【文档说明】四川省宜宾市四中2020届高三上学期期末考试理综生物试题【精准解析】.doc，共(15)页，294.500 KB，由小赞的店铺上传

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四川省宜宾市四中2019-2020学年高三上学期期末理综生物试题1.下列现象不能体现反馈调节机制的是A.人体代谢产生的CO2可调节呼吸频率B.害虫数量增加引起食虫鸟数量增加，进而害虫种群的增长受抑制C.抗利尿激素含量的变化可调节尿量变化维持细胞外液渗透压相对稳定D.植物的遗体被分解者分解产生的无

机物，又可被植物利用【答案】D【解析】【分析】1、血液中的CO2增加，会刺激呼吸中枢，使呼吸加深，排出CO2，以维持内环境的稳态。2、生态系统中的组成成分越多，营养结构就越复杂，生态系统的自动调节能力就

越强，其抵抗力稳定性就越强，相反的其恢复力稳定性就越弱．生态系统具有自我调节能力，其基础是负反馈调节，生态系统的自我调节能力是有一定限度的。3、反馈是指在一个系统中，系统本身工作的效果，反过来又作为信息调节该系统的工作，包括负反馈和正反馈。（1）负反馈调节就是指反馈信息与原输入信息起相反作用

，使得输出的信息减弱。（2）反馈信息促进与加强控制部分的活动，是正反馈调节。【详解】人体代谢产生的CO2会刺激呼吸中枢，使呼吸加深加快，排出多于的CO2，可调节呼吸频率，因此存在反馈调节，A不符合题意；害虫数量增加引起食虫

鸟数量增加，进而害虫种群的增长受抑制，体现了群落内部的负反馈调节，B不符合题意；抗利尿激素含量的变化可调节尿量变化维持细胞外液渗透压相对稳定，体现了水盐调节中激素的负反馈调节，C不符合题意；植物的遗体被分解者分解产生

的无机物，又可被植物利用，体现了物质循环的过程，不能体现反馈调节，D符合题意。2.下列有关实验的说法正确的是A.黑藻是观察真核细胞叶绿体和线粒体的好材料B.用醋酸洋红液对紫色洋葱鳞片叶的内表皮细胞进行染色，可观察到细胞核被染成红色C.用健那绿染色

后在光学显微镜下可看到线粒体内膜某些部位向内腔折叠形成的嵴D.测定酵母菌的呼吸作用时，溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄，说明酵母菌的呼吸作用速率不断增强【答案】B【解析】【分析】观察线粒体应选无色或接近无色的材料，因有色材料会干扰染色后的观察；醋酸洋红为碱性染料，可对染色体进行染色；健那

绿为活体染色剂，可对线粒体进行染色。【详解】A、黑藻是观察叶绿体的好材料，但不能用于线粒体的观察，因有颜色干扰染色，A错误；B、洋葱鳞片叶内表皮不含色素，可用碱性染料醋酸洋红对染色体进行染色，又因染色体集中分

布于细胞核，故可观察到细胞核被染成红色，B正确；C、健那绿染色后，在光学显微镜下不能看到线粒体内膜某些部位向内腔折叠形成的嵴，在电子显微镜下可观察到此现象，C错误；D、测定酵母菌的呼吸作用时，溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄，说明有CO2产生

，并不说明酵母菌呼吸作用速率不断增强，D错误。故选B。【点睛】此类题目解答应先找出实验目的，根据实验目的对相关知识进行梳理，并根据问题提示结合基础知识进行作答。3.为了研究水生生物对富营养化水体中磷的去除作用，研究人员

从某城市内河中取水样分别设置水葫芦、鲢鱼、“水葫芦+鲢鱼”等不同处理组进行实验，分别取样检测水体中总磷浓度变化，结果如图。下列相关叙述错误的是A.对照处理的水体中不含水生生物，总磷浓度上升B.第2、3、4次检测结果显示水葫芦单独处理能降低总磷浓

度C.为保护内河生态环境稳定，需控制水葫芦和鲢鱼的投放数量D.“水葫芦+鲢鱼”的处理方法，对水体中磷去除效果要优于水葫芦单独处理【答案】A【解析】【分析】水体的富营养化是由于水体中氮和磷的含量过高引起的，根据题意，该题研究了水生生物对富营养化水体中磷

的去除作用，设置水葫芦、鲢鱼、“水葫芦+鲢鱼”等不同处理组进行实验，分别取样检测水体中总磷浓度变化，可见该实验的自变量是各组的不同处理方式，因变量是水体中总磷浓度的变化，其他均为无关变量。分析图示可知：水葫芦+鲢鱼组的

处理效果最好，其次是水葫芦处理组，而鲢鱼处理组与对照组的结果相差不大。【详解】对照处理的水体中仍然含有水体中的微生物，A错误；根据图示可知，第2、3、4次检测结果显示水葫芦单独处理能降低总磷浓度，B正确；为保护内河生态环境稳定，需控制水葫芦和鲢鱼的投放数量，水葫芦由于适应环

境可能会出现疯长的现象，进而影响其他生物的生存，破坏生态系统的稳定性，C正确；识图分析可知，“水葫芦+鲢鱼”的处理方法，对水体中磷去除效果要优于水葫芦单独处理，D正确。4.如图为某细胞物质跨膜运输的示意图，下列有关叙述正确的是A.物质甲进出该细胞均不需要消耗能量B.

载体①与载体②都运载物质甲，因此没有特异性C.若温度升高，物质甲进出该细胞的速率可能会加快D.若③在神经细胞中起作用，则该神经细胞正在产生动作电位【答案】C【解析】【分析】分析题图可知，物质甲通过载体①进入细胞，是由低浓度向高浓度进行，属于主动运输；物质甲通过载体②出细胞，

由高浓度向低浓度运输，属于协助扩散；③上正发生K+内流和Na＋外流的过程。【详解】A、物质甲进入细胞的方式为逆浓度梯度的主动运输，需要载体和能量，A错误；B、载体①与载体②分别负责物质甲进、出细胞，仍具有特异性，B错误；C、物质甲进出细

胞均依赖于细胞膜的流动性，适当提高温度可能会促进细胞膜的流动，进而促进物质甲进出细胞的速率，C正确；D、Na＋内流会导致神经细胞产生动作电位，而图③正发生K+内流和Na＋外流，D错误。故选C。【点睛】解答此题的关键是要明

确物质跨膜运输的方式及特点，并结合题图信息分析作答。5.下列有关现代生物进化理论的叙述，错误的是A.自然选择直接作用于个体的表现型，进而导致种群基因频率的改变B.种群基因频率的变化趋势既能预测进化的方向又能预测变异

的方向C.自然选择能定向改变种群的基因频率，决定生物进化的方向D.物种之间、生物与无机环境之间的共同进化形成了生物多样性【答案】B【解析】【分析】现代生物进化理论：(1)进化的基本单位是“种群”；(2)生物进化的实质是种群基因频率的改变；(3)突

变和基因重组为生物进化提供原材料；(4)隔离导致新物种的形成。【详解】A.自然选择直接作用于个体的表现型，使具有有利变异的个体有更多的机会产生后代，种群中相应基因的频率会不断提高，A正确；B.变异是不定向的，不可预测，B错误；C.在自然选择的作用下，

种群的基因频率会发生定向改变，导致生物朝着一定方向不断进化，C正确；D.不同物种之间、生物与环境之间在相互影响中不断进化和发展，通过漫长的共同进化过程，形成了生物多样性，D正确；故选B。【点睛】理解现代生

物进化理论的内涵是本题解题的关键。6.将甲乙两种植物分别置于密闭透明的玻璃罩内，在相同且适宜的条件下进行实验，测定玻璃罩内CO2的含量，结果如下。下列说法正确的是A.0~25min期间，甲乙植物的光合作用逐渐增强B.30~45min期间，甲乙植物均停止光合作用

C.0~45min期间，甲乙植物体内有机物的量逐渐减少D.乙植物光合作用固定CO2的能力比甲植物的强【答案】D【解析】【分析】1、CO2影响暗反应阶段，制约C3的形成。2、分析题意：甲乙两植物是被置于密闭透明的玻璃罩内，CO2含量有限，随着光合作用的进行

，玻璃罩内的CO2浓度降低，单位时间内的CO2减少量可表示光合速率；当密闭容器内的CO2浓度不变时，光合作用强度等于呼吸作用强度。【详解】A.0~25min期间，容器内甲和乙两种植物每5min内的CO2减少量逐渐减小，说明甲乙植物的光合作用逐渐减弱，A错误；B.30~45min期间，

密闭容器内的CO2浓度不变时，甲乙两植物的光合作用强度等于呼吸作用强度，B错误；C.0~45min期间，25min之前甲乙植物光合作用强度大于呼吸作用强度，25min之后光合作用强度等于呼吸作用强度，体内有机物的量先积累后保持不变，C错误；D.如图所示，乙植物最终的CO2浓度低于甲植物，说明

乙植物比甲植物固定CO2的能力强，D正确；故选D。【点睛】分析出单位时间内CO2的减少量代表光合作用强度的强弱是解题的关键。7.某中学生物兴趣小组趁假期对当地一立体观光农业产业园进行了调查。（1）A组同学在院内池塘中发现了

一种鱼，其成年鱼生酒在底层，取食多种底栖动物，而该种鱼的幼体生活在水体上层，滤食浮游动物和浮游藻类。请据此回答：①该种鱼的幼体与浮游动物的种间关系有________________。②某段时间内鱼塘内浮游藻类疯

长，导致鱼虾大量死亡，鱼塘内水变黑变臭，这种现象属于_________调节，体现了鱼塘生态系统________有限。之后工人将鱼塘水排干，在再次放水之前，鱼塘内迅速长满杂草，这种变化属于群落的_______演替。（2）B组同学发现葡萄园照光时间长的地方葡萄挂果比照光时间短的地方要好，这种现象说明信

息传递的作用是_______。（3）C组同学准备釆集部分土壤调查土壤中小动物的类群丰言度，他们需要统计样本中小动物的____来推测园内土壤动物的丰富度。【答案】(1).①竞争和捕食(2).②（正）反馈(3).自我调节能力（抵抗力稳定性）(4).次生(5).生物种群的繁衍，离

不开信息传递（生命活动的正常进行，离不开信息传递）(6).种类和数量【解析】【分析】种间关系（不同种生物之间的关系）：（1）互利共生（同生共死）：如豆科植物与根瘤菌；人体中的有些细菌；地衣是真菌和藻类的共生体。（2）捕食（此

长彼消、此消彼长）：如：兔以植物为食；狼以兔为食。（3）竞争（你死我活）：如：大小草履虫；水稻与稗草等。（4）寄生（寄生者不劳而获）：如：人与蛔虫、猪与猪肉绦虫。【详解】（1）A组同学在院内池塘中发现了一种鱼，其成年鱼生活在底层，取食多种底栖动物，而该种鱼的

幼体生活在水体上层，滤食浮游动物和浮游藻类。请据此回答：①该种鱼的幼体与浮游动物的种间关系有竞争和捕食。②某段时间内鱼塘内浮游藻类疯长，导致鱼虾大量死亡，鱼塘内水变黑变臭，这种现象属于正反馈调节，体现了鱼塘生态系统自我调节能力有限。之后工人将鱼塘水排干，在

再次放水之前，鱼塘内迅速长满杂草，这种变化属于群落的次生演替。（2）B组同学发现葡萄园照光时间长的地方葡萄挂果比照光时间短的地方要好，这种现象说明信息传递的作用是生物种群的繁衍，离不开信息传递（生命活动的正常进行，离不开信息传递）。（3）C组同学准备采集部分土壤调查土壤

中小动物的类群丰富度，他们需要统计样本中小动物的种类和数量来推测园内土壤动物的丰富度。【点睛】本题考查群落和生态系统的知识点，熟知群落的结构、演替和生态系统的功能是解题的关键，题目难度适中。8.WWP2

基因在肿瘤细胞中高度表达，WWP2蛋白参与肿瘤细胞的生长、存活和转移等。为获得较多WWP2蛋白，利用基因工程技术设计引物，其中正向引物5′含有EcoRI酶切位点，反向引物5′含有XhoI酶切位点。将WWP2基因与相应载体构建重组质粒导入人胚肾细

胞。回答下列问题：(1)利用上述的引物，以肺癌细胞的cDNA为模板，通过___________扩增___________的编码序列，获得需要的目的基因片段。(2)把获得的目的基因片段和相应载体，都用___________进行酶切，分别在5′端与3′端形成___________，避免自身环化。然后

利用___________将目的基因片段和相应载体连接，得到重组质粒。(3)先将重组质粒导入经___________处理过的大肠杆菌细胞，培养后从中分离得到较多的重组质粒。(4)培养人胚肾细胞时，先用___________使人胚肾细胞分散成单个细胞，用含有___________的合成培养液

培养，并将培养瓶置于体积分数为5%的___________与空气混合气体的培养箱中培养。(5)将重组质粒导入人胚肾细胞中，48小时后提取蛋白质并检测到WWP2蛋白，说明___________。(6)致癌因子会损伤肺泡细胞中的___________，使原癌基因和抑癌基因发生突变。研究WWP2蛋白的表

达，为肺癌治疗新靶点奠定了基础。【答案】(1).PCR技术(2).WWP2基因(3).EcoRI酶和Xhol酶(4).不同的黏性末端(5).DNA连接酶(6).Ca2+(7).胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理(8).动物血清（血浆）(9).CO2(10).（重组质粒

中的）目的基因（或WWP2基因）在人胚肾细胞中能够正常表达(11).DNA分子【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载

体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的

基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是

否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）获取目的基因可以采用PCR扩增技术，PCR扩增过程中需要引物与模板结合，因此以肺癌细胞的cDNA为模板与题干中的因为结合，然后扩增WWP

2基因，获得需要的目的基因片段。（2）根据题意，目的基因的两端分别有EcoRI酶切位点和XhoI酶切位点，故同时用EcoRI酶和Xhol酶对目的基因片段和相应载体进行酶切，分别在5′端与3′端形成不同的黏性末端，可以避免自身环化。然后利用D

NA连接酶将目的基因片段和相应载体连接，得到重组质粒。（3）大肠杆菌细胞需要用一定浓度的Ca2+溶液处理，使之处于感受态易于吸收重组质粒，重组质粒导入大肠杆菌后经过培养进行增殖，以便获得较多的重组质粒。（4）进行人胚肾细胞培养时，先用胰蛋白酶或者胶原

蛋白酶进行处理，使之分散成单个细胞，动物细胞培养过程中一般需要在合成培养基中添加动物血清或血浆，培养过程中需要的气体环境是5%二氧化碳和95%的空气混合培养，二氧化碳的作用是维持培养液的pH值。（5）将

重组质粒导入人胚肾细胞中，48小时后提取蛋白质并检测到WWP2蛋白，说明目的基因在人胚肾细胞中得到表达，合成了相应的蛋白质。（6）细胞癌变的原因是由于致癌因子的作用，使得细胞内的DNA分子损伤，导致原癌基因和抑癌基因发生突变引起的。【点睛】本题考查

基因工程和动物细胞培养的知识点，要求学生掌握基因工程的操作步骤和限制酶的选择是该题的重点。理解并识记基因工程的操作步骤，特别是掌握PCR扩增技术的过程是解决该题重点的关键；掌握并识记动物细胞培养的过程和条

件是解决第（4）问的关键。9.下图为人体体温调节的示意图，请据图回答问题：（1）受到寒冷刺激时，激素c、d的分泌均会增加，其中产生c的过程属于________调节（填“神经”、“体液”、“神经一体液”），产生d

的过程中效应器是________。（2）激素c和d都能作用于骨骼肌和内脏，通过_________产生热能使体温维持恒定。（3）寒冷使人面色变白，原因是_________________。（4）激素e与肾小管、集合管上皮细胞表面受体结合后，经过信息转换，

促使细胞内囊泡向细胞膜定向转移，从而提高肾小管和集合管对水的通透性，囊泡膜上很可能含有_________，据此推测，尿液中的水可能以_________的方式被重吸收。【答案】(1).神经一体液(2).传出神经末梢及其支配的肾上腺(3).促进细胞中有机

物的氧化放能（促进细胞代谢）(4).寒冷环境中，皮肤内毛细血管收缩，血流量减少(5).水通道蛋白(6).协助扩散【解析】【分析】1、下丘脑是神经内分泌的枢纽，其主要功能有：感受兴奋、传导兴奋、作为血糖、体温、水盐平衡的中枢及

内分泌功能。图中腺体A是甲状腺。2、寒冷时，下丘脑分泌促甲状腺激素释放激素促进垂体分泌促甲状腺激素，促进甲状腺分泌甲状腺激素，促进代谢增加产热。当甲状腺激素含量过多时，会反过来抑制下丘脑和垂体的分泌活动，这叫做负反馈调节。

3、体内失水过多或食物过咸时：细胞外液渗透压升高→下丘脑感受器受到刺激→垂体释放抗利尿激素多→肾小管、集合管重吸收增加→尿量减少，同时大脑皮层产生渴觉（饮水）。4、胰岛素和胰高血糖素都是由胰腺的胰岛细胞分泌，但胰高血糖素由胰岛A细胞分泌，具有升高血糖作用，胰岛

素由胰岛B细胞分泌，具有降低血糖浓度的作用。在血糖调节中，胰高血糖素和肾上腺素都能促使血糖含量升高，这两种激素间的关系是协同作用。【详解】（1）当图中的感受器接受到寒冷刺激后，可导致甲状腺激素分泌量增加，此调节过程属于神经-体液调节，产

生肾上腺激素的效应器是传出神经末梢及其支配的肾上腺。（2）甲状腺激素c和肾上腺激素d都能作用于骨骼肌和内脏，通过促进细胞中有机物的氧化放能（促进细胞代谢）产生热能使体温维持恒定。（3）寒冷使人面色变白，原因是皮肤毛细血管收缩，血流量减少。（4）抗利尿激素与肾小管上皮细

胞膜上受体结合后，使囊泡膜与管腔侧细胞膜融合，增加膜上的水通道蛋白数量，从而使细胞膜对水的通透性增加。据此推测，尿液中的水可能以协助扩散的方式被重吸收。【点睛】本题考查生命活动的调节的知识点，熟知神经调节

和体液调节的过程是解题的关键，题目难度适中。10.蚕蛾染色体（2n＝56），ZW型性别决定。一种罕见的黑体雄蛾与常见的浅色体雌蛾杂交，F1为黑体。F1互交，F2所有雄蛾都是黑体，而雌蛾中一半为浅色体。

用A、a表示不同体色基因。回答以下问题：（1）若大量亲本黑体雄蛾与浅色体雌蛾杂交，观察到后代有极少的浅色体雄蛾，有不同的假说。假说一：后代少了一条染色体：假说二：发生了基因突变：假说三：_____。（2）①为验证假说一是否成立，可以取后代浅

色体雄蛾具有分裂能力的体细胞，观察处于_____期染色体数目，异常：或者观察后代的浅色体雄蛾_____时期的细胞，四分体的个数为_____个，假说成立。原因可能是亲本黑体雄蛾少数精原细胞在减数分裂发生___

__情况，产生某种异常精子与卵细胞结合后，发育为性染色体组成为ZO的后代浅色体雄蛾。②若假说一不成立，可用荧光标记法将A、a基因分别标记为蓝色、绿色。若后代的浅色体雄蛾初级精母细胞中荧光点数目和颜色为_____，则假说二成立，否则假说三成立。（3）蚕卵的颜色由10号

常染色体上的基因B和b决定，常见颜色为紫灰色和白色。现将两只蚕蛾多次杂交，后代出现的性状分离比为：紫灰色雄性：紫灰色雌性：白色雄性：白色雌性＝6：3：2：1．请做出合理的解释_____。【答案】(1).含有ZA基因片段的染色体缺失（或染色体片段缺失）(2).有丝分裂中(3).减数第一

次分裂(4).27(5).减数第一次分裂两条Z同源染色体未分离（或减数第二次分裂，次级精母细胞的两条姐妹染色单体，进入同一个精细胞）(6).四个绿色荧光点或无蓝色荧光点(7).Z染色体上存在某个隐性纯合致

死基因【解析】【分析】由题干信息可知，“一种罕见的黑体雄蛾与常见的浅色体雌蛾杂交，F1为黑体。F1互交，F2所有雄蛾都是黑体，而雌蛾中一半为浅色体”，推测黑体对浅色体显性，罕见的黑体雄蛾是基因突变的结果，其基因型ZAZA，浅色雌蛾基

因型ZaW。【详解】（1）若大量亲本黑体雄蛾与浅色体雌蛾杂交，观察到后代有极少的浅色体雄蛾，对此可有三种不同的假说。假说一：后代少了一条染色体；假说二：发生了基因突变；假说三：含有ZA基因片段的染色体缺失（或染色体片段缺失）。（2）①若假说一成立，即后代少

了一条染色体。取后代浅色体雄蛾具有分裂能力的体细胞，观察处于有丝分裂中期染色体数目，染色体数目为55条比正常体细胞少1条；或者观察后代的浅色体雄蛾减数第一次分裂时期的细胞，四分体的个数为27个（少1条染色体后，

同源染色体两两配对只形成27对），则假说成立。推测产生这种情况的原因可能是亲本黑体雄蛾（ZAZA）少数精原细胞在减数第一次分裂两条Z同源染色体未分离，一起进入次级精母细胞，另一个次级精母细胞无Z染色体，产生异常精子O，与正常浅色体雌蛾卵细胞Za受精最终形成ZaO个体，表现浅色

体雄蛾。（或减数第二次分裂，次级精母细胞的两条姐妹染色单体，进入同一个精细胞，导致另一个精子无Z染色体，与正常浅色体雌蛾卵细胞Za受精最终形成ZaO个体，表现浅色体雄蛾）。②若假说一不成立，假说二成立，即雄性少数后代发生了基因突变，

由ZAZa突变为ZaZa，表现浅色体雄蛾。用荧光标记法将A、a基因分别标记为蓝色、绿色。若后代的浅色体雄蛾初级精母细胞中荧光点数目和颜色为四个绿色荧光点（或无蓝色荧光点），说明浅色体雄蛾初级精母细胞中无A基因，则假说二成立。否则假说三成立。（3）由题干信息“蚕卵的颜色由10

号常染色体上的基因B和b决定，常见颜色为紫灰色和白色。现将两只蚕蛾多次杂交，后代出现的性状分离比为：紫灰色雄性：紫灰色雌性：白色雄性：白色雌性＝6：3：2：1。”统计紫色：白色＝（6＋3）：（2＋1）＝9：3

＝3：1，说明这两只蚕蛾常染色体基因型都是Bb；雄性：雌性＝（6＋2）：（3＋1）＝8：4＝2：1，说明雌性存在致死现象。综合以上分析，这两只蚕蛾常染色体基因型分别为BbZAZa和BbZAW，杂交后代出现ZaW致死，即Z

染色体上存在某个隐性纯合致死基因。【点睛】本题考查基因自由组合定律的相关知识，意在考查学生的识记能力和判断能力，运用所学知识综合分析问题的能力。[生物—一选修l：生物技术实践]11.[生物—一选修l：生物技术实践]为了调查厦门自来水的

质量情况，某研究小组对自来水水样中的细菌含量进行了测定，请回答下列问题：(I)在微生物的培养过程中，对培养基灭菌常用的方法是__。为防止冷凝水影Ⅱ向细菌的生长，需将培养皿____培养。(2)若小组采用平板划线法分离水样中的细菌，在培养基上共画了5个区域，则至少需要_

_次灼烧接种环。(3)可通过滤膜法检测自来水中大肠杆菌的数量，将已知体积的水过滤后，将滤膜放在____培养基上培养。该培养基除了为大肠杆菌的生长繁殖提供水和碳源外，还应提供____等基本营养成分。(4)某同学采用稀释涂布平板法统计菌落数目，菌落分布

如图所示，推测该同学可能的操作失误是___。【答案】(1).高压蒸汽灭菌(2).倒置(3).6(4).伊红美蓝(5).氮源和无机盐(6).涂布平板时涂布不均匀【解析】【分析】题干中接种方法用的是稀释涂布法，该方法是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同

稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养．在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。【详解】（1）在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方

法是高压蒸汽灭菌。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿倒置培养。（2）接种时接种环需要灼烧灭菌；在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是通过划线次数的增加，使每次划线时菌体的数目逐渐减少，以便得到单个菌落．

每次划线之前及接种之后都要对接种环进行灭菌，因而划5个区域，则需要6次灼烧接种环。（3）检测自来水中大肠杆菌的数量，可选用伊红美蓝培养基，伊红美藍培养基除了为大肠杆菌的生长繁殖提供水和碳源外，还可以提供氮源和无机盐等基本营养成

分。（4）图中菌落分布不均匀，由此推测该同学接种时可能的操作失误是涂布不均匀。【点睛】注意平板划线法和稀释涂布平板法的区别：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着

线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。12.癌细胞表面蛋白“PDL﹣1”与T细胞表面蛋白“PD﹣1”特异性结合后，可抑制T细胞活性并启动其凋亡，导致肿瘤细胞发生免

疫“逃逸”。研究者对“PD﹣1”基因进行克隆、表达及生物学活性鉴定，为制备抗体打基础。研究中所用引物α和β碱基序列见图1、几种常用限制酶名称及识别序列与酶切位点见图2：（1）首先提取细胞中的mRNA反转录生成_____

作为模板：设计含有不同的限制酶切点的α和β序列为引物，通过_____技术扩增目的基因。（2）选用图1中的两种名称分别为_____的限制酶将“pIRES2﹣EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。该表达载体的组成，除了目的基因、标记基因抗卡那霉素基因外

，还必须具有_____等（3）而后一定温度下，与经过Ca2+处理的感受态大肠杆菌混合培养在含有_____培养基中，可筛选出已经完成转化的大肠杆菌，继续培养该种大肠杆菌以扩增重组DNA。（4）将扩增后的“pIRES2﹣EGF

P载体/PD﹣1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD﹣1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有_____。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解293T细胞，提取该物质看能否与__

___发生结合，从而阻断“PD﹣1与PDL﹣1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2﹣EGFP载体”转入293T细胞，其目的是_____。【答案】(1).cDNA(2).PCR(3).XhoI、EoRI(4).启动子、终止子、复制原点

(5).卡那霉素(6).PD﹣1蛋白(7).PDL﹣1或答ⅣD﹣1抗体(8).作为对照【解析】【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因

工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有

效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因−−DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA−−分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质−−抗原−抗体杂交技术。个体

水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【详解】（1）以mRNA为模板反转录形成cDNA；扩增目的基因可采用PCR技术。（2）根据图1中碱基序列和图2中四种限制酶的识别序列可知，选用图1中的两种名称分别为XhoI、E

oRI的限制酶将“pIRES2−EGFP质粒”载体进行双切，再用DNA连接酶将其与目的基因拼接，构建表达载体。基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、终止子、复制原点等。（3）根据第（2）题可知，标记基因是卡那霉素抗性基因，因此培养基中需要加入卡那霉素

。（4）将扩增后的“pIRES2−EGFP载体/PD−1重组DNA”转入可高度表达外源基因的原代293T细胞。一段时间后，为确定PD−1基因是否表达，检测细胞膜表面是否具有PD−1蛋白。为判断其是否具有生物学活性和功能，则可裂解29

3T细胞，提取该物质看能否与PDL−1发生结合，从而阻断“PD−1与PDL−1信号通路”。研究中还会有一步骤，只将“pIRES2−EGFP载体”转入293T细胞，其目的是作为对照。【点睛】本题考查基因工程的相关知识，要求考生识记基因工程的概念、原理及操作步骤

，掌握各操作步骤中需要注意的细节，能结合所学的知识准确答题。