,使pH下降。泡菜发酵的主要微生物是乳酸菌,乳酸
菌是厌氧细菌,因此制作泡菜时,需要经常向泡菜坛的水槽中补充水,目的是维持泡菜坛内无氧的环境。22.答案(除标注外,每空1分)(1)碳源、氮源、水、无机盐等(2)①③④(3)将未接种的培养基(或空白培养基)放在恒温培养箱中保温1~
2天,检验是否有菌落产生小于(4)皿底防止培养时间不足导致菌落遗漏(5)7×1010(2分)少当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落解析(1)虽然各种培养基的配方不同,但是一般都含有水、碳源、
氮源和无机盐等微生物生长所需的基本营养物质。(2)稀释涂布平板法操作时需要在酒精灯火焰旁边操作,故需要用到①酒精灯、③培养皿、④涂布器。(3)将未接种的培养基(或空白培养基)放在恒温培养箱中保温1~2天,检验是否有菌落产生,可检测该培养
基灭菌是否彻底。若有菌落产生,说明灭菌不彻底,需要重新配制培养基。选择培养基允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长,故同一浓度梯度下,尿素培养基上的菌落数小于全营养培养基上的菌落数,则说明尿素培养基具有选择作用。(4)本实验使用的平板较多,为了避免混淆,
最好使用前在培养皿的皿底做好标记,由于培养基倒置培养,所以在皿底上标记组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。为了防止培养时间不足导致菌落遗漏,在30~37℃的恒温培养箱中培养1~2d,每隔24h统计一次菌落数目,选择菌落数目稳定时的记录作为结果
。一般选择菌落数为30~300的平板进行计数。(5)由图可知,5号试管中的稀释液共稀释了107倍,10mL瘤胃样品中约含有目标活菌=(68+75+67)÷3÷0.1×107×10=7×1010(个)。23.答案(每空1分)(1)细胞膜的流动
性和植物细胞的全能性(2)R-6G或IOA(3)脱分化细胞分裂素和生长素(4)聚乙二醇(PEG)(或高Ca2+—高pH)3愈伤组织(5)2(m+n)单倍体(6)0.55mol/L清水紫花苜蓿酶解10h,里奥百脉根酶解12h解析(1)由图可知,本研究主要利用植物体
细胞杂交技术,该技术最终获得了杂种植株,其原理是细胞膜的流动性和细胞全能性。(2)要研究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度,则实验的自变量是R-6G或IOA溶液的浓度,因变量是原生质体的再生情况。(3)步骤②到步骤③需要更换新的培养基,因为诱导的方向不同,前者的目的是
脱分化产生愈伤组织的过程,后者是再分化成为杂种植株的过程,经过脱分化过程诱导形成愈伤组织和诱导愈伤组织再分化形成试管苗所需的生长素和细胞分裂素的比例和营养条件不同。(4)植物原生质体融合过程,常用的化学法有高Ca2+—高pH融合法和聚乙二醇(PEG)融合
法。依题意,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记苜蓿和里奥百脉根的原生质体膜上的蛋白质,所以融合后根据细胞膜表面的荧光的不同可观察到有3种不同类型的原生质体(只考虑细胞两两融合的情况):红色荧光标记的苜蓿与苜蓿融合后的原生质体、绿色荧光标记的里奥百脉根与里奥百脉根融合后的原生质体、红色荧
光和绿色荧光共同存在的苜蓿与里奥百脉根融合后的原生质体。由于单宁是细胞代谢产物,若利用此技术获得单宁,培养到愈伤组织阶段即可。(5)杂种细胞的染色体数为融合前两种细胞染色体数之和,即m+n,“苜蓿—里奥百脉根”细胞在有丝分裂后期,着
丝粒分裂,姐妹染色单体分开,使得杂种细胞中的染色体数目加倍为2(m+n)。单倍体是指体细胞含有本物种配子中染色体数目的个体,杂种植株的花粉经离体培养形成的植株属于单倍体。24.答案(除标注外,每空1分)(1)动物血清维持培养液的pH抗生素定期更换培养液(2)
诱导小鼠机体产生更多能够分泌抗cTnI抗体的B淋巴细胞灭活的病毒诱导(HAT)选择抗体阳性特异性强、灵敏度高(3)与待测抗原结合和催化底物水解(2分)6(2分)姓名班级考号密○封○装○订○线密○封○装○订○线密封线内不要答题解析(1)人们对
细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚,在使用合成培养基时,通常需要加入动物血清等一些天然成分。动物细胞培养的气体环境:95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。抗生
素能抑制细菌的增殖,对真核细胞的培养没有影响,因此为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的抗生素。动物细胞培养过程中,为防止有害代谢物的积累,需要定期更换培养液,以便清除代谢物。(2)为了诱导小鼠机体产生更多能够分泌抗cT
nI抗体的B淋巴细胞,一般通过多次注射相应抗原实现。诱导细胞融合时,常用的化学诱导试剂是聚乙二醇(PEG),与植物原生质体融合方法不同的是还可以用灭活的病毒诱导。为了获得杂交瘤细胞,应将甲放在(HAT)选择培养基上进行培养。②过程表示将乙细胞接种到多孔
培养板上,进行抗体阳性检测,之后稀释、培养、再检测,并多次重复上述操作,其目的是筛选获得抗cTnI抗体产量大、纯度高的杂交瘤细胞丙。单克隆抗体的特点是特异性强、灵敏度高、可大量制备等。(3)分析图中过程,两种抗体与检测的抗原均能结合,但结合部
位是不同的。酶标抗体可以与待测抗原结合,催化底物水解,所以通过检测产物的多少就可确定抗原的含量。三种抗cTnI单克隆抗体为A、B、C,科研人员需要进行6组实验,分别为固相抗体A与酶标抗体B、C两组,固相抗体B与酶标抗体A、C两
组,固相抗体C与酶标抗体A、B两组,通过检测并比较各组实验的产物量,选出适合用于双抗体夹心法的两种抗体。25.答案(每空1分)(1)基因表达载体的构建植物组织培养(2)5'-AATGGATCCTTC-3'3'-GTAAGTTAAGAG
-5'(3)2(4)农杆菌T-DNA物质K(5)超数排卵桑葚胚或囊胚滋养层(6)蛋白质解析(1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。过程②是植物受体细胞经过组织培养形成转基因植物,所需技术手段是植物组织培养技术。
(2)PCR中需要一对特异性的引物,该引物能与目的基因所在DNA片段碱基互补配对,子链延伸时是从引物的5'端向3'端延伸,根据图二信息,则符合条件的引物如下图所示:(3)根据图三可知,图二目的基因所在DNA片段中只有酶B和酶C的识
别序列,可以用他们进行切割;质粒的T-DNA上有酶A和酶B的切割位点,所以切割质粒时,用酶A和酶B切割。结合酶A与酶C的识别序列可知,成功建构的重组质粒中有2个酶C的识别序列,成功建构的重组质粒用酶C处理将得到2个DNA片段。(4)图一过程①中需将植物细
胞与农杆菌混合后共同培养,旨在让T-DNA整合到植物细胞染色体DNA上;除尽农杆菌后,为筛选出转化的植物细胞,利用重组质粒上的报告基因表达产物能催化无色物质K呈现蓝色的特性,将植物细胞转接到含物质K的培养基上进行筛选。(5)过程④前对卵母细胞供体
母牛进行超数排卵处理,以获得更多的卵母细胞。通常将受精卵培养至桑葚胚或囊胚阶段进行移植。过程⑤中进行胚胎性别鉴定时通常取滋养层的细胞做DNA分析。(6)为检测HSA基因的表达情况,可提取受体细胞的蛋白质,用抗血清白蛋白的抗体进行杂交实验。