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检测案39微生物的培养技术及应用[基础巩固练]考点一微生物的分离和培养1．下列关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述，错误的是（）A．操作顺序为计算→称量→溶化→倒平板→灭菌B．将称好的牛肉膏连同称量纸一

同放入烧杯C．待培养基冷却至50℃左右时倒平板D．待平板冷却凝固后将平板倒过来放置2．[2024·江苏南通校考]制备筛选支原体的培养基时，需要在基础培养基里添加动物血清、酵母浸液、青霉素等。多数4～5d长出“油煎蛋”状菌落。下列相关叙述错误的是（）A．动物血清可以提供营养和生长因子

促进支原体的生长和增殖B．可以在筛选支原体的培养基里添加青霉素以防止杂菌污染C．实验时用无水乙醇对实验员的手消毒效果差且有安全隐患D．临床上根据菌落特征确诊是否支原体感染是高效而准确的3．[2024·衡水高三联考]

秸秆还田可增加土壤肥力，缓解环境污染。为分离分解纤维素的微生物菌种，实现废物的资源化利用，研究人员设计了“土壤取样→选择培养→梯度稀释→涂布平板→挑选菌株”的实验流程。下列叙述错误的是（）A．配制培养基时，应在湿热灭菌之后调节pHB．选择培养时，应使用纤维素为唯一碳源培养基C

．进行梯度稀释时，应在酒精灯火焰旁完成各种操作D．挑选菌株后，应将使用过的培养基进行灭菌后再丢弃考点二某种微生物数量的测定4．如图所示，自来水经滤膜过滤后，转移到牛肉膏蛋白胨培养基上，适宜条件下培养48h，染色后统计变色菌落数目为165个。下列说法正确的是（）A．若培养基含伊红—

亚甲蓝，大肠杆菌菌落呈蓝绿色B．自来水中大肠杆菌浓度是33个·L－1，比真实值偏大C．为了提高准确度，需设重复实验，但不用空白对照D．若培养基菌落数目大于300，可适当减少自来水量5．如图为“土壤中分解尿素的细菌的分离和计数”实验中样品稀

释示意图。据图分析正确的是（）A．3号试管中的菌液稀释倍数为103倍B．4号试管中稀释液进行平板培养得到的菌落平均数可能是5号的10倍C．5号试管的结果表明每克土壤中的菌株数为1.7×107个D．该实验方法统计得到的结果往往会比实际活菌数目要高考点三培养基对微生物的选择作用6．通过选

择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮源的培养基上，大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌的生长；在培养基中加入10%的酚可以抑制细菌和霉菌的生长。利用上述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出（）①大肠杆菌②霉菌③放线菌④固氮细菌A．④②③B．①②③

C．①③④D．只有③④7．[2024·青岛模拟]高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如图2所

示情况。下列分析错误的是（）A．过程①②合称为稀释涂布平板法B．甲、乙试管中的液体均为选择培养基C．Ⅱ号培养基上的接种方法为平板划线法D．图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种[提能强化练]8．菌种M和菌种N在发酵工程应用上具有不同的优越性，为了

获得具有它们共同优良性状的融合菌，进行了下图所示的实验。已知菌种M为组氨酸依赖（组氨酸合成相关基因突变为B－），菌种N为色氨酸依赖（色氨酸合成相关基因突变为A－），下列分析错误的是（）A．菌种M和N可通过人工诱变和选择性培养筛选获得B．用PEG诱导融合之前需

要去除菌种M和N的细胞壁C．在培养基X中添加组氨酸和色氨酸以筛选出杂种融合菌D．从培养基X中分离出的杂种融合菌P对两种氨基酸均不依赖9．幽门螺杆菌（含有脲酶）感染是慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样

本并制成菌液后，进行分离培养。下列有关叙述正确的是（）A．分离纯化幽门螺杆菌时应使用以葡萄糖为唯一氮源的培养基B．鉴别幽门螺杆菌时应在培养基中加入酚红指示剂和缓冲物质C．可用牛肉膏蛋白胨培养基作对照证明选择培养基的选择作用D．对幽门螺杆菌进行

分离和计数可用平板划线法或稀释涂布平板法10．聚羟基脂肪酸酯（PHA）是由嗜盐细菌合成的一种胞内聚酯，它具有类似于合成塑料的理化特性，且废弃后易被生物降解，可用于制造无污染的“绿色塑料”。科学家从某咸水湖中寻找生产PHA菌种的流程图如

下。下列说法不正确的是（）①取湖水―→②接种在培养基上―→③培养―→④挑取单菌落并分别扩大培养―→⑤检测菌的数目和PHA的产量―→⑥获得目标菌株A．步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基

上B．步骤③需要将接种后的培养基放入恒温箱中倒置培养C．步骤④所用到的培养基应加入琼脂，以便挑取单菌落获得纯化菌株D．挑取菌落时，应挑取多个菌落并分别测定嗜盐细菌的PHA含量11．苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解

废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。下列相关叙述不正确的是（）A．使用平板划线法可以在⑥上获得单个菌落B．如果要测定②中活细菌数量，常采用平板划线法C

．图中②培养目的菌株的选择培养基中应加入苯酚作为唯一碳源D．微生物培养前，需对培养基和培养器皿进行灭菌处理12．[2024·沈阳二中模拟]金黄色葡萄球菌（SAU）是细菌性肺炎的病原体之一，A、B、C、D四种抗生素均

可治疗SAU引起的肺炎，为选出最佳疗效的抗生素，研究者将分别含等剂量抗生素A、B、C、D的四张大小相同的滤纸片a、b、c、d置于SAU均匀分布的平板培养基上，在适宜条件下培养48h，结果如图。下列叙述错误的是（）A．可采用干热灭菌的方法对该实验使用的培养皿进行灭菌B．抗生素A治疗SAU感染的

效果最好C．接种涂布后的培养皿正向放置于37℃的恒温箱中培养D．滤纸片b周围抑菌圈中出现一个菌落，可能是形成该菌落的SAU发生了基因突变[大题冲关练]13．国际上广泛关注的新污染物有四大类，一是持久性有机污染物

，二是内分泌干扰物，三是抗生素，四是微塑料。微塑料是指直径小于5mm的塑料颗粒，是造成污染的主要载体。某兴趣小组尝试从土壤中分离能分解微塑料的微生物（如图所示）。请回答下列问题：（1）若想找到能分解微塑料的微生物，应从采集土壤，制备土壤悬浮液，接

种到的培养基中进行筛选，这种培养基从功能上划分属于培养基。（2）图示接种方法为。若某同学制作的三个平板的菌落数分别是33、38、31可推测1g土壤中微塑料分解菌数为个，利用该方法得到的结果可能偏，原因是__________________________________

______________________________________________________________________________________________________________。（3）除图示计数法之外，利用也是一种常用的、快速直观的测定微生物数量的方法，

该方法需利用特定的或血细胞计数板。14．解磷菌是一种能将土壤中植物不能利用的磷转化为植物可以利用磷的功能微生物（主要为细菌），在提高土壤中有效磷含量、促进磷循环方面发挥着重要作用。解磷菌能分解含磷化合物使得菌落周围出现透明

圈。下图为从某植物根际土壤中筛选出高效解磷菌的部分流程示意图，步骤Ⅰ表示将1g土壤加入到100mL灭过菌的PVK培养基培养。36h后，取10mL培养液接种于100mLPVK培养基继续培养；连续培养3次后进行实验步骤Ⅱ

－Ⅳ（B、C中培养基的营养成分与A相同）。请据图回答：（1）用于培养解磷菌的培养基在接种前需要通过法进行灭菌。从成分上看，与A相比，B培养基中多了（填物质名称）。为筛选解磷菌，A培养基的碳源最合适的是（填写字母）。A．葡萄糖

B．难溶性磷酸盐C．二氧化碳D．碳酸盐（2）操作Ⅰ的目的是，在操作Ⅱ、Ⅲ中，采用的接种方法分别是___________________________________________________________________

_____________________________________________________________________________。（3）为了尽快观察到解磷菌培养的实验结果，应将接种了样品的平板倒置于中培养，并同时在另一平板上接种无菌

水作为对照进行实验。（4）在固体培养基中分离培养出解磷菌后，需通过测量直径，比较它们的比值以确定其解磷能力从而筛选出目标菌株。（5）为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力，研究人员将它们接种到基础培养基中，并在37、200r·min－1摇床培养，定期取

（填写“上清液”或“沉淀”），测定可溶性磷含量，得到如图所示曲线。用摇床进行培养的好处：、。结果表明最优良的解磷菌株是。15．[2024·九省联考·江西]蒽是石油化工领域常见的一种多环芳烃化合物，对生物有毒且难以降解，会带来严重的环境问题。研究人员成功地从环境样品中

分离得到能降解蒽的菌株A和B。回答下列问题：（1）用于分离菌株A和B的固体培养基含有（NH4）3SO4、MgSO4、CaCl2、NaH2PO4、K2HPO4、NaCl、FeSO4、H2O、琼脂、蒽等成分。其中为细菌生长提供碳源的成分是；该碳

源在菌株A和B内的代谢产物可以参与合成（答出2种即可）等生物大分子。（2）为鉴定菌株A和B，研究人员提取了菌株A和B的基因组DNA，并用PCR扩增16SrRNA基因。为了验证提取基因组DNA是否成功，采用二苯胺试剂鉴定，其原理是。在PCR

扩增16SrRNA基因过程中，反应体系中引物的作用是。在PCR循环的3个步骤中，温度设置最高的是。（3）菌株A和B降解蒽的过程相同，均由按严格顺序排列的一系列静催化反应组成。为探究菌株A和B对蒽的降解能力，研究人员采用单独、混合接种（

菌株AB接种量之比为1∶1）方式开展实验（所有实验组接种总量一致）结果如表，由表可以看出菌株A和B混合接种比单独接种对蒽的降解效果更好，其原因可能是。