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练透答案精析第1章发酵工程第1节传统发酵技术的应用1．D[传统发酵常常是固体发酵或者半固体发酵，D错误。]2．D[酶具有专一性，蛋白酶只能水解蛋白质，脂肪酶才能水解脂肪，A错误；霉菌发酵过程中，保持湿润的环境有利于霉菌的生长与繁殖，B错误；霉菌为好氧细菌，但乳酸菌为厌氧

细菌，乳酸发酵应在无氧条件下进行，C错误；在微生物的作用下，大豆所含的蛋白质、脂肪等大分子物质被分解形成易于吸收的小分子物质，同时微生物的呼吸要消耗大豆中的营养物质，并形成多种中间产物，所以酱豆中有机物的种类增加，含量减少，营养价值增加，D正确。]3．D[参与果酒制作的微生物是酵母菌，

属于真核生物，A错误；参与果醋制作的醋酸菌是好氧细菌，果醋发酵需要有氧条件，B错误；不同的发酵产物需要的温度不同，C错误。]4．D[当糖源不足时，醋酸菌将乙醇分解产生乙醛，再将乙醛变为乙酸，D错误。]5．B[乳酸菌无

氧呼吸的产物是乳酸，不产生CO2，A错误；泡菜腌制时坛内要留有约1/3的空间，盖好坛盖，向坛盖边沿的水槽中注满水，以保证乳酸菌发酵所需的无氧环境，C错误；盐水需要煮沸，防止杂菌污染，食材一般不需煮沸，D错误。]6．D[葡萄醋发酵阶段处于有氧环境，酵母菌进行有氧呼吸，也不产生酒精，D错误

。]7．C[果酒发酵的适宜温度在18～30℃，果醋发酵的适宜温度在30～35℃，所以由果酒发酵转入果醋发酵时需要适当调高温度，C错误。]8．B[过程①是细胞呼吸的第一阶段，过程②是无氧呼吸的第二阶段，细胞呼吸的第一阶段以及无氧呼吸均发生在细胞质基质中，过程③是有氧呼吸的第二、三阶段，发生在线粒体中

，而过程④为果醋制作过程，醋酸菌为好氧细菌，属于原核生物，没有线粒体，A错误；可利用酸性重铬酸钾检测是否有酒精的产生，C错误；过程①②③是酵母菌的细胞呼吸，所需的最适温度基本相同(18～30℃)，过程④是醋酸发酵过程，所需的最适温度在30～

35℃，故过程①～④所需的最适温度不相同，D错误。]9．C[醋酸菌是好氧细菌，在氧气充足的环境中才能进行旺盛的生命活动；酵母菌属于兼性厌氧微生物，在有氧和无氧环境中都能生存，但其无氧呼吸产生的能量少，不能满足其繁殖时对能量的需求，所

以两者的正常繁殖都离不开氧气，A、B正确；醋酸菌在缺乏糖源时，能将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸，同时释放能量，C错误，D正确。]10．C[粟米饭和米酒中的酒精在醋酸菌的作用下氧化，转化成乙酸和水，进行酿醋，A正确；温度会影响酶的活性，影响微生物

的发酵，“粟米饭掸冷如人体”避免了高温影响发酵微生物的活性，B正确；醋酸菌是好氧细菌，“绵幕瓮口”是为了更好地让发酵微生物进行有氧呼吸，C错误；“每日再度搅之”可以提供氧气，又可使营养物质与发酵微生物充分混

合，让底层发酵更充分以增加发酵产物量，D正确。]11．B[据图1可知，泡菜制作过程中乳酸菌数量先上升后下降，不呈“S”形增长，A错误；图2中发酵初期乳酸产生量较少，可能与氧气含量有关，初期氧气浓度较高，抑制乳酸菌发酵产生乳酸，B正确；据图3

可知，发酵后期亚硝酸盐含量较少，是食用泡菜的最佳时间，C错误；泡菜发酵过程中检测亚硝酸盐含量的目的是为了把握取食泡菜的最佳时机，D错误。]12．C[气体入口应深入发酵液内部使果醋发酵时醋酸菌充分与气体接触，出口则不用，故两者不能互换，A错误；果酒发酵时通入氮气，有利于发酵瓶中氧气的排出，

酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸，B错误；在缺少糖源、氧气充足时，醋酸菌可将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸，D错误。]13．(1)乳酸菌CO2(2)乳酸菌抑制杂菌生长(3)①亚硝酸盐含量变化最大；亚硝酸盐峰值最高②高盐浓度有利于抑制杂菌的生长繁殖，产生的硝酸还原酶少，减缓了硝

酸盐还原③使用适宜浓度的食盐腌制泡菜；泡菜腌制到一定时间后才能食用14．(1)不需要开盖放气，避免因开盖可能造成的杂菌污染防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出；便于发酵初期酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖(2)不能醋酸菌是

好氧细菌，而果酒发酵为无氧环境，醋酸菌无法生存(3)打开瓶盖，盖上一层纱布，将温度控制在30～35℃(4)防止空气中的杂菌污染第2节微生物的培养技术及应用第1课时微生物的基本培养技术1．B[微生物在固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼

可见的菌落，A错误；硝化细菌可利用氧化NH3释放的能量合成有机物，B正确；固体培养基中加入的琼脂不能被微生物分解利用，故琼脂不能提供额外的碳源和氮源，C错误；酵母菌不属于细菌，D错误。]2．D[培养该菌时，需要加入蒸馏水；该微生物为异养

生物，需要葡萄糖作为碳源；培养该微生物需要无机盐，故需要加入氯化钠；该微生物可以自己固氮，不需要加入氮源，故不需要加入蛋白胨，D符合题意。]3．A[固体培养基中含有凝固剂琼脂，加入水不会制成液体培养基，C错误；在培养细菌时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性，D

错误。]4．D[对无菌室、超净工作台可采用紫外线杀菌，对实验员可用酒精擦拭双手进行消毒，A错误；家庭制作酸奶时，要将容器进行灭菌，鲜牛奶不进行灭菌，以免杀死乳酸菌，B错误；加入培养基中的指示剂和染料也需要灭菌，否则可能会污染培养基，C错误；灼烧灭菌法可杀死物体内外所有的微生物(包括微

生物的营养体、芽孢和孢子)，D正确。]5．D[灭菌可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子，消毒只能杀死物体表面或内部一部分微生物，A错误；玻璃器皿等耐高温、需要保持干燥的实验器具，应采用干热灭菌法进行灭菌，而用酒精直接擦拭达不到彻底灭菌的目的，B错误；灼烧灭菌的对象可以是金属器具，也可

以是玻璃器具，C错误；消毒和灭菌的原理是相同的，都是使微生物的蛋白质变性，D正确。]6．D[接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用湿热灭菌法处理，A错误；倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，而称量、溶化不需要在酒

精灯火焰旁进行，B错误；倒好的平板需要冷却后使用，C错误。]7．C[从第二次划线开始，每次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，C错误。]8．D[划线之前应对接种环灼烧灭菌；划线操作在酒精灯火焰旁进行；在5个区域中，只要有单个活菌，通过培养均可获得所需菌落。]9．C[根据表格分析，

甲能在Ⅰ中正常生长繁殖，而乙和丙都不能，而Ⅰ培养基缺氮，说明甲属于固氮微生物；乙能在Ⅱ中正常生长繁殖，而甲和丙都不能，Ⅱ培养基中没有有机碳源，说明乙属于自养微生物；而丙不能在Ⅰ培养基中生长，说明不能固氮，又不能在Ⅱ培养基中生长，说明不能合成有机物，只能在Ⅲ培养基中生长，说明

丙属于异养微生物，C正确。]10．B[倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现，可以判断培养基有无污染，A正确；该菌为嗜热菌，应放置在其适宜的高温条件下培养，而不是37℃，B错误；图中嗜热菌

在添加了乙、丙特殊营养物质的区域生长，故该菌需要的特殊营养物质是乙和丙，C正确；不同的菌种所需的特殊营养物质不同，利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，菌种只会在提供其需要的生长因子的区域生长，D正确。]11．A[消毒和灭菌的结果不完全相

同，消毒只能杀死物体体表或内部的一部分微生物，而灭菌能杀死物体内外所有的微生物，包括孢子和芽孢，B、C错误；接种环可以直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧灭菌，而培养皿不行，培养皿常采用干热灭菌法灭菌，D错误。]12．C[倒平板后应等平板冷凝后，再将培养皿倒置，A错误；转换划线角度后要对接种环进行

灼烧灭菌，冷却后再进行划线，B错误；划线时左手将皿盖打开一条缝隙，右手于酒精灯火焰旁将接种环迅速伸入平板内，在培养基表面迅速划三至五条平行线，盖上皿盖，不可完全打开皿盖，D错误。]13．(1)琼脂(凝固剂)(2)湿热灭

菌碳源氮源(3)防止皿盖上的水珠落入培养基灭菌14．(1)扩展青霉有以核膜为界限的细胞核，枯草杆菌无(2)液体蔗糖为扩展青霉的生长提供氮源和无机盐、维持培养液一定的渗透压(3)第一区域划线结束，接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始(4)消毒相同病斑情况下，离病斑越远的部位，Pat含

量越低相同部位病斑越大，Pat含量越高解析(2)活化扩展青霉菌种使用的培养基成分中没有凝固剂，故根据物理性质划分该培养基属于液体培养基。(3)每次从上一次划线的末端开始，能使扩展青霉的数目随着划线次数的增加而逐

步减少，最终能得到由单个细胞繁殖而来的菌落。若划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落，可能是因为第一区域划线结束，接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始。(4)接种扩展青霉前，为了

避免苹果上其他杂菌、病原微生物的污染，应对苹果进行消毒处理。由图可知，①号为腐烂部位，②③④⑤依次距离腐烂部位越来越远，推测相同病斑情况下，①号部位的Pat含量最高，离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低，相同部位病斑越

大，Pat含量越高。第2课时微生物的选择培养和计数1．B[能分解尿素的细菌是一种分解者，属于异养型生物，不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，B错误。]2．D[由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以利用稀释涂布平板法获得的菌落数往往少于实际

的活菌数，A错误；平板划线法不需要稀释菌液，是将菌液通过接种环连续划在固体培养基表面，B错误；稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基中进行培养，C错误。]3．B[图中①～③的过程中加入油烟污染物作为唯一碳源，能够初步筛选出能分解油烟的微生物，故该过程称为选择培养，A错误；配制固体培养基

时加入琼脂，其作用是作为凝固剂，而不是为微生物生长提供碳源，C错误；分离菌种常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，但对活菌进行计数时常用稀释涂布平板法而不能用平板划线法，D错误。]4．C[若将土壤稀释液进行灭菌，则不能筛选出能高效降解原油的菌株，C错误。]5．C[过程

①表示利用紫外线诱导基因突变，故过程①属于诱变育种，A正确；过程②可采用平板划线法或稀释涂布平板法接种，B正确；菌体随β­胡萝卜素含量增加从黄色加深至橙红色，所以进行过程③时，应选取橙红色的菌落接种至液体培养基进行富集培养，C错误；结合题意“未突变菌不能在含有β­紫罗

酮的培养基上生长”可知，只有突变菌株可以在添加了一定浓度的β­紫罗酮的培养基上生长菌落，因此该培养基具有选择功能，D正确。]6．B[要分离硝化细菌，应该用以铵盐为唯一氮源的培养基，培养基中不能加入牛肉膏蛋白胨，A错误；平板划线法不能用于菌落计数，C错误；若空白对照组上长出了菌落，则说明培

养基被污染了，实验数据无效，需重新实验，D错误。]7．C[显微镜直接计数法无法区分死菌和活菌，A正确；稀释涂布平板法计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故而统计值比实际值小；显微镜直接计数法计数时不能区分死菌和活菌，故测定的微生物数量往往大于

实际的活菌数，因此两种计数方法其统计值与实际值相比，均有差异，但产生差异的原因不同，B正确；稀释涂布平板法观察到的是菌落的形态特征，而不是微生物的形态特征，显微镜直接计数法观察到的是微生物的形态特征，C错

误。]8．C[要探究微生物种类和数量的变化，应采用固体培养基，用稀释涂布平板法进行接种，液体培养基无法观察到菌落，不便区分微生物种类，平板划线法不能对微生物进行计数，A、B错误；每组至少设置三个平板，避免偶然性，确保实验结果的准确性，C正确；对照组还需要设置接种没有覆盖保鲜膜的西瓜的瓜

瓤浸出液的平板，D错误。]9．B[根据题干信息“甲菌菌落周围呈现深蓝色”，说明甲菌可以分泌脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸，脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色，因此甲菌属于解脂菌，A正确；乙菌落周围没有出现深蓝色，说明乙菌落不能产生脂肪酶，不能

利用脂肪为其供能，但乙菌落也可以在培养基上生存，说明该培养基不是以脂肪为唯一碳源，B错误；可将两种菌分别接种在同一平板的不同区域进行对比，更加直观，C正确；可以利用该平板来比较解脂菌分泌脂肪酶的能力，观察指标可以是菌落周围深蓝色圈的大小，D正确。]10．D[由图观察可知，乙中的菌

落A是野生型菌种，菌落B为精氨酸依赖型菌株，B可作为鸟氨酸发酵的优良菌种，D错误。]11．C[平板划线法中多次划线的目的是降低菌种浓度，经过连续划线才有可能得到由单一的细胞繁殖而成的菌落，这种菌落才符合要求，C错误。]12．A[在全营养的LB培养基(普通培养基)中，几乎所有细菌都能生

长，不能筛选大肠杆菌，A符合题意；在尿素固体培养基中，只有能分解尿素的微生物才能生长，不能分解尿素的微生物因缺乏氮源不能生长，能够筛选分解尿素的微生物，B不符合题意；在以纤维素为唯一碳源的培养基中，只有能分解纤

维素的微生物才能生长，不能分解纤维素的微生物因缺乏碳源不能生长，能够筛选分解纤维素的微生物，C不符合题意；在培养基中加入不同浓度的氯化钠，只有抗盐的微生物才能生长，故可用于筛选抗盐突变体的微生物，D不符合题意。]13．(1)以尿素为唯一氮源为细菌生长提供无机盐、作为缓冲液维持培养液

的pH(2)稀释涂布平板法未接种的空白培养基检测培养基是否被污染(3)105或106偏小当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落14．(1)稀释(2)以除草剂为唯一氮源的固体培养基前湿热

灭菌(3)N2该除草剂(4)稀释涂布平板法1.6×109解析(3)根据题中信息“该除草剂的培养基不透明”，则可知无透明带菌落利用的氮源并不是除草剂，而是空气中的N2，有透明带菌落利用的氮源为该除草剂。(4)接

种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法还可用于对微生物进行计数。在4个平板培养基上分别接种稀释倍数为106的土壤样液0.1mL，培养后菌落数目分别为155、160、176、149，则每毫升原土壤样

液中上述微生物数量为(155＋160＋176＋149)÷4÷0.1×106＝1.6×109(个)。第3节发酵工程及其应用1．B[发酵工程中所用的菌种大多是单一菌种，一旦有杂菌污染，可能导致产量大大下降，因此，培养基和发

酵设备都必须经过严格灭菌，故发酵工程的菌种不可以利用原材料中含有的菌种；发酵工程的性状优良的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种和基因工程育种获得。]2．C[发酵工程的基本环节包括菌种选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵，产品的分离、提纯等方面，其中发酵是发酵工程的中

心环节，A错误；发酵过程中应随时检测培养液中的细菌数目、产物浓度等，同时应对发酵过程中的一些条件进行控制才能保证发酵的正常进行，B错误；在发酵工程的发酵环节中，发酵条件不仅影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢途径，D错误。]3．B[谷氨酸棒状杆菌在扩大培养时，培养基中营养物质的浓度要合

适，若浓度过高，不利于谷氨酸棒状杆菌的大量繁殖，A错误；谷氨酸是小分子物质，单纯的过滤、沉淀等方法不能将谷氨酸从培养液中分离提取出来，B正确；谷氨酸发酵过程中，当谷氨酸合成量过多时，就会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，从而使谷氨酸的合成过程中断，因此需要及时地排出谷氨酸，才

可以解除此抑制作用，有利于谷氨酸的合成和产量的提高，C错误；谷氨酸发酵过程中，当发酵液的pH为酸性时，谷氨酸棒状杆菌易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，D错误。]4．B[培养基要在菌种确定之后，再选择原料制备。而且在生产实践中，培养基的配方要经过反复试验才能确定。

]5．B[单细胞蛋白是指以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废料等为原料，通过发酵获得的大量的微生物菌体，而并非微生物的代谢物，B错误。]6．B7．C[主发酵过程中还原糖主要用于无氧呼吸产酒精，同时无氧呼吸产生的CO2会使

pH下降，C错误；发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期由于糖类物质不充足，产生的气体变少，可以延长排气时间间隔，D正确。]8．B[微生物农药是利用微生物或其代谢物来防治病虫害的，B错误。]9．D[青霉菌处于葡萄糖浓度不足的环境中会通过分泌青霉素杀死细菌；提供相同含量的碳源，葡

萄糖溶液单位体积中溶质微粒较多，会导致细胞失水，发酵液中的碳源不宜使用葡萄糖，乳糖是二糖，可被水解为半乳糖和葡萄糖，是青霉菌生长的最佳碳源，可以被青霉菌缓慢利用而维持青霉素分泌的有利条件，A正确；青霉菌的代谢

类型为异养需氧型，可用深层通气液体发酵技术提高产量，B正确；选育出的高产青霉素菌株经扩大培养纯化后，才可接种到发酵罐中进行工业化生产，C正确；为了防止细菌、其他真菌等微生物的污染，获得纯净的青霉素，发酵罐仍需严格灭菌，D错误。]10．B[果酒发酵的适宜温度为18～30℃，因此夏

季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理，A正确；乙醇是酵母菌无氧呼吸的产物，因此分解过程中不需要通入空气，B错误；无氧呼吸产生了二氧化碳，但是没有消耗氧气，因此发酵罐中的气压不会低于大气压，C正确；葡萄酒发酵的原

料是糖类，因此可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵，D正确。]11．A[利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质已取得成功。]12．B[焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并保持酶的活性，不是为了灭菌，B错误。]13．(1)诱变育种扩大培养快速增加菌种的数量(2)残留在培养基

中的化学药物会抑制青霉菌的生长繁殖(3)温度、pH、溶解氧、罐压、营养物质微生物数量、产物浓度(4)过滤14．(1)ABCE(2)通气量不足(3)氮源pH(4)不断向发酵液中通入无菌空气，发酵液中碳氮比为4∶1，培养一段时间使菌种大量繁殖，后将培养液的碳氮比改为

3∶1(改变细胞膜的通透性，使谷氨酸迅速排放到细胞外)重点突破练(一)1．B[泡菜制作过程中乳酸菌进行无氧呼吸，不能每天打开泡菜坛，否则会导致发酵失败，A错误；酒曲中含有酵母菌，利用传统作坊中的酒曲，有利于大规模生产黄酒，B正确；发酵果酒的葡萄汁不能煮沸，否则会杀死葡萄汁中的野生酵母菌，C

错误；在腐乳制作发酵过程中，微生物会产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等多种酶，不需要添加，D错误。]2．C[制作泡菜时，所用的泡菜坛要用白酒擦拭消毒，防止杂菌污染，A正确；“陈泡菜水”中含有乳酸菌，因此制作泡菜时，加入“陈泡菜水”起到增加乳酸菌数量的作用，缩短制

作时间，B正确；密封发酵一段时间后，乳酸菌无氧呼吸产生乳酸，使泡菜变酸，C错误；制作泡菜的过程中蔬菜中有机物被乳酸菌等微生物分解，导致蔬菜中有机物的干重减少而种类增加，D正确。]3．C[参与果酒制作的微生物是酵母菌，其最适生长温度约为28℃，在制作蓝莓酒时，温度应该控制在18～30

℃，A正确；过程③是乙酸发酵，所用的微生物是醋酸菌，醋酸菌在氧气、糖源都充足的条件下可直接将蓝莓汁发酵为蓝莓醋，B正确；酒精发酵为无氧环境，而醋酸菌是好氧细菌，即使发酵装置中含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌也不能将果汁中的糖分解为乙

酸，C错误；利用重铬酸钾溶液在酸性条件下检测，若出现灰绿色，说明有酒精产生，D正确。]4．B[制作果酒的过程中，夹子①先打开后关闭，夹子②在发酵过程中间歇打开，果醋发酵时需要氧气，因此用图1装置进行果

醋发酵时，需打开夹子①②，A错误；图2曲线a～b段，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，酵母菌有氧呼吸过程中氧气消耗量等于二氧化碳产生量，因此瓶内的气压基本不变，C错误；分析图2可知，随着发酵时间的推进，葡萄糖含量降低，乙醇的浓度先上升后趋于稳定，但乙醇的产生速率先

上升，后下降为0，D错误。]5．A[牛奶的消毒常用巴氏消毒法，B错误；接种环经灼烧灭菌、冷却后才可以挑取菌落，C错误；在微生物接种的实验中，一般用体积分数为70%的酒精对实验者的双手进行消毒，用紫外线照射30min对超净工作台进行消毒，D错误。]6．C[①区域是划

线开始的区域，此区域接种微生物较多，不易出现单菌落，④区域最易出现单菌落，是观察菌落特征的最佳区域，C错误。]7．C[步骤①表示倒平板，倒平板的培养基需要先调节pH后灭菌，A错误；接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成步骤

④中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成步骤④共需灼烧接种环6次，B错误、C正确；接种结束后，将平板倒置培养，在皿底上(不是在皿盖上)标注菌种及接种日期等信息，D错误。]8．B[此培养基中能

生长多种微生物，不仅仅只有大肠杆菌，A错误；培养基中葡萄糖作为碳源并提供能量，牛肉膏可以为微生物的生长繁殖提供碳源和氮源，B正确；该培养基调节合适的pH后要进行湿热灭菌操作，C错误；从物理性质看，该培养基含有琼脂，属于固体培养基，从用途看，

该培养基用于鉴定大肠杆菌，属于鉴别培养基，D错误。]9．B[筛选不需要亮氨酸的菌株时培养基中不需要添加链霉素和亮氨酸；筛选抗链霉素的菌株时需要向培养基中添加链霉素和亮氨酸；筛选不需要亮氨酸且抗链霉素的菌株时需要向培养基中添加链霉素，但不添加亮氨酸，B正确。]10．C[步骤⑤中自变量是挑取

的不同的菌落，各培养瓶中的X溶液的浓度应该是一致的，C错误。]11．D[农田或公园土壤中含有较多的产脲酶的微生物，A正确；为了筛选可分解尿素的细菌，配制的培养基应选择尿素作为唯一氮源，能合成脲酶的微生物在该培养基上能生长，B正确；当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的

一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，C正确；在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，氨会使培养基的pH升高，酚红指示剂将变红，因此在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，能对分离的菌种做进一步鉴定，D错误。]12．B[为了保证结果准确，一般选取同一稀释度下、菌落数

在30～300的平板进行计数，B错误。]13．(1)①有以核膜为界限的细胞核②体积分数为70%的酒精③果醋防止发酵液被空气中的杂菌污染(2)乳酸菌解析(1)①酵母菌是真菌，属于真核生物，有真正的细胞核；醋酸菌是原核生物，

无核膜。③制作果醋时应将开关2打开通入空气，因为醋酸菌是好氧细菌。14．(1)抑制细菌的生长(2)摇床转速越高，提供的氧气越充足，酵母菌代谢越旺盛、增殖越快(3)乙①②③④(4)灼烧冷却5.5×107(5)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一

个活菌，通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约有多少活菌15．(1)纤维素选择(2)为了杀死培养基中的所有微生物(微生物和芽孢、孢子)不接种培养(或空白培养)(3)将大熊猫新鲜粪便样液稀释适当倍数后

，取0.1mL涂布到若干个平板(每个稀释度至少涂布三个平板)，对菌落数在30～300的平板进行计数，则可根据公式推测大熊猫新鲜粪便中纤维素分解菌活菌数(4)C接种C菌株后秸秆失重最多，纤维素降解率最大解析(1)在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其

他微生物则不能生长。为筛选纤维素分解菌，将大熊猫新鲜粪便样品稀释液接种至以纤维素为唯一碳源的固体培养基上进行培养；培养基从功能上分类可分为选择培养基和鉴别培养基，故该培养基从功能上分类属于选择培养基。(2)为检测灭菌效果可对培养基进行空白培养，即将未接种的培养基在适宜条件下培养一段时间，若在适宜

条件下培养基中无菌落出现，说明培养基灭菌彻底，否则说明培养基灭菌不彻底。(4)测定酶活力时可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。由表格可知，在相同的温度和时间下，C菌株使秸秆失重最多，纤维

素降解率最大，说明该菌株产生的纤维素酶活力最大。第2章细胞工程第1节植物细胞工程第1课时植物细胞工程的基本技术1．D[玉米种子萌发长成新植株属于自然生长过程，不能体现细胞的全能性，A错误；植物体的体细胞和生殖细胞都具有发育成完整个体所必需

的全部基因，B错误；用花粉培育成植株，可体现花粉细胞具有全能性，C错误。]2．D[花瓣细胞属于植物的体细胞，因其细胞中具有个体发育所需要的全套遗传物质，所以花瓣细胞具有全能性，A、B正确；在生物的生长发育过程中，并不是所有的细胞都能表现出全能性，而是分化为各种组织和器官

，由花瓣培育出完整植株，其前提是花瓣必须离体培养，且处于适宜的培养条件下，在培养过程中涉及细胞分裂和细胞分化，C正确，D错误。]3．B[愈伤组织细胞为未分化的薄壁细胞，B错误。]4．D[接种时用镊子夹取菊花茎段，将其1/3～1/2插入培养基中，注意形态学上端朝上，D错误。

]5．B[甲表示脱分化过程，乙表示再分化过程，两过程中生长素和细胞分裂素含量的比值不同，B错误；同一植株不同部位的细胞经培养获得的愈伤组织细胞核基因数目不一定相同，如花粉细胞经培养形成的愈伤组织细胞的核基因数目只有体细胞的一半，C正确。]6．C[植物体细胞杂交技术可打破生殖隔离，实现不同生物间的

远缘杂交育种，故通常不需要考虑亲本间存在的生殖隔离，C符合题意。]7．D[①为去除细胞壁的过程，植物体细胞杂交的实质是植物原生质体的融合，所以在融合前需要使用酶解法(纤维素酶和果胶酶)去除植物的细胞壁，获得植物的原生质体，为了获得植物的原生质体，操作一般在等渗溶

液或略大于细胞液浓度的溶液中进行，维持去除细胞壁的原生质体的形态，A正确；利用聚乙二醇、高Ca2＋—高pH融合法等化学方法可诱导原生质体a、b融合，B正确；融合后的杂种细胞再生出新的细胞壁是原生质体融合完成的标志，故可利用质壁分离现象鉴别细胞壁是否再生，C正确；图中①至⑤过程表示植物体细胞杂交

，涉及细胞的分裂和分化，但不涉及有性生殖过程的减数分裂，D错误。]8．C[基因影响性状，通过植物体细胞杂交技术获得“番茄—马铃薯”杂种植株，但这种植株并没有发育成地上结番茄、地下长马铃薯的理想植株，原

因可能是两种生物的基因直接或间接相互作用，导致基因不能有序表达，C符合题意。]9．B[①是利用纤维素酶和果胶酶获取原生质体的过程，该过程需要在等渗溶液或略大于细胞液浓度的溶液中进行，以维持原生质体的形态和功能，A错

误；②到③的过程是融合细胞再生出细胞壁的过程，而高尔基体与植物细胞壁的形成有关，线粒体可为该过程提供能量，故杂种细胞内高尔基体和线粒体活动明显增强，B正确；④是筛选获得的具有耐盐特性的胚状体，但不能确定其是高产还是低产，故需要进一步筛选，C错误；甲、乙是二倍体植株，通过植物体细胞

杂交技术获得的目的植株是四倍体，理论上是可育的，D错误。]10．C[根据表格信息可知，WOX5能维持细胞未分化状态，若WOX5失活后，中层细胞会丧失干细胞分裂能力强、分化程度低的特性，A合理；生长素的生理作用大于细胞分裂素时有利于根的再

生，再结合表格信息，WOX5＋PLT可诱导出根，可推测WOX5＋PLT可能有利于愈伤组织中生长素的积累，B合理；生长素的生理作用小于细胞分裂素时有利于芽的再生，而抑制ARR5能诱导出芽，故可推测ARR

5抑制细胞分裂素的积累或降低细胞对细胞分裂素的敏感性，C不合理；由题干信息可知，出芽或出根都是生长素与细胞分裂素含量不均衡时才会发生，故可推测体细胞中生长素和细胞分裂素的作用可能相互抑制，D合理。]11．B[炼苗前期应和

培养时的环境条件相似；炼苗后期则要与外界环境中的栽培条件相似，从而达到逐步适应外界环境的目的，A正确；组织培养期间需要无菌操作，开盖炼苗期间不需要无菌的环境，应和外界环境中栽培条件相似，且长成幼苗后应照光，使幼苗进行光合作用，B错误；分析题图可知，闭盖炼苗6d后，再开盖炼苗2d，组培苗的移栽

存活率最高，是白兰地红枫组培苗的最佳炼苗方式，C正确；分析题图可知，在相同开盖炼苗天数下，白兰地红枫组培苗的移栽存活率随着闭盖炼苗时间的增加先升高后降低，D正确。]12．B[植物体细胞杂交完成的标志是形成杂种植株，C错误；④过程是脱分化，该过程需要避光处理

，D错误。]13．(1)无机物生长素(2)植物细胞的全能性有丝分裂分化(3)培养基芽发育成叶，叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件(4)选择性表达解析植物组织培养是用离体的植物组织、器官或细胞接种到经灭菌的培养基中，

培养基含有供组织细胞生长发育所需要的无机物和小分子有机物，还有调节细胞脱分化和再分化的细胞分裂素和生长素。由外植体发育成试管苗，脱分化阶段细胞进行有丝分裂，再分化阶段愈伤组织细胞经有丝分裂和细胞分化形成试管苗，此

阶段需要光照，原因是叶肉细胞中叶绿素的合成需要光照条件。14．(1)纤维素酶和果胶酶物理法和化学法使中间偃麦草的染色体断裂杂种细胞再生出细胞壁(2)植物组织培养(3)1、2、4它们同时具有普通小麦和中间偃麦草的DNA片段高盐第2课时植物细胞工程的应用1．A

[水稻种子萌发并长成新个体、柳树芽发育成枝条均属于个体发育部分；扦插的葡萄枝长成新个体属于无性繁殖中的营养繁殖。]2．C[芽尖组织分生能力旺盛，几乎不含病毒，可以通过芽尖组织培养获得脱毒苗。]3．B[带叶原基的芽病毒很少

，甚至无病毒，故与植物体其他组织中的病毒含量不同，A错误；过程③④所用培养基中生长素和细胞分裂素的含量和比例不同，C错误；题图中脱毒苗的培育过程采用了植物组织培养技术，其体现了植物细胞的全能性，遗传物质不会改变，D错误。]4．B[植株

B是经单倍体育种获得的纯合子，与植株A的基因型不同，B错误。]5．A[在植物组织培养过程中，细胞一直处于不断增殖的状态，即细胞的分裂能力很强，细胞在分裂过程中，容易受到培养条件和诱变因素(如射线、化学物质等)的影响而发生突变。]6．B[②表示人工诱变过程，但基因突变是不

定向的，B错误。]7．C[紫草宁是紫草细胞培养过程中产生的次生代谢物，不是紫草细胞生长和生存所必需的，A错误；愈伤组织分化程度很低，B错误；愈伤组织的诱导受植物激素配比的影响，也受营养物质和光照等因素的影响，D错误。]8．D[由题意“取紫草植株部分组织诱导形成紫草愈伤组织，再转

入紫草宁形成培养基”可知，工业化生产过程包括细胞的脱分化，A正确；紫草的愈伤组织细胞有细胞壁，在低渗溶液中不会涨破，C正确；根据题意可知，需要将细胞破碎后提取出紫草宁，因此紫草宁在细胞内合成后不能分泌到细胞外，D错误。]9．D[顶端

分生组织几乎不含病毒，因此过程A中取顶芽细胞进行体细胞杂交有利于获得脱毒苗，A正确；过程A可使用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体，过程B可使用PEG(聚乙二醇)诱导原生质体融合，B正确；过程C中只有融合细胞活性部

位互补，具有完整的细胞结构，才正常生长，然后将获得的杂种细胞进行植物组织培养获得杂种植株，C正确；操作过程中生物材料、培养环境都要严格地消毒，而培养基需要经过高压蒸汽灭菌，D错误。]10．A[图中愈伤组织和高产细胞系的获得没有体现植物细胞的全能性，A错误。]

11．A[植物顶端分生区附近(如茎尖)的病毒极少，甚至无病毒，切取一定大小的茎尖进行植物组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，因此培育脱毒苗所依据的原理是植物细胞的全能性，没有基因突变，A错误；培育脱毒苗的技术是植物组织培养，涉及脱分化和再分化两个阶段，B正确；由题图可知，在

茎尖外植体大小为0.27mm时，幼苗的脱毒率和成苗率均处于较高水平，因此培养脱毒苗时茎尖的适宜大小为0.27mm，D正确。]12．D[细胞产物的工厂化生产主要是利用植物细胞培养技术，通过促进细胞增殖，

获得高产细胞系，A错误；茎尖的病毒极少，甚至无病毒，因此，切取一定大小的茎尖进行组织培养，再生的植株就有可能不带病毒，从而获得脱毒苗，B错误；利用花药离体培养可获得玉米幼苗的单倍体，再经过诱导染色体数目加倍后

，从中选择出具有优良性状的个体，这样能够极大地缩短育种年限，C错误。]13．(1)茎尖该部位病毒极少，甚至无病毒(2)特有的结构和功能再分化植物激素(或植物生长调节剂)(3)秋水仙素聚乙二醇(PEG)(4)愈伤组织突变体的利用(或诱变育种)1

4．(1)花药离体培养不一定存在体细胞中染色体组的多少(2)高度不育低温诱导其染色体数目加倍秋水仙素处理幼苗(3)体细胞中含有三个染色体组，减数分裂时联会紊乱，不能形成正常的配子(4)由于没有同源染色体，染色体上无论是显性基因还是隐性基因都可以得到表达解析(1)单

倍体育种是利用花药离体培养技术获得单倍体植株，再诱导其染色体加倍，从而获得所需要的纯系植株的育种方法。蔬菜单倍体可通过花药离体培养途径获得，经诱导获得的单倍体中不一定存在等位基因，这与体细胞中染色体组的多少有关，如AAaa个体获得的单倍体可

能含有等位基因Aa。(4)许多蔬菜的单倍体只有一个染色体组，没有同源染色体，染色体上无论是显性基因还是隐性基因都可以得到表达，因此在诱变育种中易筛选出突变性状。第2节动物细胞工程第1课时动物细胞培养1．D[动物细胞培养需要一定的气体环境，95%的空气和5%的CO2。]2．B[

为了防止培养过程中杂菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素，B错误。]3．C[植物组织培养不需要用含O2和CO2的混合气体的培养箱，A错误；植物组织培养的培养基为固体培养基，B错误；动物细胞培养的原理是细胞增殖，

不能体现细胞的全能性，D错误。]4．D[动物细胞培养的过程：首先用胰蛋白酶等处理动物组织并制成细胞悬液，然后进行原代培养和传代培养。]5．D6．D[丁过程是传代培养，该过程少数细胞遗传物质发生了改变而失去贴壁黏附性，朝着癌细胞方向发展，D错误。]7．

D8．B[诱导iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，B错误。]9．C[对照组和实验组均设置了三个孔，符合平行重复原则，最终求每个组的平均值，可以减少实验误差，降低偶然因素对实验结果的影响，A正确；用胰蛋白酶

处理可以使肝癌细胞间的蛋白质被分解，破坏细胞间的连接，可以获得游离的肝癌细胞并进行计数，B正确；根据单一变量原则可知，对照组中加入的溶液是和实验组等体积、相同浓度的无菌二甲基亚砜，以排除溶剂对实验结果的干扰，C错误；根据实验结果可知，最终细胞的数量：对照组＞药物Y实验组＞药

物X实验组，说明加入药物X的实验组存活的癌细胞数是最少的，即可以初步判断药物X的抗癌效果较好，D正确。]10．C[用该技术得到的新生器官替换供体病变器官，属于自体移植，理论上可以不发生免疫排斥反应，可以大大提高器官移植的成功率，B正确；iPS细胞

具有与干细胞相似的分化潜力，说明iPS细胞分化程度低，不易衰老，C错误；与ES细胞相比，iPS细胞的诱导过程无须破坏胚胎，因而用于再生医学可以回避伦理争议，D正确。]11．A[分析图中曲线可知，对癌细胞来说，相同培养时间内，培养基中有无血清，其细胞数目相差不大，说明培养

基中有无血清对癌细胞的培养影响不大；对正常细胞来说，在相同的培养时间内，有血清的培养基中培养的细胞数目远远多于没有血清的培养基中培养的细胞数目，说明有无血清对正常细胞的培养影响较大；在相同条件和相同的培养时间内，癌细胞和正常细胞的数目

差距较大，增殖速率不相同，正常细胞达到一定的数目后不再增加，而癌细胞却能不断增加。]12．C[脐带血中含有大量未成熟的造血干细胞，将脐带血细胞移植，对白血病、再生障碍性贫血等恶性血液病的治疗具有很好的效果；而

用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治疗，只要诱导细胞分化成需要的组织或器官即可，不需要激发其全能性；用干细胞培育出的器官移植属于自体移植，基本不会发生免疫排斥反应，不需要给他使用免疫抑制药物。]13．(1)合成维持培养液的pH无菌无毒(2)接触抑制(3)是否加入抗癌药物单一变量解析(1)动物细胞

培养所需的气体中有CO2，CO2的作用是维持培养液的pH。被培养的细胞必须处于无菌、无毒的环境中，才能保证细胞正常地生长增殖。(3)本实验的目的是要测定抗癌药物对体外培养细胞增殖的影响，故实验的自变量为抗癌药物的有无，其他无关变

量应该相同且适宜，否则会干扰实验结果，这种设计遵循的是实验的单一变量原则。14．(1)原代培养(2)早期胚胎任何一种类型所有组织和器官个体(3)补充细胞所需的未知的营养物质(4)破坏胚胎免疫排斥反应第2课时动物细胞融合技术与单克隆抗体1．B[植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性、植物细胞的全

能性，动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性；动物细胞融合常用的方法有PEG融合法、灭活病毒诱导法、电融合法等，其中灭活病毒诱导法是其特有的诱导方法，而PEG融合法、电融合法也可用于诱导植物体细胞杂交。]2．C[动物细

胞融合与植物原生质体融合的原理都是细胞膜的流动性，C错误。]3．B[若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去除细胞壁再诱导融合，A错误；c细胞的形成体现了细胞膜具有流动性，与a、b细胞的全能性无关，C错误；c细胞将选择性地表达a细胞和b细胞中的基因，D错误。]4．D[向小鼠体内注射特定的抗原，可以从

小鼠血清中获得抗体，但此时的抗体不是单克隆抗体，A错误；经特定抗原免疫过的B淋巴细胞在体外无增殖能力，无法通过培养获得单克隆抗体，B错误；培养杂交瘤细胞可以采用体内培养法和体外培养法，其中体内培养法不需要提供动物血清，C错误。]5．C[Flag-Tag抗原的化学本质为蛋白质，消

化道内含有的多种蛋白酶会将其消化分解，不可以直接口服，A错误；小鼠的B淋巴细胞一般在小鼠脾脏中提取，B错误；过程③融合得到的细胞C，若为两个B淋巴细胞融合的细胞，则不具有无限增殖的能力，C正确；以上过程运用了动物细胞融合技术和动物细胞培养

技术，D错误。]6．C[选择培养基只能让特定的符合条件的细胞存活下来，在题目给定的选择培养基上，只有杂交瘤细胞才能够存活，C错误。]7．B[用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间，将脾脏组织分散成单个细胞获得单细胞悬液，B错误。]8．D[

该单克隆抗体不能杀伤肿瘤细胞，而是与药物结合，将药物带到特定部位，利用药物杀伤肿瘤细胞，D错误。]9．D[根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时与2种抗原结合，A正确；根据抗原与抗体能够发生特异

性结合的特性，利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用，B正确；由于双抗是在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成的，因此，筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原—抗体检测，从而实现对双抗的筛选，C

正确；同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的浆细胞，而不是分化成产双抗的浆细胞，D错误。]10．A[将抗原A注入小白兔体内的目的是刺激小白兔发生体液免疫，从而获得已免疫的B淋巴细胞，A错误；在第五次中，小白兔Y的效价最大，所以最适合用于制备B淋巴细胞的是第五次免疫

后的小白兔Y，B正确；骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合常使用灭活的病毒进行促融，也可用物理或化学的方法进行促融，C正确；杂交细胞需要经过多次筛选才可获得只分泌抗A抗体的杂交瘤细胞，第一次筛选可获得杂交瘤细胞，第二次筛选可获得只分泌抗A抗体的杂交瘤细胞，D正确。]11．B[

药物美坦新并不具有识别作用，单克隆抗体才具有识别作用，B错误。]12．B[免疫的B淋巴细胞及其相互融合的细胞是正常细胞，细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，但因高度分化而不能增殖，A错误；骨髓瘤细胞及其相互融合的细胞因骨髓瘤细胞中缺乏转化酶，无法进行补救合成途径，

而在HAT培养基上不能增殖，B正确；杂交瘤细胞因为可以进行补救合成途径，所以能在HAT培养基上大量增殖，C错误；HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞能大量增殖，但并不都能产生高纯度的目标抗体，需要进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，D错误。]13．(1)动物细胞融合动物细

胞培养(2)肿瘤坏死因子­α(TNF­α)克隆化每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体(3)能准确地识别抗原的细微差异，可以与特定抗原发生特异性结合，可以大量制备14．(1)人的乳腺癌细胞(2)PEG(3)既能大量增殖，又能产生特定抗体体外(4)单克隆抗体治疗乳腺癌的

药物(5)①单克隆抗体特异性的抗原—抗体②水解细胞核第3课时动物体细胞核移植技术和克隆动物1．D[通过体细胞核移植方法生产的重构胚中，核遗传物质是供体细胞提供的，但细胞质是卵母细胞和供体细胞共同提供的，所以不是对供核动物进行了1

00%的复制。]2．C[胚胎干细胞分化程度低，表现全能性相对容易，因此其进行核移植更容易成功。]3．D[克隆动物的细胞核中遗传物质来自供体细胞核，细胞质中的遗传物质主要来自MⅡ期卵母细胞，因此卵母细胞对克隆

动物的性状也会产生影响，D错误。]4．D[动物体细胞表现全能性的难易程度与其分化程度有关，分化程度越低，表现全能性越容易，D错误。]5．B[核移植获得克隆动物的生殖方式是无性生殖，生出小羊的遗传物质由

甲、乙双亲共同决定，主要性状与甲羊相同，核基因型一般与甲羊完全相同，B正确。]6．D[利用体细胞核移植技术，只能增加动物的个体数量，不能提高遗传多样性，①错误；核移植技术不能提高良种家畜自然繁殖率，自然繁殖率是由生物的基因决定的，并受环境的影响，②错误。]7．B[尽管通过体细胞

核移植技术已经获得多种克隆动物，但体细胞核移植技术的成功率仍然非常低，各个技术环节也有待进一步改进，B错误。]8．C[高度分化的动物细胞的全能性受到限制，所以不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体，A错误；克隆技术并没有完全成熟，绝大多数克隆动物还存在一些

遗传和生理缺陷类的健康问题，B错误；细胞核移植过程中通常采用MⅡ期的卵母细胞作为受体细胞，D错误。]9．C[供体细胞注入卵母细胞透明带内后，需要电融合法诱导才能使供体细胞进入卵母细胞形成重构胚，A错误；体细胞克隆猴“中中”和

“华华”的形成属于无性生殖，B错误；用微型注射针将供体细胞的细胞核吸出可能会破坏细胞核，而透明带下注射法是直接将供体细胞注入去核卵母细胞透明带内，对供体细胞核和卵母细胞的损伤更小，C正确；“中中”和“华华”是由透明带下注射法形成的，核DNA均来自

供体细胞，但质DNA来自去核卵母细胞和供体细胞，D错误。]10．D[体细胞核移植过程中，用物理或化学方法(如电刺激、Ca2＋载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，D错误。]11．D[紫外线可以破坏细胞核，A正确；胚胎细胞分化程度低，表

现全能性相对容易，因此胚胎细胞核移植会比皮肤细胞核移植的成功率高，B正确；动物细胞培养是动物细胞工程的基础，C正确；生物体性状的遗传由细胞核和细胞质中的遗传物质共同控制，同时还受环境的影响，D错误。]12．B[此项技术用

的是受精卵的细胞核，而克隆羊“多莉”用的是高度分化的体细胞的细胞核，分化程度不同，B错误；该婴儿细胞的核基因由形成受精卵的夫妇提供，细胞质基因由提供去核的卵母细胞的妇女提供，D正确。]13．(1)代孕(2)体

细胞核移植更高动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难(3)胰蛋白酶或胶原蛋白MⅡ(4)动物已分化的体细胞的细胞核具有全能性解析代孕动物只是为通过核移植技术得到的胚胎的发育提供营养物质和发育场所，因此克隆猴的性状与代孕动物的性状无遗传关系。14．(1)显微操作核遗传物质全部来自供体细胞核激发

细胞核全能性表达(2)使其完成细胞分裂和发育进程(3)早期胚胎细胞第3节胚胎工程第1课时胚胎工程的理论基础1．D2．C[动物排出的卵子成熟程度不同，但都要在输卵管内进一步成熟，才具备与精子受精的能力，A错误；卵子形成过程中，减

数分裂Ⅰ是在排卵前后完成的，减数分裂Ⅱ是在受精过程中完成的，二者不连续，B错误；精子必须穿过透明带才可以与卵细胞膜接触，D错误。]3．C[卵裂期细胞不断分裂，而胚胎总体积并不增加，每个细胞体积减小，A、B错误；卵裂期的细胞进行有丝

分裂，细胞数目在增加，但每个细胞的DNA含量不变，胚胎中DNA的总量增加，C正确；卵裂需要消耗能量，有机物总量不断减少，但有机物种类增加，D错误。]4．A[桑葚胚以前的细胞还没有分化，每个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能。]5．D[受精卵的细胞质DNA几乎

全部来自卵细胞，而细胞核DNA一半来自精子，一半来自卵细胞，故来自精子的DNA不到一半，A错误；a、b分别是囊胚和原肠胚时期，B错误；④过程表示囊胚发育为原肠胚，该时期发生了细胞分化，C错误；a时期为囊胚，囊胚期可分离获得内细胞团细胞，D正确。]6．D[图示时期为囊胚期，其中①为透

明带；②为滋养层，将来发育成胎盘和胎膜；③为内细胞团，将来发育成胎儿的各种组织，D错误。]7．B[在卵细胞膜和透明带之间观察到两个极体，说明卵细胞已经完成了受精，这是判断卵细胞是否受精的重要标志，不是判断受精卵开始发育的标志，A错误；囊胚内部会出现一个含有液体的囊胚腔，B正确；孵化是指

囊胚从透明带出来，孵化后进入原肠胚阶段，C错误；细胞分化开始于囊胚时期，D错误。]8．B[①为受精过程，该过程需要依赖细胞表面糖蛋白的识别，精子会释放出水解酶，A正确；②为卵裂过程，该过程通过有丝分裂方式增殖，细胞卵裂过程中，单个细胞体积减小，因此核质比增大，B错误；③过程除了存在细胞的

分裂，还存在细胞的分化，才能形成囊胚，C正确；囊胚进一步扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化，故囊胚在④过程中需发生孵化，才能继续发育为原肠胚，D正确。]9．D[防止多精入卵受精有两道屏障，第一道屏障是透明带的反应，第二道屏障是卵细胞膜的反应，D错误。]10．C

[结合分析可知，该实验只研究了添加不同浓度FBS对牛核移植胚胎发育的影响，从表中数据无法得出桑葚胚率小于囊胚率的结论，A错误；表中信息显示，添加20%FBS的实验组2，其卵裂率和囊胚率都高于对照组和其他实验组，说明添加20%FBS对促进牛核移植胚胎发育有较好的作用，但不能据此确

定该浓度即为最适浓度，应在该浓度两侧缩小浓度范围继续进行实验，B错误；通常将胚胎置于含95%空气和5%CO2的培养箱中进行培养，C正确；表中信息显示，各实验组的卵裂率均高于对照组，说明添加不同浓度的F

BS对卵裂率均有促进作用，实验组1、2的囊胚率高于对照组，实验组3的囊胚率低于对照组，说明在一定浓度范围内，添加的FBS对囊胚率有促进作用，但超过该浓度范围却起抑制作用，D错误。]11．C[桑葚胚的各细胞结构、功能基本相同，是全能

细胞；囊胚期细胞分化是基因选择性表达的结果；内细胞团和滋养层细胞内遗传物质相同，形态和功能不同，这与转录有关。]12．C[卵母细胞只有在受精后才能完成减数分裂，所以需要用精子刺激卵母细胞，然后移除雄原核再进行培养，C错误。]13．(1)雄原核雌原核(2

)精子穿过透明带精子进入卵细胞膜雌、雄原核融合(3)精子获能输卵管MⅡ期(4)透明带反应和卵细胞膜反应14．(1)减数分裂互换(2)C胚胎早期发育(3)囊胚内细胞团胎儿的各种组织滋养层第2课时胚胎工程技术及其应用1．D

[人工授精是人工将获能的精子放入雌性动物的输卵管中以辅助受精，该过程不是体外受精，D错误。]2．D[根据题意可知，试管动物技术仍然属于通过有性生殖繁育后代的技术，因为操作过程中仍然有两性生殖细胞的结合过程，只不过是通过人工体外操作，获得胚胎，然后再移植到生物体内发育成新个体。早期胚胎经移

植后的过程在体内进行，故选D。]3．D[代孕母体仅为植入的胚胎提供营养物质及适宜的发育环境，一般不会影响其遗传特性，D错误。]4．D[对牛进行胚胎移植时，供体公牛、母牛必须是同一物种的良种，这样才能获得良种的胚胎，但受体母牛只是提供胚胎发育的一个正常环境，可以只是同物种的一般健康牛，D错误。]5

．D[超数排卵处理需要注射促性腺激素，目的是获得更多的卵母细胞，A错误；过程③为胚胎收集，前提是早期胚胎处于游离状态，没有与子宫建立组织上的联系，B错误；过程④中可移植的胚胎应发育到桑葚胚或囊胚阶段，C错误。]6．C[过程③是从子宫或输卵管中冲取胚胎，C错误。]7．B[因为内细

胞团将来发育为胎儿的各种组织，因此在分割时一定要注意将其均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。]8．C[在分割囊胚阶段的胚胎时，要注意将内细胞团均等分割，对于不同发育阶段的胚胎，分割的具体操作不完全相同，C错误。]9．D[体外受精时，需用促性腺激素

处理使妇女超数排卵，A错误；囊胚阶段细胞逐渐分化，B错误；根据题图可知，移植卵裂期胚胎流产率高于移植囊胚，故卵裂期胚胎移植成功率低，C错误。]10．B[结果显示分割囊胚时，在TCM－199培养液中分割效果优于

其他两种培养液，B错误。]11．B[步骤甲、乙分别指体外受精、胚胎移植，A错误；诱导超数排卵所注射的激素是促性腺激素，只能作用于性腺，B正确；受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来自卵细胞，C错误；受精过程使用的培养液是获能溶液或专用的受精溶液，与早期胚胎培养液

成分不同，D错误。]12．C[在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，应注意要将内细胞团均等分割，以免影响胚胎的恢复和进一步发育，A错误；胚胎冷冻后分割，更有利于提高半胚存活率，而冷冻后分割与分割后冷冻的分割成功率相比几乎无差别，B错误；胚胎分割属于无性繁殖或克隆，但是由于环境条件不同或生物产生

变异，生物性状不一定完全相同，D错误。]13．(1)动物细胞培养、胚胎移植(2)促性腺雌性或雄性(3)动物体细胞核具有全能性无性繁殖解析(2)用促性腺激素促进B牛多排卵，E牛是有性生殖产生的，且未经胚胎性别筛选，因此其性别为雌性或雄性。(3)F牛产生的过程是克隆的过程，利用的原理是动物体细胞核具有

全能性，繁殖方式为无性繁殖。14．(1)加入抗冻剂(甘油)冷冻保存刚排出的精子必须在雌性生殖道内发生相应生理变化后才能受精肝素(或钙离子载体)MⅡ期(2)维生素、氨基酸、核苷酸(3)对受体母羊进行同期发情处理，将保存的囊胚进行胚胎移植，对受体母羊进行是否妊娠的检查，一段时间后受体母羊产下具

有该公羊优良性状的后代解析(1)精液可以加入抗冻剂(甘油)冷冻保存，使用前再将精液解冻离心分离。刚排出的精子必须在雌性生殖道内发生相应生理变化后才能受精，故在体外受精前要对精子进行获能处理。通常采用的体外获能方法有培养法和化学诱导法，化学诱导法是将精子放在一定浓度的肝素

或钙离子载体溶液中，用化学药物诱导精子获能。卵母细胞需要培养到减数分裂Ⅱ中期(MⅡ期)才能具备与精子受精的能力。(2)进行早期胚胎培养的培养液中，除了无机盐、激素、血清外，还含有维生素、氨基酸、核苷酸

等。(3)要利用保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受体母羊为材料，获得具有该公羊优良性状的后代，主要是利用胚胎移植技术，即对受体母羊进行同期发情处理，将保存的囊胚进行胚胎移植，对受体母羊进行是否妊娠的检查，一段时间后受体母羊产下具有

该公羊优良性状的后代。重点突破练(二)1．D[利用植物细胞培养技术实现细胞产物工厂化生产，只是将外植体脱分化到愈伤组织阶段，不能体现植物细胞的全能性，D符合题意。]2．C[将菊花茎段插入时应注意方向，不要倒插，是为了使生长素能够进行极性运输，

保证成活率，A错误；植物组织培养时在培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压，B错误；长出丛芽和生根的过程是细胞分化的结果，菊花组织细胞的遗传物质没有发生改变，D错误。]3．A[花粉粒细胞培育成单倍体植

株，培育的原理是花粉粒细胞具有全能性，其技术是植物组织培养，A正确；过程③是细胞再分化，其根本原因是基因的选择性表达，诱导丛芽产生时应适当降低生长素/细胞分裂素的比例，B错误；图中四种培养基都是固体培养基，它们的差异主要表现在植物激

素的种类和含量，光照条件有时也可能不相同，C错误；观察处于有丝分裂中期的四季柑橘花粉植株根尖细胞，可观察到9条染色体，D错误。]4．B[该实验没有进行有无6－BA的对照实验，不能证明6－BA对菊花茎尖外植体再生丛芽没有影响，A错误；1号培养基中没有生长素，不利于试管苗生根，2号培养基中再生丛芽外植

体的比率及其上的丛芽平均数均最高，说明利于形成丛芽，B正确；茎尖形成丛苗而不是单株苗，是由培养基中激素种类及其比例调控的，C错误；实验的自变量是激素的种类和比例，因变量是丛芽的数量和再生丛芽外植体的比率，D错误。]5．C[驱蚊草是

通过天竺葵体细胞和香茅草体细胞杂交而得到的，在此技术中仍需要利用植物组织培养技术，有愈伤组织和试管苗的形成，C错误。]6．C[用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物组织，可以使组织分散成单个细胞，A错误；动物细胞培养的气体环境：95%空气和5%CO2，CO2的作用主要

是维持培养液的pH，B错误；理论上来说，仅来自1只动物的干细胞可制成的肉品数量，比宰杀1头牛多得多，有利于牛肉的工厂化生产，同时也可减少对土地、饮用水和饲料的利用，且温室气体等其他环境污染物也会减少，D错误。]7．D[干细胞是一种未充分分化、尚不成熟的

细胞，具有再生成各种组织和器官的潜能，因此该项技术可用于器官的再生研究，A正确；由图可知，诱导多能干细胞(iPS细胞)能分化成多种细胞，说明其分化程度较低，具有分裂和分化的能力，B正确；细胞分化的实质是基因的选择性表达，故诱导多能干细胞分化成表皮细胞是基因选择性表达的结果，C正确；诱导多

能干细胞无须破坏胚胎，应用前景优于胚胎干细胞，D错误。]8．D[过程①要多次注射抗原，其目的是刺激小鼠产生更多的已免疫的B淋巴细胞，A错误；③为选择培养基，经筛选获得的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，还需要进行抗体检测和克隆化培养，B错误；诱导动物细胞融合可以使用PEG融合法、电

融合法和灭活病毒诱导法等，C错误；双特异性抗体中的癌胚抗原抗体能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞，D正确。]9．B[重构胚需用电刺激、乙醇等方法激活，使其完成细胞分裂和发育进程，B错误；受体(代孕猴d)对外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应，为胚胎的继续发育提供了可能，

C正确；猴与人在进化上亲缘关系很近，因此与鼠相比，克隆猴更适合作为人类疾病和进行药物实验的模型动物，D正确。]10．D[经小鼠腹腔内培养后，可从小鼠腹水中分离得到大量单克隆抗体，D错误。]11．C[精子接触卵细胞膜的

瞬间，透明带发生生理反应阻止多精入卵，A错误；胚胎移植时，选取遗传性状优良、生产能力强的母畜作为供体，有健康的体质和正常繁殖能力的母畜作为受体，B错误；桑葚胚或囊胚分割后得到的胚胎可以直接移植给受体，或经体外培养后，再移植给受体，C正确

；受体母牛对植入胚胎一般不发生免疫排斥反应，不需要免疫抑制剂处理，D错误。]12．A[核移植时，卵细胞的细胞质具有调控细胞核发育的作用，这是克隆成功的部分原因，A正确；代孕受体在胚胎移植前需要经过同期发情处理，以便早期胚胎成功植入或着床，B错误；虽然熊猫乙、熊猫丙由同一受精卵发育而来，遗传物质

(基因型)相同，但环境因素对其表型也有一定的影响，故二者表型不一定完全一致，D错误。]13．(1)植物体细胞杂交纤维素酶和果胶酶高尔基体植物细胞的全能性(2)3融合的细胞表面既有红色荧光又有绿色荧光用适宜浓度的秋水仙素处理萌发的番茄种子或幼苗(3)

8单14．(1)(特定)杂交瘤克隆化培养抗体检测(2)靶点清楚、毒副作用小(3)抗体一定的流动性(4)同位素或荧光标记15．(1)胚胎移植(2)促性腺激素MⅡ(3)获能(4)桑葚胚或囊胚(5)有性生殖无性生殖第3章基因工程第1节重组DNA技

术的基本工具1．B[由题意可知，该技术为基因工程，是在生物体外进行的操作。]2．D[题干表述的是目的基因导入受体细胞并得以表达的过程，目的基因在不同生物细胞中能够表达出相同的蛋白质，说明控制其合成的mRNA上的密码子是共用的，相同的密码子决定相同的氨基酸，A正确；基因通过转

录获得mRNA，进而控制蛋白质的合成，B正确；基因通常是有遗传效应的DNA片段，只要是双链DNA都遵循碱基互补配对原则，其组成原料都是四种脱氧核苷酸，C正确；生物之间是否有共同的原始祖先与转基因技术之间没有必然关系，D错误。]3．D[限制酶可以切断脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，即a处，

A正确；DNA聚合酶可以连接脱氧核苷酸形成磷酸二酯键，即a处，B正确；解旋酶可以使氢键断裂，即b处，C正确；DNA连接酶可以连接DNA片段形成磷酸二酯键，即a处，D错误。]4．B[DNA连接酶连接的是两个DNA片

段，A错误；限制酶只能切割DNA分子，烟草花叶病毒的核酸是RNA，不能切割，B正确；E.coliDNA连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末端，C错误；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是不会剪切自身的DNA，D错误。]5．D6．

C[切割甲的限制酶的识别序列是－GAATTC－，切割乙的限制酶的识别序列是－CAATTG－，所以甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的，B正确；甲、乙片段形成的重组DNA分子的序列是－CAATTC－，而切割甲的限制酶的识别序列是－GAATTC－，所以该限制酶不能识别由甲、乙片段形成的重组

DNA分子，C错误。]7．D[质粒上的基因表达遵循中心法则，A错误；标记基因是用于重组质粒的筛选和鉴定，与目的基因的表达无关，B错误；质粒上的抗生素抗性基因可作为标记基因，用于重组质粒的筛选和鉴定，C错误。]8．B[基因工程中常用的载体是质粒，此外还有噬菌体、动植物病毒等，A错误；噬菌体

是专门寄生在细菌体内的病毒，不可以作为动物基因工程的载体，C错误；天然质粒往往不能直接作为载体，要根据不同的目的和需求进行人工改造，D错误。]9．B[BamHⅠ与AluⅠ切割的均是磷酸二酯键，A错误；BamHⅠ切割，Sau3AⅠ切割，故二者切割后产生的黏性末端是相同的，因此

二者切割后产生的黏性末端能够相连，连接后能被Sau3AⅠ切割，B正确；②⑤的黏性末端相同，②④的黏性末端也相同，因此DNA连接酶能连接②⑤，也能连接②④，C错误；E.coliDNA连接酶是从大肠杆菌中获得的DNA连接酶，只能连接黏性

末端，T4DNA连接酶既可以连接黏性末端也可以连接平末端，而图中①③属于平末端，只能用T4DNA连接酶连接，D错误。]10．C[限制酶作用的化学键都是磷酸二酯键，A正确；由图可以看出a酶和b酶切割后产生的黏性末端相同，它们之间能相互连接，B正确；由表格中可以看出，a酶可以把原有DNA切成4段，说

明该DNA分子上有3个切口，即a酶的切割位点有3个；b酶把大小是2100bp的DNA切成大小分别为1900bp和200bp两个片段，再把大小是1400bp的DNA切成大小分别为800bp和600bp两个片段，

说明b酶在该DNA分子上有2个切口，即b酶的切割位点有2个，C错误。]11．B[用限制酶酶切获得一个外源基因时，得到两个切口，有4个磷酸二酯键被断开，A错误；—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端不同，分别为—CATG和

—CTAG，因此不能用DNA连接酶连接，C错误；用不同的限制酶处理含目的基因的DNA片段和质粒，若产生的黏性末端相同，则也能形成重组质粒，D错误。]12．B[限制酶SmaⅠ的切割位点在中轴线上，切割后形成平末端，E.coliDNA连接酶

只能连接黏性末端，A错误；一种限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列，并在特定位点切割DNA分子，并非只能识别一种核苷酸序列，如表格中限制酶HindⅡ识别的核苷酸序列不止一种，D错误。]13．(1)黏性末端平末端(2)—GAATTC——CTTA

AG—G和A之间的磷酸二酯键(3)两种限制酶切割后形成的黏性末端相同(4)T4E．coli(5)噬菌体动植物病毒解析(2)将图中片段两端的黏性末端对接后可以看出限制酶X识别的序列为6个核苷酸组成的—GAATTC—，互补链是—CTTAAG—，切割

的位点为G和A之间的磷酸二酯键。(3)质粒载体可以用限制酶X切割，也可以用另一种限制酶Y切割，说明限制酶Y与限制酶X切割产生的黏性末端相同。(4)基因工程使用的DNA连接酶，按来源可分为E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中只能连接黏性末端的是E.coliDNA连接酶。

14．(1)EcoRⅠ、PstⅠEcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ和EcoRⅤ(2)磷酸二酯键(3)自我复制一至多个限制酶的切割位点用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞，能够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞解析(1)限制酶EcoRⅠ和PstⅠ切割形成的是黏性末端，限制

酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割形成的是平末端，E.coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来，而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接黏性末端和平末端，但连接效率较低。因此图中EcoRⅠ和PstⅠ切割后的DNA片段(黏性末端)可以用E.col

iDNA连接酶连接，除了这两种限制酶切割的DNA片段，限制酶SmaⅠ和EcoRⅤ切割后的DNA片段(平末端)也可以用T4DNA连接酶连接。(2)DNA连接酶将两个DNA片段连接形成磷酸二酯键。(3)质粒是小型环状的DNA分子，常作为基因表达的载体，首先质粒上含有复制原点，能保证

质粒在受体细胞中自我复制。质粒DNA分子上有一个至多个限制酶的切割位点，便于目的基因的插入。质粒上的标记基因是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，具体做法是用含有该抗生素的培养基培养宿主细胞，能够存活的即为含有质粒载体的宿主细胞。第2节基因工程的基本操作程序第1课

时目的基因的筛选与获取、基因表达载体的构建1．C2．D[PCR技术扩增的目的基因序列不一定完全是已知的，A错误；该技术是通过高温来使DNA解旋的，不需要解旋酶，B错误；该技术需要的一对引物，分别能与模板DNA的两条链

进行碱基互补配对，其序列不是互补的，C错误。]3．D[用PCR扩增DNA片段的过程中，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3′端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5′端至3′端延伸的，故引物的碱基序列应与每条模板链5′

端的一段核苷酸链的碱基序列相同，即应以模板链5′端的一段脱氧核苷酸单链片段作为引物；由题干信息分析可知，5′端的碱基序列是5′GACCTGTGGAAGC和5′CAATCCCGTATG，故对应的引物为①④，D正确。]4．D[第四轮循环得到的16个

DNA分子中，两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段有24－2×4＝8(个)，即有8个⑤，D错误。]5．A[载体不能防止目的基因被受体细胞限制酶“切割”，A错误；载体在受体细胞中能够稳定存在，并且自我复制，

使目的基因数量扩大，B正确；启动子是RNA聚合酶的识别和结合的位点，能启动转录过程；终止子控制着转录的结束，所以载体含有的启动子和终止子可协助目的基因的表达，C正确；载体具有标记基因，标记基因便于筛选含有目的基因的受体细胞，D正确。]6．C[基因表达载体包括启动子、终

止子、目的基因、标记基因等，其中启动子位于目的基因的上游，是启动转录的一段DNA片段，终止子位于目的基因的下游，能够终止转录过程，B正确，C错误；不同的目的基因具有不同的核苷酸序列，其启动子也不尽相同，D正确。]7．C[启动子是RNA聚合酶的识别和结合部位，C错误

。]8．B[酶E会破坏两种标记基因，为避免切割后DNA片段的自身环化，又保留质粒上的标记基因，切割时应选择的限制酶组合是酶F和酶G，A错误；重组质粒上的四环素抗性基因被破坏，而重组质粒上的氨苄青霉素抗性基因能表达，用含氨苄青霉素的培养基筛选出的有导入

重组质粒的受体菌和导入普通质粒的受体菌，C错误；据图可知，因酶E有两个作用位点，同时用三种限制酶处理图中质粒，能将质粒切割成4个DNA片段，电泳后可得到4个条带，D错误。]9．D[过程1是由mRNA形成单链DNA的过程，为逆转录，该过程需要逆转录酶，A错误；过程2中的引物B可与cDNA互补配对

，而mRNA与cDNA碱基互补配对，则引物B和mRNA除碱基T和U的区别外，其余序列相同，不能互补配对，B错误；游离的脱氧核苷酸只能加到引物的3′端，C错误；利用RT－PCR技术对某些微量RNA病毒进行检测，并可提高检测的灵敏度(因为增加了待测R

NA逆转录产生的DNA的数量，因此便于检测)，D正确。]10．C[选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ可能使质粒中的两种标记基因都被破坏，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，A正确；酶切后的质粒和目的基因片段要用DNA连

接酶连接，构建重组载体，B正确；能在添加四环素的培养基上生存的也可能是只含有质粒的大肠杆菌，C错误；PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链，故所用的引物组成为图2中引物甲和引物丙，D正确

。]11．B[PCR的原理是DNA半保留复制，PCR技术是在较高温度条件下打开双链后进行扩增的，是先解旋后复制，A正确；PCR的过程主要包括高温变性→低温复性→中温延伸，可见该过程中温度不是逐渐降低，B错误。]12．B[引物自身

不应存在互补序列，否则会出现引物与自身配对、引物跟引物配对情况，降低PCR的效率，A正确；引物引导子链合成的方向是5′端→3′端，因此为了便于扩增的DNA片段与载体连接，需要在引物的5′端加上限制酶识别序

列，B错误；为了便于扩增的DNA片段与载体连接，常在两条引物上设计加入不同的限制酶识别序列，主要目的是使目的基因能定向插入表达载体，避免目的基因自身环化，C正确；复性所需的温度、时长和延伸所需的温度、时长均与引物有关，如引物中G与C含量高，需要设定

更高的复性和延伸温度，D正确。]13．(1)解旋酶加热至90℃以上氢键(2)大肠杆菌DNA聚合酶在高温下会失活(3)①细胞自身的DNA分子没有该限制酶的识别序列②甲基化酶对细胞自身的DNA分子进行了修饰(4)90℃以上高温14．(1

)基因重组(2)复制表达(或合成抗盐基因的mRNA)(3)SalⅠ和HindⅢ(4)氨苄青霉素四环素(或氨苄青霉素和四环素)4和6第2课时将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定1．D[要让目的基因进入受体细胞后能稳定存在并得到复制和表达，不管

采用什么导入方法，都需要构建表达载体才能实现，A错误；花粉管通道法只适用于转基因植物的培育，B错误；采用花粉管通道法时，植物受体细胞一般是植物体细胞或受精卵，通常不选卵细胞，C错误。]2．B[将目的基因转入动物细胞常用显

微注射法，将目的基因转入微生物细胞常用Ca2＋处理法，B错误。]3．A[基因表达的产物是蛋白质，因此，只有在受体细胞中检测或提取到了相应蛋白质才能证明目的基因在受体细胞中完成了表达，B、D项只能说明完成了目的基因的导入，C项只能说明完成了目的基因的导入和目的基因的转录过程。]4．C[目的基

因导入受体细胞后，首先要检测转基因生物(染色体)DNA上是否插入了目的基因，这是目的基因能否在受体细胞中稳定遗传的关键，A错误；PCR可用于检测目的基因是否转录，检测目的基因是否翻译用抗原—抗体杂交技术，B错误；抗虫、抗病检验

用于确定转基因生物是否具备相关性状属于个体生物学水平的鉴定，D错误。]5．D[某医学遗传研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛，这头牛发生了基因重组，D错误。]6．C[成功导入了重组质粒的细菌B，因目的基因插入质粒

后，破坏了四环素抗性基因，所以在含有四环素的培养基上不能生长，C错误。]7．B[改变后的NR2B基因作为目的基因，需要与载体结合后才可导入小鼠受精卵内，B错误。]8．B[将基因表达载体导入小鼠受精卵以获得转基因小鼠，A错误；构建表达载体需要限制酶和DNA连接酶，C错误；检测目的基

因是否完成表达常用抗原—抗体杂交技术，D错误。]9．C[转基因羊有性生殖产生的后代发生性状分离，产生的后代可能没有目的基因，也就不能产生α1-抗胰蛋白酶，C错误。]10．A[不出现杂交带可说明相应的基因没有转录形成mRNA

，即没有表达，A正确；三种基因不同，因此三种探针的核苷酸序列也不相同，B错误；由于基因的选择性表达，三种细胞中蛋白质种类不完全相同，C错误；三种细胞来源于同一个受精卵的有丝分裂，含有的DNA相同，用题述探针分别检测三种细胞的DNA，实验结果

相同，D错误。]11．C[过程②是目的基因表达载体的构建过程，由题图可知，该过程既要连接黏性末端又要连接平末端，因此该过程中需用T4DNA连接酶连接，B正确；过程③是将重组质粒导入农杆菌的过程，该过程可以用钙离子处

理使农杆菌处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，C错误。]12．C[目的基因是用限制性内切核酸酶将DNA酶切后得到的，需筛选，A错误；Ca2＋用于处理细菌细胞，B错误；基因成功表达的前提是能转录和翻译，转录时需RNA聚合酶识别转录的起点才能启动，C正

确；花药离体培养得到的是玉米的单倍体，需再用秋水仙素处理单倍体，使染色体数目加倍才能得到稳定遗传的转基因玉米，D错误。]13．(1)T－DNA染色体DNA(2)农杆菌转化法Ca2＋(3)抗原—抗体杂交技术个体生物学14．(1)PCR(2)磷酸二酯(3)进行转化使大肠杆菌细胞处于

一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态(4)碳源、氮源、无机盐、水导入pUC18质粒和重组质粒的大肠杆菌(5)白无论大肠杆菌中是否导入重组质粒，均会呈现蓝色菌落，无法判断导入的是原pUC18质粒还是重组质粒第3节基因工程的应用1．C[用基因工程培育的抗虫植物能抗虫

，不能抗病毒，A错误；基因工程在畜牧业上的应用主要是提高动物生长速率、改善畜产品品质、用转基因动物生产药物，B错误；基因工程能将一些相关基因导入作物中，可用来培育高产、稳产、品质优良和抗逆性强的作物，C正确；

科学家将必需氨基酸含量多的蛋白质的相关基因导入植物中，或者改变这些氨基酸合成途径中某种关键酶的活性，以提高氨基酸的含量，D错误。]2．D[利用PCR技术获得大量目的基因时，需要提供DNA的模板和引物，设计引物需要一段已知目的基因的核苷酸

序列，D错误。]3．C[病毒的寄生具有专一性，所以过程①不能用动物病毒作为载体，A错误；从该农作物新品种的细胞中检测出具有活性的SOD，才能说明该基因工程成功了，B错误；载体不属于工具酶，D错误。]4．A[GsSAMS基因会提高植物渗透调节过程相关基因的表达，

提高耐盐碱胁迫的能力，A错误。]5．D[科学家通过诱变育种方式培育出高产青霉菌株，培养青霉菌并从中提取青霉素。该过程没有采用基因工程技术，不属于基因工程的应用，D符合题意。]6．C[要得到转基因山羊乳腺生物反应器，在构建基因表达载体时需要乳腺中特异表达

的基因的启动子，使目的基因只在乳腺细胞中表达，A正确；通过显微注射技术将基因表达载体导入山羊受精卵，C错误；山羊乳腺细胞含有内质网和高尔基体，可将肽链加工成具有一定空间结构的丁酰胆碱酯酶，D正确。]7．D[利用动物乳腺生物反应器生

产药物要受动物性别和发育期的限制，若从尿液中获取药物，则无论是雌性还是雄性个体，在任何发育期都可以产生所需药物，D正确。]8．B[GP基因的启动子只能启动基因的转录，而不能启动复制，B错误。]9．C[质粒上的抗性基因有利于筛选含目的基因的细胞，但不能促进目

的基因的表达，A错误；AluⅠ的切割位点在目的基因内部，用其切割会破坏目的基因，B错误；过程④是进行移栽，不能再利用含氨苄青霉素的培养基来筛选含有目的基因的幼苗，应该在个体水平上进行抗冻性状检测，D错误。]10．C[需先将病毒的RNA逆转录成DNA，再根据DNA序列设计出特异性的引物进行P

CR扩增目的基因，A错误；戊型肝炎病毒的遗传物质是RNA，大肠杆菌的遗传物质是DNA，B错误；该蛋白疫苗不会侵染细胞，不产生细胞免疫，但疫苗属于抗原，会刺激机体产生体液免疫，可以产生记忆细胞(记忆B细胞)，D错误。]11

．A[该转基因技术所用的目的基因是乙烯形成酶的反义基因，A错误；乙烯形成酶的反义基因与乙烯形成酶基因都是由α链和β链组成的，区别是转录的模板链相反，使转录出的mRNA能互补配对，形成双链RNA，B正确；过程⑤依据的原理是碱

基互补配对原则，乙烯形成酶基因的反义拷贝转录出的反义mRNA与乙烯形成酶基因转录出的mRNA结合，可能会使乙烯形成酶基因的翻译过程受阻，C、D正确。]12．D[培育转基因牛，一般将目的基因导入受精卵，发育成的个体所有细

胞均含有人凝血因子基因，A错误；提高基因表达水平是指设法使牛的乳腺细胞合成更多的人凝血因子，B错误。]13．(1)限制酶标记基因RNA聚合(2)显微注射技术受精卵胚胎移植乳腺中特异表达的基因的启动子乳腺(或乳房)生物反应器(3)农杆菌转化法植物

组织培养PCR等技术14．(1)原核细胞DNA上没有该限制酶识别的序列或虽然存在其识别的序列但是发生了甲基化修饰(2)启动子和终止子DNA聚合酶只能从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸合成DNA分子时引物作为子链的片段连接在

其中(3)花粉管通道法将转基因棉花种植在具有一定含盐量的土壤中(或定期浇灌盐溶液)液泡膜上增加了Na＋/K＋逆向转运蛋白的数量，可在液泡内积累无机盐离子，升高细胞液的渗透压(合理即可)第4节蛋白质工程的原理和应用1．B[基因

的结构决定蛋白质的结构，对蛋白质的结构进行设计改造是通过改造或合成基因来完成的，而不是直接对蛋白质分子进行操作，B错误。]2．C[蛋白质工程的过程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列(基因)或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。因此，预期在P1的

基础上研发抗菌性强但溶血性弱的蛋白质药物，下一步要做的是设计预期的蛋白质结构，即设计抗菌性强但溶血性弱的蛋白质结构，C正确。]3．C[对天然蛋白质进行改造，是通过对基因的操作来实现的。]4．D[分析蛋白质的三维结构是蛋白质工程的准备工作，A不符合题意；

研究蛋白质的氨基酸组成是为了设计或改造相关基因，这不是蛋白质工程的最终目的，B不符合题意；获取编码蛋白质的基因序列信息实现了对基因的修饰或合成过程，但不是蛋白质工程要达到的最终目的，C不符合题意；改造现有蛋白质或制造新的蛋白质，从而满足人类的需求，实现对蛋白质的定向改造，这是蛋白质工程的最

终目的，D符合题意。]5．B[由于基因控制蛋白质的合成，所以对蛋白质设计改造可通过对基因进行改造或合成来完成，且改造后的基因能够遗传给子代，B正确。]6．D[将人的胰岛素基因整合到大肠杆菌体内生产胰岛素是基因工程的成果。]7．D[基因工程需要通过体外重

组DNA技术和转基因等技术实现，A正确；蛋白质工程能定向改造蛋白质的分子结构，使之更加符合人类需求，B正确；通过基因工程能创造出更符合人们需求的新的生物类型和生物产品，C正确；蛋白质工程并不是直接改造蛋白质，而是通过改造某种基因，间接对这种基因控制合成的蛋白质进行改造，故基因工程和

蛋白质工程都是在DNA分子水平上进行设计和施工的，D错误。]8．B[基因工程和蛋白质工程均是对基因进行操作，A错误；基因工程和蛋白质工程都是分子水平的操作，C错误；蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出

来的第二代基因工程，D错误。]9．B[蛋白质工程和基因工程的根本区别是蛋白质工程可产生自然界没有的蛋白质，A错误；蛋白质工程操作过程中，需要酶和载体作为工具，C错误；细胞内合成Y1蛋白与Y蛋白的过程中，遗传信息的流向是相同的，D错误。]10．D[题图中新的干扰素基因导入受体细胞中表达新干扰素的

过程涉及基因工程技术,D错误。]11．A[蛋白质工程的流程：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→合成或改造基因→表达出蛋白质，这和天然蛋白质合成的流程不完全相同，B错误；蛋白质工

程的发展并不成熟，仍需一段时间提升，目前并不能在各个领域广泛应用，C错误；当前限制蛋白质工程发展的关键因素是对蛋白质的高级结构了解不够，D错误。]12．C[对鼠源杂交瘤抗体进行改造，首先要根据预期嵌合抗体功能(或蛋白质功能)，设

计嵌合抗体结构，然后通过基因拼接，将鼠源抗体基因改造成鼠—人嵌合抗体基因，最后导入鼠淋巴细胞中表达，而不是通过基因定点诱变技术改造基因实现的，C错误。]13．(1)“M酶”脱氧核苷酸(2)PCR耐高温的DNA聚合酶(或TaqDNA聚合酶)(3)玉米细胞的

染色体DNA中载体(4)植物细胞具有全能性测定玉米种子中赖氨酸的含量14．(1)氨基酸序列(多肽链)mRNA密码子的简并性(2)从基因文库中获取目的基因通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成DNA半保留复制

(3)种类提取的水蛭蛋白的酶解时间和处理的酶的种类不同，导致水蛭蛋白空间结构有不同程度破坏(4)取3支试管，分别加入等量的蛋白质工程改造后的水蛭素、上述水蛭蛋白酶解产物和天然水蛭素；用酒精消毒，用注射器取同一种动物(如家兔)血液，立即将等量的血液加入1、2、

3号三支试管中，静置相同时间，统计三支试管中血液凝固时间解析(3)将提取的水蛭蛋白经甲、乙两种蛋白酶水解后，据题图可知，水解产物中的肽含量随着酶解时间的延长均上升，且差别不大。水解产物中抗凝血活性有差异，经酶甲处理后，随着酶解时间的延

长，抗凝血活性先上升后相对稳定；经酶乙处理后，随着酶解时间的延长，抗凝血活性先上升后下降。经酶甲处理后的酶解产物的抗凝血活性最终高于经酶乙处理后的酶解产物的抗凝血活性，且差异明显。据此推测两种酶处理后酶解产物的抗凝血活性差异主要与肽的种类有关，导致其活性不同的原因是提取的水蛭蛋白的酶

解时间和酶的种类不同，导致水蛭蛋白空间结构有不同程度破坏。重点突破练(三)1．B[有些限制酶的识别序列不同，但可以产生相同的黏性末端，A错误；当限制酶在它识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开时，产生的是黏性末端，C错误；限制酶和DNA连接酶的作用部位相同，都是磷

酸二酯键，D错误。]2．A[限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率就越大，故相同DNA分子被a酶切割的概率一般高于b酶，A正确；a酶与b酶切断的化学键相同，都是磷酸二酯键，B错误；a酶的识别序列是－GATC－，b酶识别序列是－G

GATCC－，能被b酶识别并切割的序列也能被a酶切割，但能被a酶识别并切割的序列不一定能被b酶切割，C错误；为防止限制酶切割后的质粒自身环化，在基因工程中通常使用能切出不同黏性末端的两种限制酶切割同一

质粒，而a酶、b酶切割产生相同的黏性末端，D错误。]3．B[要得到一个能在氨苄青霉素培养基上生长而不能在四环素培养基上生长的含重组质粒的细胞，应选择酶切位点位于四环素抗性基因内部的限制酶，B正确。]4．D[解答本题的关键是要看清切割后目

的基因插入的方向，只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体，才能保证构建的重组DNA中RNA聚合酶在插入的目的基因上的移动方向与图丙相同。]5．D[图示表示基因表达载体的构建过程，这是基因工程的核心步骤，所需的限制性内切核酸酶一般来自原核生物，A错误；由于SmaⅠ

的识别序列位于目的基因上，若使用该限制性内切核酸酶，将破坏目的基因，所以此表达载体构建时需要用到EcoRⅠ、PstⅠ限制性内切核酸酶，B错误；限制性内切核酸酶具有特异性，即一种限制性内切核酸酶只能识别一种特定

的脱氧核苷酸序列并在特定的位点切割，C错误；卡那霉素抗性基因作为标记基因，主要作用是筛选含有目的基因的受体细胞，D正确。]6．D[大多数限制酶识别6个核苷酸序列，少数限制酶的识别序列由4个、8个或其他数量的核苷酸组成，A错误；PCR反应中温度的周期性改变是为了变性、复性、

延伸，DNA聚合酶催化子链的延伸，B错误；载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，C错误；抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达，需要进行检测和鉴定，D正确。]7．C[判断导入的基因是否成功表达，需要用抗原—抗体杂交技术

，C错误；利用PCR技术扩增目的基因时，利用高温可使双链DNA中的氢键断裂，即可用高温代替解旋酶的功能，D正确。]8．D[因为引物的作用是使TaqDNA聚合酶从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，由题图中引物1的

方向可知，报告荧光基团R连接在探针的5′端，A错误；新链的合成需要消耗能量，B错误；在该反应中TaqDNA聚合酶有两个作用，一是形成子链的磷酸二酯键，二是水解探针，破坏磷酸二酯键，C错误；Ct值越小，即达到

荧光阈值所经历的循环次数越少，说明样品中特定DNA序列的含量越多，D正确。]9．C[①过程构建的表达载体含有组织特异性启动子，即RNA聚合酶的结合部位，A正确；②过程为核移植，通常在显微镜下进行去核、注入等操作，B正确；该过程培养的山羊只有乳腺细胞能分泌人乳铁蛋白，C错误；据题图分析可知，该过程利

用了转基因、核移植和胚胎移植等工程技术，D正确。]10．B[步骤①是采用PCR技术扩增干扰素基因，该技术的原理是DNA半保留复制，A正确；过程③将重组质粒导入根瘤农杆菌，在根瘤农杆菌侵染人参愈伤组织细胞时，T－DNA才整合到受体细胞的染色体

DNA上，B错误；由于需要用EcoRⅠ、BamHⅠ两种限制酶切割目的基因和质粒，因此科研人员还在两种引物的一端分别加上了—GAATTC—和—GGATCC—序列，以便于后续的剪切和连接，D正确。]11．D[蛋白质结构的多样性决定蛋白质功能

的多样性，在实施蛋白质工程的准备阶段，收集大量的蛋白质分子结构的信息，分析某一结构与预期的蛋白质功能之间的关系，从而据其构建出某一段氨基酸序列，此氨基酸序列成为构建脱氧核苷酸序列(即基因)的依据，A、B正确；T4溶菌酶是蛋白质，

对其改造属于蛋白质工程，C正确；在蛋白质工程中，基因改造后可以表达出改造的蛋白质，也可以制造出新的蛋白质，D错误。]12．B[蛋白质工程通过基因改造或基因合成，然后进行表达，对现有蛋白质进行改造，改造后的性状是可遗传的，A正确；对纤维素酶的改造需要以基因工程为基础，通过基因改造或基因

合成，对纤维素酶完成改造，B错误。]13．(1)Ca2＋(2)侵染菊花(或植物)细胞，并将T－DNA转移至受体细胞染色体DNA(3)卡那霉素(4)抗虫基因(目的基因)转基因菊花的DNA(5)①非转基因

菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物②实验组与对照组死亡率解析(2)根据农杆菌的Ti质粒中的T－DNA可以整合到受体细胞的染色体DNA上的特点，通常用农杆菌转化法将目的基因导入受体细胞。(3)基因表达载体的构建中，需要标记基因，根据题意可知，该标记基因为卡那霉素抗性基因，因此需要

在加入卡那霉素的培养基中选择出成功转入目的基因的菊花。(5)实验设计应遵循对照原则，因此对照组应该加入非转基因菊花嫩茎及叶片与人工饲料混合物；根据实验组比对照组的死亡率高，说明转基因菊花对菊天牛2龄幼虫有较强的毒杀作用。14．(1)PCR

引物4、引物5(2)BamHⅠ和HindⅢ这两种酶能切割质粒和目的基因，且能得到不同的黏性末端，避免质粒和目的基因自身环化及反向连接(3)提供RNA聚合酶特异性识别和结合的位点，驱动基因的转录酵母菌为真核细胞，含有内质网和高尔基体，可对核糖体合成的蛋白质进行加工PCR解析(1)PCR(聚合酶链式反

应)技术可以利用少量的DNA在短时间内获得大量的相同DNA。引物1～4的模板方向是5′→3′(从左到右)，由于DNA新链的合成方向是5′→3′，所以合成胰岛素基因只能选择引物3和引物4。同样，对于引物5～8，只能选择引物5和引物6才能合成胰岛

素基因。只有引物4和引物5扩增出来的胰岛素基因含有和图2相同的两种限制酶的识别位点，而引物3和引物6扩增出来的基因片段不含有，因此应选择的引物为引物4和引物5。15．(1)DNA半保留复制耐高温的DNA聚合酶(或TaqDNA聚合酶)引物(2)蛋白质空间结构较为复杂，对其直接改造难以操作；直

接改造蛋白质不能遗传，改造基因能遗传能生产出自然界不存在的蛋白质蛋白质工程(3)农杆菌转化法植物细胞具有全能性第4章生物技术的安全性与伦理问题第1节转基因产品的安全性1．C[微生物具有生理结构和遗传物质简单的优点，便于研究，A正确；微生物的生长周

期短，具有生长繁殖快的优点，B正确；微生物对环境因素敏感，如在某种抗生素的环境中不能生存，C错误；微生物的遗传物质简单，具有容易进行遗传物质操作的优点，D正确。]2．C[转基因抗虫棉使得棉花具有了抗虫的能力，并没有改善作物的品质，A错误；将毒素蛋白基因导入水稻的受精卵前，需要先构建

基因表达载体，才可能得到抗虫水稻，B错误；利用可以调节细胞渗透压的基因，来提高作物的抗盐碱和抗干旱的能力，C正确；可以利用质粒作为植物基因工程的载体，如植物的农杆菌转化法，将目的基因导入农杆菌，再转入植物细胞，D错误。]3．D[单克隆抗体的制备运用的是动物细胞融合

技术等动物细胞工程技术，不涉及转基因技术。]4．C[目的基因导入了受体细胞不一定都能正常表达，C错误。]5．D[转基因植物的外源基因可通过花粉传播到近缘植物，可能使杂草成为有抗除草剂基因的“超级杂草”等，D错误。]6．A[可通

过转基因微生物和转基因动物生产药物，A错误。]7．D[帝王蝶的幼虫在吃了某种转基因玉米的花粉沾染过的牛奶草叶子后，近一半的个体死亡，幸存的也不能正常发育，这说明了转基因食品存在不安全因素，D符合题意。]8．B[转基因作为一项技术本身是中

性的，所以只要有证据表明产品有害，就应该禁止该转基因产品的使用，而不是禁止转基因技术的应用。]9．A[应把重组DNA的转移限制在遗传上具有特定缺陷的生物上，B不合理；一旦发现转基因生物出现了安全性问题，要马上停止实验，并销毁重组生物，C不合理；目前人们

对基因的结构、基因间的相互作用以及基因的调控机制并没有完全掌握，D不合理。]10．D[转基因不育株系的配子不育，可避免YCF1基因随花粉扩散造成基因污染，A正确；由图1可知，与野生型相比，转基因植株的干重更大，转基因植株对Cd污染具有更强的耐受能力，B正确；

据图2可知，叶片和茎中的Cd含量较高，故对杨树的茎叶进行后续处理对于修复Cd污染土壤最为方便有效，C正确；YCF1向液泡内转运镉离子是逆浓度梯度运输，故需要消耗细胞代谢释放的能量，D错误。]11．A[我国对转基因技术的方针是一贯的、明确的，不会随着国家的政治、经济、科学发展水平的提升不

断变化，就是研究上要大胆，坚持自主创新；推广上要慎重，做到确保安全；管理上要严格，坚持依法监管。综上所述，A错误，B、C、D正确。]12．D[转入抗虫基因的植物可杀死无抗虫基因的昆虫，对昆虫的抗性具有选择作用，所以会导致昆虫群体抗性基因频率增加，C正确；

如果转基因植物的外源基因来源于自然界，仍然存在潜在的安全性问题，D错误。]13．(1)农杆菌脱分化黑暗(2)5′—GTTCCT—3′和5′—ATGGCT—3′再分化增加(3)可有效延缓害虫抗性基因频率增加的速度(4)同意，叶绿体基因组不能随花粉遗传给下一代解析(2)引

物的设计原则是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸，与目的基因片段5′—AGGAAC—3′和3′—TACCGA—5′碱基互补配对。愈伤组织经再分化得到幼苗，在移栽时要适当降低湿度，增加光照强度。(3)生产上将两种转基因玉米混合种植，二者都有抗除草剂基因，都能在喷洒除

草剂的大田中存活，DBN9936还含有抗虫基因，若单独种植，大部分害虫死亡，少数有抗性基因的害虫存活，并且有更多的机会将抗性基因遗传给后代，使害虫抗性基因频率增加，DBN9858不抗虫，与DBN9936混合种植，可有效延缓害虫抗性

基因频率的增加速度，有利于生态可持续发展。(4)为避免转基因玉米的花粉对其他野生型的玉米造成基因污染，可以将基因导入玉米细胞叶绿体基因组中。14．(1)核糖体内质网和高尔基体(2)基因表达载体的构建基因突变(3)不同物种之间存在生殖隔离(4)减少了农药对环境的污染转

基因玉米能够抵抗玉米螟，但不一定能抵抗其他玉米害虫(5)这种玉米的籽粒可能含有蛋白酶抑制剂，人食用后可能抑制人体蛋白酶的活性，影响人体健康解析(1)据题意可知，该蛋白酶抑制剂属于分泌蛋白，故合成番茄蛋白

酶抑制剂的具体部位是核糖体，合成后还需要在内质网和高尔基体中加工才具有生物活性。(2)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建。“转基因玉米”独立种植若干代以后，也将出现不抗虫的现象，此种现象可能缘于玉米螟发生了基因突变。第2节关注生殖性克

隆人第3节禁止生物武器1．A[很多生物学家认为，克隆技术还不成熟，现在就做克隆人很有可能孕育出有严重生理缺陷的孩子，因此反对克隆人，A符合题意；坚持做克隆人的科学家认为可以通过胚胎分级、基因诊断和染色体检查等方法弥补克隆技术的不足，B不符合题意；有的伦理学家认为，克隆人冲击了现有的一

些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念，进而反对克隆人，C不符合题意；人的道德观念是可以改变的，这是支持克隆人的观点，D不符合题意。]2．D[生殖性克隆的目的是通过克隆技术产生独立生存的新个体；治疗性克隆的目的是利用克隆技术产生特定的细胞、组织和器官，从而治疗疾病，A错误；生殖性克隆需要进行

胚胎移植；治疗性克隆不需要进行胚胎移植，B错误；生殖性克隆人属于无性生殖，不能丰富人类基因的多样性，C错误；克隆人一旦成功，将严重威胁人类社会的稳定，破坏原有的人际关系，可能引发一系列社会伦理、道德和法律问题，故可以研究治疗性克隆而禁止生殖性克隆人，D正确

。]3．B[途径1进行了遗传学诊断，为设计试管婴儿，途径2为培育试管婴儿，A错误；①表示体外受精过程，C错误；图示两条途径获得试管婴儿的目的不同，途径1主要是用于疾病的治疗等，途径2主要是解决不孕不育问题，D错误。]4．D[把试管婴儿当作人体零配件工厂是对生命的不尊重，这属于设计试管婴儿反对者

的观点，D符合题意。]5．B[设计试管婴儿的性别会破坏自然状态的性别比例；利用试管婴儿的脐带血并不能治疗所有疾病；设计试管婴儿不一定要考虑婴儿的性别。]6．A[生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类以及经过基因重组的致病菌

等，毒品不属于生物武器，A错误。]7．A[生物武器与常规武器、核武器和化学武器相比，成本造价低廉，容易获得。]8．B[利用炭疽杆菌制成的生物武器，具有传染性强、致死率极高的特点，B错误；病毒繁殖速度快，极易传染，且变异频率相

对较高，若用病毒作为生物武器，带来的危害将难以预估，D正确。]9．D[由题意可知，该技术定向非常精确，故只需要编辑少量的细胞就可以对遗传病进行治疗，A正确；该技术能帮助修复人类早期胚胎中与肥厚型心肌病相关的基因MYBPC3的

突变，但也会引发基因歧视问题，B正确；由于外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的，因此有时候会出现一些人们意想不到的后果，潜藏着难以预测的、巨大的不确定性和风险，C正确。]10．A[大型环状DNA分子位于拟核中，将该菌的大型环状DNA

分子破坏后，该菌仍能产生内毒素，说明控制内毒素合成的基因不位于拟核中，A错误。]11．C[“设计试管婴儿”没有应用细胞核移植技术，A错误；与“试管婴儿”相比，“设计试管婴儿”需要经过遗传学诊断，B错误；“设计试管婴儿”一般是为了救治病人，需要试管婴儿的骨髓、干

细胞、脐带血等，不应该一味地强行禁止，D错误。]12．D13．(1)A(2)胚胎分割相同(3)前者主要用于治疗不孕不育夫妇的不孕症，后者可以用于治疗需要骨髓移植或造血干细胞移植等的疾病后者胚胎在移植前需进行遗传学诊断(4)破坏

了人类正常的性别比例，违背了伦理道德14．(1)病毒、细菌、真菌等(2)呼吸道、消化道、血液(3)①接种疫苗或抗毒素，使人产生免疫力；②使用防毒面具，活性炭对微粒有吸附性；③使用抗生素，消灭敏感病原体(4)有道理。因为作为生物武器使用的病原体几乎都是微生物，使用有限容积的载体可能

散播的病原体数量极大，且在人或动物体内有机会增殖，可在群体中传播，这会使其杀伤范围不断扩大，由此造成的危害可能难以估量重点突破练(四)1．C2．D[转基因培育的植物，理论上目的基因存在于所有体细胞中，A错误；转基因技术培育的物种和原来的非转基因生物属于同一物

种，B错误；种植转基因抗虫棉，常间行种植普通棉花是为了降低害虫的抗性基因进化的频率，C错误。]3．B[在受精作用过程中，由于受精卵中的细胞质几乎全部来自卵细胞，精子中几乎不含细胞质，因此将目的基因整合到受体细胞

的叶绿体基因组中，可以避免目的基因通过花粉转移到其他植物。]4．C[对题中观点的完全反驳即认为转基因生物不会对生态系统的稳态造成破坏。转基因生物所转入的只是一两种自然界中已经存在的外源基因，并不会改变生物原有

的分类地位，充其量只能说是具有某种特征的同一物种，不会破坏生态系统的稳态。]5．C[转基因技术的原理是基因重组，A错误；转基因技术的应用解决了人类历史上的很多难题，但其对人类既有有利的一面，也有不利的一面，B错误；转基因食品与传统食品各有优缺点，转基因食品不会替代传统食品，D错误。]6．B[治疗性

克隆也会面临伦理问题，所以要对治疗性克隆进行有效监控和严格审查，B错误。]7．C[生殖性克隆和治疗性克隆均属于无性生殖，C错误。]8．D[女方是血友病患者而男方正常的夫妇，后代女孩一定不患血友病，B正确；男方是抗维生素D佝偻病患

者而女方正常的夫妇，后代男孩一定不患病，C正确；对于一些伴性遗传病，男女中患病的情况不同，因此有时需要通过设计试管婴儿的性别生出正常的孩子，D错误。]9．A[实验过程需要利用早期胚胎培养、胚胎移植等胚胎工程技术，没有涉及体外受精技术，A错误。

]10．A[新型致病菌对人体来说是抗原，人体可以对它们产生免疫反应，A符合题意。]11．D[生物武器致病能力强，多数传染性强；生物武器的污染面积广；生物武器有一定的潜伏期，发病不一定快；生物武器包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类等，而生化毒剂类可能不是无色无味；生物武器

不易被发现和鉴定，难以防治；生物武器不会像核武器那样破坏建筑物；生物武器受自然条件影响大，大雪、低温、干燥、日晒等能加速病菌的消亡。综上所述，D正确。]12．C[经过转基因技术制造的致病菌传染力更强，并且没有相应的有效治疗药物，危害更大，B

正确；《禁止生物武器公约》议定书中声明，在任何情况下不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误；生物武器主要是致病微生物，其生命活动受到多种自然因素的影响，D正确。]13．(

1)载体质粒限制酶和DNA连接(2)①②④(3)基因重组(4)目的基因(抗枯萎病的基因)已表达不一定14．(1)动物细胞核的全能性显微操作纺锤体—染色体复合物(2)细胞分裂和发育将内细胞团均等分割(3)不能完全恢复其分化前的功

能状态(或相关基因不能正常表达)表达出组蛋白去甲基化酶，完成组蛋白的去甲基化(4)伦理道德15．(1)有性生殖体外受精胚胎移植(2)①促性腺激素②有丝分裂(3)相同的生理环境章末检测试卷(一)1．D[传统发酵技术酿酒与发酵工程酿酒的基本原理相同，均是利用酵母菌在无氧条件下代谢

产生酒精，A、C错误；传统发酵技术无法获得高纯度微生物菌体，B错误；传统发酵技术通常在自然条件下进行，发酵工程则在人为控制温度、pH等发酵条件下进行，D正确。]2．C[变酸的酒表面观察到的菌膜是醋酸菌大量繁殖而形

成的；泡菜坛液面的一层白膜，主要是产膜酵母繁殖的结果；腐乳表面一层致密的皮是由毛霉的匍匐菌丝形成的。]3．B[“蒲桃、蜜等酒独不用曲”说明葡萄酒的酿制不需要额外加入菌种，但酿酒过程仍然需要微生物，只是菌种来自葡萄本身，A错误；“凡作酒醴须曲”中的“曲”含有菌种，因此加“曲

”可加快发酵过程，B正确；“曲”中起作用的微生物主要是酵母菌，C错误；制酒的适宜温度为28℃左右，且酿酒的初期发酵装置中需含有一定的氧气，以便于酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，发酵装置内氧气被消耗完后酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，D

错误。]4．D[黑茶刚制成时有酒香气，说明黑茶制作过程中有酵母菌(无氧呼吸可以产生酒精)的参与，A正确；发酵一般为微生物的无氧呼吸(部分为有氧呼吸)过程，温度、pH、氧气含量等发酵条件都会影响微生物的生长繁殖和代谢途径，B正确；黑茶富含多肽、氨基酸、维生素等营养物质

，说明黑茶发酵可以将蛋白质、纤维素等大分子转化成小分子有机物，C正确；黑茶是一种后发酵茶，其保存过程中仍在发酵，因此新茶发酵完成后进行灭菌并密封不利于进一步发酵，D错误。]5．B[在使用接种箱或超净工作台前(而不是使用过程中)，可

用紫外线照射30min来进行消毒，B错误。]6．C[培养基中不一定都需含有碳源、氮源，如培养自养型微生物的培养基中不需加入碳源，分离自生固氮菌的培养基中，不需加入氮源，A错误；操作者的衣着和手只能进行消毒，不能

灭菌，要考虑物体的耐受程度，B错误；对于微生物的生长来说，在营养物质供应充足的基础上，pH适宜、渗透压适宜及适宜的氧气对于其生长繁殖都是有利的，C正确。]7．C[此培养基中不含有机碳源，适合用来培养自养型微生物，A正确；硝化细菌能进行化能合成作用，但不能固氮，因此若除去

①，此培养基不能培养硝化细菌，C错误。]8．A[①属于倒平板操作，盖上培养皿的皿盖后，待其冷却凝固后才能将平板倒置，A错误。]9．C[牛肉膏蛋白胨固体培养基中含有细菌生长所需的碳源、氮源、水、无机盐等，可用于细菌的培养，B正确；土壤溶液稀释倍数足够高时，才能将聚集的

细菌分散开，有助于在培养基表面形成单菌落，C错误。]10．C[稀释倍数越高，平板上出现的菌落数越少，所以中间试管涂布的3个平板的菌落平均数应大于160，C错误。]11．D[配制的牛肉膏蛋白胨培养基需使用湿热灭菌法灭菌，即在121℃、100kPa条件下处理15～30

min，将培养基彻底灭菌，以避免培养基上的微生物影响实验结果，A正确；新鲜牛奶应使用巴氏消毒法消毒，为了探究新鲜牛奶合适的消毒温度，可将等量的新鲜牛奶分别置于60℃、70℃、80℃、90℃恒温水浴锅中处理15min，检测不同温度处理下

的牛奶中微生物的数量并进行比较，B正确；由于温度过高会影响蛋白质的结构，进而会破坏牛奶中的营养成分，所以菌落数最少的组对应的温度不一定是最适的消毒温度，最适的消毒温度应保证每毫升合格巴氏杀菌乳中细菌总数不得超过50000个，同时还得保证牛奶的营养成分不被破坏，D错误。]12．C

[从坐标图来看，随着苯酚初始浓度的增大，菌株对该环境的适应时间(降解率大幅度增加之前的时间)越长，C错误。]13．B[从图中可以看出甲菌在试管中分布范围小于乙菌，说明了乙菌的运动能力比甲菌强，A正确；为了不影响菌的运动需选用半固体培养基，B错误；该实验可以根据黑色沉淀的多少初步比较细菌产生硫化

氢的能力，但不能测定产生硫化氢的量，C正确；微生物接种技术的核心是防止杂菌的污染，D正确。]14．C[日常生活中食用酱油的制作以大豆为主要原料，A错误；啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，但酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成，主发酵结束后在低温、密

闭环境下储存一段时间属于后发酵，B错误；味精的生产是谷氨酸棒状杆菌在有氧条件下发酵产生谷氨酸，谷氨酸经过一系列处理而获得的，C正确；精酿啤酒发酵时间长、产量低、价格高，但保质期更短(在发酵工艺上，精酿啤酒发酵完成后，不进行过滤

和消毒处理)，D错误。]15．B[乳酸菌属于厌氧细菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放气，A错误；制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，是为了发酵初期让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料，以保证乳酸菌进行无氧呼吸，B

正确；醋酸菌为好氧细菌，且发酵温度高于果酒的发酵温度，因此制作好葡萄酒后，除通入无菌空气，还需要适当提高发酵装置的温度，C错误；果酒发酵时温度宜控制在18～30℃，果醋发酵时温度宜控制在30～35℃，泡菜的制作温度低于30～35℃，D错误。]16．C[甲罐是果

酒发酵，果酒发酵的适宜温度是18～30℃；乙罐是果醋发酵，果醋发酵的适宜温度是30～35℃，故乙罐微生物所需的最适温度高于甲罐，A正确；甲罐是果酒发酵，需要在无氧环境中进行，因此甲罐顶上弯管中加水的主要目的是防止空气、杂菌进入；果酒发酵过程中除了产生酒精，还产生二氧化碳，故还需要排气

减压，B正确；乙罐中的刨木花有利于发酵菌的附着，但不能为其提供碳源，提供碳源的是酒精，C错误；该装置中，果醋发酵是在果酒发酵的基础上进行的，故甲、乙罐的发酵开始时间不同，甲罐的发酵时间早于乙罐，D正确。]17．B[主发酵阶段结束后，发酵液还不适合饮用

，需要经过一段时间的后发酵，才能形成澄清、成熟的啤酒，B错误。]18．C[过滤待测水样用到的滤杯、滤膜和滤瓶需要进行灭菌处理，A错误；制备EMB培养基时，待培养基冷却至50℃左右后在酒精灯火焰附近倒平板，B错误；大肠杆菌的代谢物能与EMB培养基的指

示剂反应，菌落呈深紫色，因此该培养基属于鉴别培养基，D错误。]19．(1)避免高温杀死酒曲中的微生物使原料与发酵微生物充分混合，提高发酵效率(2)这些微生物能合成淀粉酶碘液(3)酒精发酵利用的微生物是酵母菌，其只有在无氧条件下才能进行

酒精发酵观察色泽、嗅味等(4)甜酒表面氧气浓度较大，醋酸菌会大量繁殖形成菌膜解析(2)有些微生物能将淀粉分解的直接原因是这些微生物能合成淀粉酶，淀粉酶能催化淀粉的水解；淀粉可分解成还原糖，斐林试剂可以检测是否有还原糖产生，但不能

检测淀粉是否被全部分解，可加入碘液检测，若无蓝色形成，可说明淀粉被全部分解。20．(1)消灭杂菌及除去盐水中氧气增加乳酸菌含量(2)无氧呼吸细胞质基质(3)温度食盐用量腌制时间(4)乳酸菌数量增加，杂菌数量减少乳酸菌比杂菌更为耐酸21．(1)湿热灭菌平板划线纤维素(2)某些微生物

只有利用深海冷泉中的特有物质才能生存(或需要在深海冷泉的特定环境中才能存活)(3)拟杆菌作为分解者，将沉降到深海底部的难降解多糖物质分解为无机物，归还到无机环境中，有利于碳循环的顺利进行(4)耐低温解析(1)培养基通常采用湿热灭菌法进行灭菌。可以采用稀释涂布平板法或平板划线法，将单个微生物分散在固

体培养基上，经过培养得到单菌落，从而获得纯净培养物。分析题图可知，在以纤维素为碳源的培养基中，细胞数量最多，可推知拟杆菌新菌株在以纤维素为碳源时生长状况最好。(4)深海冷泉温度较低，故生活在其中的拟杆菌

所分泌的各种多糖降解酶，应具有耐低温的特性，才能高效降解多糖，保证拟杆菌的正常生命活动所需。22．(1)碳源、氮源、水和无机盐凝固剂(或琼脂)(2)防止皿盖上的水珠落入培养基(3)选择(4)基本防止基本培养基中混入特定氨基酸(5)菌落A(6)突变株C缺乏合成营养物质甲所需要的酶突变株D可以提

供突变株C生长需要的营养物质甲，突变株C可以提供突变株D生长需要的营养物质乙解析(1)图示培养基上最后都长出了菌落，说明该培养基为固体培养基，因此制备培养基时还需要加入凝固剂，常见的凝固剂是琼脂。(5)比较基本培养基和完全培养基可知，菌落A为氨基酸缺陷型

菌株，因此需要挑取菌落A进行接种培养，并进一步鉴定。(6)由表格分析可知，突变株C的生长依赖于营养物质甲，突变株D的生长依赖于营养物质乙。不添加营养物质甲和乙，二者混合培养时都能生长，最可能的原因是突变株C为突变株D提供了营养物质乙，突变株D为突变株C提供了营养物质甲。章末检测试

卷(二)1．B[细胞工程是指应用细胞生物学、分子生物学和发育生物学等多学科的原理和方法，通过细胞器、细胞或组织水平上的操作，有目的地获得特定的细胞、组织、器官、个体或其产品的一门综合性的生物工程。]2．C[形成层细胞分裂旺盛，容易诱导形成愈伤组织，因此步骤③切

取的组织块中要带有形成层，B正确；步骤⑤脱分化需要进行避光培养，愈伤组织细胞中没有叶绿体，C错误；步骤⑤脱分化和步骤⑥再分化培养基中细胞分裂素和生长素的含量、比例不同，D正确。]3．D[液泡中含有糖类、无机盐、色素和蛋

白质等，其中的色素是水溶性色素，如花青素，A正确；适当增加培养物转移至新鲜培养基的频率可减少氧化剂的浓度，从而减少褐变，B正确；根据题干信息“在蓝莓组织培养过程中，外植体切口处细胞被破坏，多酚类化合物被氧化成褐色醌类化合物，这一过程称为褐变”可

知，在培养基中添加合适的抗氧化剂可以减少褐变，C正确；一般选用代谢旺盛、再生能力强的器官或组织为材料制备外植体，D错误。]4．D[快速繁殖属于无性繁殖，能保持亲本的优良遗传特性，不需要进行筛选，D符合题意。]5．B[野生种马铃薯(二倍体)和栽培种马铃薯(四倍体)不能产生可育的后代，存

在生殖隔离，A错误；不能用灭活的病毒诱导原生质体融合，C错误；制备原生质体和诱导原生质体融合都不能在低渗溶液中进行，原因是在低渗溶液中原生质体会吸水膨胀，甚至涨破，D错误。]6．D[海拉细胞为癌细胞，具有无限增殖的能力，在细胞培养过程中不会出现接触

抑制现象，A错误；将癌变的宫颈癌组织分散为单个的海拉细胞，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，不能用胃蛋白酶，B错误；培养海拉细胞时，O2是细胞代谢所必需的，可将培养皿置于含有95%的空气和5%的CO2的混合气体的CO2培

养箱中进行培养，C错误。]7．D[ES细胞来源于早期胚胎细胞，在功能上，具有发育的全能性，能形成各种功能的细胞，在特定环境下能形成生物个体，A错误；ES细胞存在于早期胚胎中，不存在于成体组织内，B错误；iPS细胞是人工诱导的多能干细胞，动物本身不具有，C错误。]8．B[图中代

表患病母亲卵母细胞的是细胞a，A错误；胎儿的遗传物质来源于细胞a、b和c，其中a和c提供细胞核遗传物质，细胞b提供细胞质遗传物质，B正确；线粒体移植疗法的最后一道工序是胚胎移植，C错误；图示过程中有精子和卵细胞的受精作用，因此其生殖方式

为有性生殖，D错误。]9．D[每个B淋巴细胞只能产生一种抗体，A错误；灭活的病毒失去感染性，但保留抗原性，B错误；细胞融合时所用的培养液一般需要加入诱导剂，细胞筛选时所用的是选择培养基，两者在成分上有差异，C错误。]10．C[精子获能是获得受精的能力，不是获得能量

，A错误；哺乳动物体外受精后的早期胚胎培养所需营养物质与体内基本相同，胚胎的培养液成分一般都比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质，B错误；胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一，D错误。]11．C[促性腺激素的化学

本质是蛋白质，如果饲喂会被消化道中的消化酶分解，所以不能饲喂，A错误；卵裂期细胞内的有机物种类会增加，B错误；性别鉴定是在囊胚期利用滋养层细胞进行的，D错误。]12．B[精子获取后需经获能处理才可与培养到减数分裂Ⅱ中期的卵母

细胞进行受精，A错误；据图可知，与对照组相比，20μmol·L－1的柠檬苦素处理后卵裂率、囊胚率和囊胚内总细胞数均有所增加，而凋亡细胞比率有所降低，说明20μmol·L－1的柠檬苦素可以提高体外受精胚胎的发育潜力，B正确；卵裂是有丝分裂过程，C错误；为获得同卵多胎，需要对囊胚的内细胞团均等分

割，D错误。]13．D[在体外培养条件下，在饲养层细胞上或在添加抑制因子的培养液中，单倍体胚胎干细胞能够维持不分化的状态，A正确；单倍体胚胎干细胞只含有一套染色体，可能由精子或卵细胞激活后发育形成，仍保持配子的生殖功能，B正确；单

倍体胚胎干细胞具有发育的全能性，在培养液中加入分化诱导因子，如牛磺酸、丁酰环腺苷酸等化学物质时，可诱导分化成各种功能的细胞、组织和器官，C正确；单倍体胚胎干细胞中不含等位基因，但动物细胞核具有全能性，需要核移植技术才能培育成单倍体动物，D错误。]14

．D[甲是有性杂交产生的后代，其形成过程中a和b需要通过细胞膜接触完成识别和结合，A正确；乙是植物体细胞杂交产生的后代，该过程培养液渗透压略大于细胞质，有助于植物细胞酶解法去除细胞壁，防止原生质体在低渗溶液中会吸水涨破，B正确；将单

克隆抗体与药物结合，借助单克隆抗体的导向作用能将药物定向带到癌细胞所在位置，C正确；若a和b分别为基因型AaBB、aaBb植株的花粉细胞，AaBB能产生AB、aB两种花粉，aaBb能产生aB、ab两种花粉，去除细胞壁两两融合可以得到AABB、aaBB、aa

bb、AaBB、AaBb、aaBb共6种基因型的细胞，D错误。]15．B[利用植物细胞培养技术将细胞培养到愈伤组织时期可获得细胞代谢物紫草宁，从而实现了细胞产物的工厂化生产，A正确；花药离体培养得到的单倍体植株一般高度不育，不可大田栽培，还需要

人工诱导染色体数目加倍后才可获得能稳定遗传的个体，B错误；茎尖等分生区组织几乎不含病毒，因此选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗，C正确；由于植物组织培养容易受到培养条件和诱变因素(如射线、化学物质等)的影响而产生突变，所以常利用植物组织培养过程中产生的突变体

培育新品种，D正确。]16．D[动物细胞培养的过程中，10代以后的细胞遗传物质可能发生改变，A错误；植物组织培养的过程中，脱分化不需要光照，B错误；植物原生质体融合和动物细胞融合常用的促融方法不完全相同，后者特有灭活病毒促融方法，C错误。]17．B[题图中过程①代表受精作用，减数分裂产

生生殖细胞的过程中可以发生基因重组，受精作用的过程中不发生基因重组，B错误；题图中②为卵裂过程，该过程通过有丝分裂的方式增殖，细胞卵裂过程中，单个细胞体积减小而细胞核体积不变，因此核质比增大，C正确。]18．B[图中的过程②是受精作

用，该过程涉及精卵细胞的识别、细胞膜的融合(与细胞膜的流动性有关)、核的融合等过程，B错误。]19．(1)光照的有无、2,4－D的浓度(“培养的时间”不作要求)杂菌可以在培养基上生长争夺营养，杂菌产生的物质影响植物组织的生长(2)促进愈伤

组织的生长(3)脱分化黑暗(4)在脱分化形成愈伤组织及愈伤组织的增殖阶段，细胞中均不含叶绿体，无法利用光进行光合作用20．(1)这些部位的病毒极少，甚至无病毒(2)脱分化和再分化(3)愈伤组织细胞分裂(4)染色体结构与数目(5)植物体细胞杂交育种单倍体育种解析(1)作物脱毒是利用茎尖等

分生区组织细胞不含或极少含病毒的原理。(2)在植物组织培养时，常用植物激素诱导外植体脱分化和再分化。(3)细胞产物的工厂化生产并没有利用细胞的全能性原理将离体细胞培养成完整植株，而是对愈伤组织进行培养产生大量的细胞产物。(4)题中提示光学显微镜观察发现的异常为染色体变异，包括染色体数目和结构

的变异。(5)植物细胞工程在育种方面的应用有植物体细胞杂交育种、单倍体育种以及体细胞诱变育种等。21．(1)定期更换培养液加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞聚乙二醇(PEG)(2)乙和丙能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞(3

)不同部位抗体与待测抗原结合，酶催化特定底物反应解析(1)细胞培养中，为防止有害代谢物的积累对细胞自身造成危害，可采用定期更换培养液的方法，以便清除代谢物。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次

，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞；诱导动物细胞融合常用的化学诱导因素是聚乙二醇(PEG)。(2)图中过程①②依次表示单克隆抗体制备过程中的两次筛选，其中过程①第一次筛选是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，

过程②第二次筛选是通过克隆化培养和抗体检测筛选出能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。因此，甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是乙和丙；过程②的目的是筛选获得能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。22．(1)获能处理(2)内细胞团均等分割(3)胚胎移植

桑葚胚期或囊胚期(4)①促性腺②母亲卵母细胞和精子有性③能解析(1)过程X表示体外受精，来自父方的精子要进行获能处理才具备受精能力。(2)分割囊胚阶段的胚胎时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。(3)转基因、核移植或体外受精等技术获得的胚胎

，都必须移植给受体才能获得后代，因此胚胎移植是胚胎工程中最后一道程序。胚胎移植操作比较合适的时期是桑葚胚期或囊胚期。(4)①在取卵前，给捐献者注射促性腺激素，可促使其一次有更多的卵泡发育，使其超数排卵。②题图显示，“三亲婴儿”由重组卵子与父亲产生的精子结

合而成的受精卵发育而来，而重组卵子是由母亲卵母细胞的细胞核与捐献者去核卵母细胞重组而成。由此可知，“三亲婴儿”的染色体来自母亲卵母细胞和精子，这种生殖方式属于有性生殖。③“三亲婴儿”的线粒体来自捐献者卵母细胞，因此“三亲婴儿”的培育技术

能避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代。章末检测试卷(三)1．B[DNA连接酶连接两个DNA分子片段，A错误；DNA聚合酶催化脱氧核苷酸形成长链，C错误；逆转录酶是以RNA为模板指导脱氧核苷酸连接合成DNA的酶，

D错误。]2．C[限制酶Ⅱ也能将限制酶Ⅰ识别序列切割，而限制酶Ⅰ不能将限制酶Ⅱ的识别序列切割。获得目的基因需将目的基因两端切割，所以用限制酶Ⅱ切割；切割质粒只需切出一个切口，且用限制酶Ⅱ会同时破坏两个标记基因，不利于后期筛选目的细胞，所以用限制

酶Ⅰ切割，故选C。]3．A[构建重组质粒时，要将目的基因插入到启动子和终止子之间，而且不能破坏启动子、终止子、复制原点、抗生素抗性基因等部位。故只能选用NdeⅠ和BamHⅠ切割质粒和含目的基因的DNA片段，因此在PCR扩增的该基因的两端需分别引入NdeⅠ和BamHⅠ两种限制酶的识别序列。]4．A[

DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在2mol·L－1的NaCl溶液中溶解度较高，B错误；鉴定粗提取的DNA时，对照组与实验组的区别是加不加DNA，两组都需要加二苯胺试剂，C错误；哺乳动物成熟的

红细胞中无细胞核和众多细胞器，不能提取到DNA，故兔血不宜作为该实验的实验材料，D错误。]5．D[人的生长激素基因可以在其他生物细胞内表达出人的生长激素，说明生物之间共用一套遗传密码，D错误。]6．C[切割含抗

虫基因的DNA片段和载体可以用不同的限制酶，只要切割出的黏性末端相同即可，A错误；抗虫基因表达载体必须具备启动子和终止子，终止密码子位于mRNA上，B错误；抗虫基因的表达开始于启动子，D错误。]7．B[目的基因两侧

都有，且质粒也有的限制酶是EcoRⅠ，所以在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，可选EcoRⅠ，A正确；如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA

，此重组DNA中EcoRⅠ酶切位点有2个，B错误；为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理，C正确；一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，产生两个黏性末端，含有2个游离的磷酸基团，D正确。]8．C[a→b过程是多聚酶链式反

应扩增DNA片段的过程，利用了DNA半保留复制的原理，需要使用耐高温的DNA聚合酶，C错误。]9．D[人的生长激素基因存在于小鼠所有细胞中，但只在小鼠的膀胱上皮细胞中表达，A错误；需要将生长激素基因与尿血小板溶素基因的启动子重组在一起，B错误；需用显微注射法将基因表达载体导入小鼠的

受精卵中，C错误。]10．C[步骤③可用Ca2＋处理大肠杆菌，使其从常态转化为一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，C错误。]11．B[蛋白质工程和基因工程的操作对象都是基因，A错误；蛋白质工程的操作对象是基因，故需要酶和载体作为工具，C错误；蛋白质工程的操作对象是基因，经改造后的玉

米赖氨酸含量提高这一性状是可以遗传的，D错误。]12．B[通过人工合成形成的新基因应与载体构建基因表达载体，之后再导入受体细胞中使之得以表达，B错误。]13．C[据题干和图示可知，sgRNA是一段单链RNA，可指引Cas9酶结合到特定的切割位点，A错误；靶基因部分

碱基序列与sgRNA的碱基序列互补，B错误；Cas9酶可在特定切割位点进行切割，使相应部位的核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，C正确；被编辑后的B基因仍能进行转录，D错误。]14．C[不同的限制酶识别的序列不同，但可能会产生相同的黏性末端，A正确；由题图分析可知，泳道①②分别是限制酶SalⅠ和限制酶X

hoⅠ处理得到的产物，C错误；用限制酶XhoⅠ和限制酶SalⅠ同时处理该DNA片段，该片段共有5个酶切位点，可得到6种电泳产物，D正确。]15．B[构建重组质粒需要用到限制性内切核酸酶和DNA连接酶，A正确；含重组Ti质粒的农杆

菌侵染植物细胞后，重组Ti质粒的T－DNA整合到受体细胞的染色体DNA上，B错误；导入受体细胞的目的基因表达后，转基因植株方能表现出相应性状，若目的基因在受体细胞中不表达，转基因植株不能表现出相应性状，C正确；

⑤表现出抗虫性状，则表明该植株细胞发生了基因重组，基因重组是可遗传变异，D正确。]16．B[图示中的①②过程分别为转录、翻译，多酚氧化酶基因的表达指多酚氧化酶基因控制多酚氧化酶合成的过程，需要经过转录、翻译两个过程，A正确；将目的基因成功导入苹果细胞中需要构建基因

表达载体，该过程需要限制酶和DNA连接酶，不需要RNA聚合酶，B错误；据图分析可知，目的基因转录形成的mRNA可以和多酚氧化酶基因转录形成的mRNA互补配对，形成RNA双链，使mRNA不能与核糖体结合，从而阻止了翻译过程，C正确；使目的基因转录形成的mRNA和多

酚氧化酶基因转录形成的mRNA互补配对，应使目的基因的表达序列与多酚氧化酶基因的表达序列互补，且要同时在同一细胞内表达，D正确。]17．B[引物的碱基数量越少则复性温度越低，特异性越弱，目标DNA获得率越低，A错误；

两种引物的复性温度差异较大，导致不能同时复性，会增加引物与模板的非特异性结合，C错误；引物的G、C含量越高，结合特异性越强，但G、C过高，不利于复性，不利于目标DNA的扩增，D错误。]18．D[由于8号染色体的～880kb至～903kb

区间与突变体的光籽表型相关，故提取突变体和野生型的8号染色体上的DNA进行PCR扩增，A正确；题图中PCR产物的鉴定是通过琼脂糖凝胶电泳来进行的，相对分子质量较大的扩增产物迁移速率较慢，与点样处的距离较近，B、C正确；根据题图所示，野生型和突变体经引物6扩增的产物不同，其中突变体的相应扩

增产物较大，故可推知8号染色体上的引物6对应的区间发生碱基对的插入是该突变体光籽性状出现的根本原因，D错误。]19．(1)PCRCa2＋(2)染色体DNA转化(3)限制DNA连接标记基因(4)抗原—抗体杂交20．(1)氢(2)3′(3)温度酸碱度缓冲液(4)DNA聚合酶只能从3

′端延伸DNA链引物越长、引物中G、C含量越高引物的特异性下降21．(1)平(2)胸腺嘧啶(T)DNA连接(3)BA类菌落含有P0C类菌落未转入质粒(4)乙和丙目的基因反向连接22．(1)dNTP能为子链延

伸过程提供能量和原料(或脱氧核苷酸只能作为原料而不能提供能量)逆转录酶和TaqDNA聚合酶P基因两端的脱氧核苷酸序列(2)BamHⅠ、SacⅠ可转移整合到玉米细胞染色体DNA上(3)潮霉素(4)基因转化过

程中强启动子可能丢失或断裂，未能真正转化成功；虽然转化成功，但是P基因保持沉默，不能有效表达解析(2)在构建基因表达载体时，要想使P基因在玉米植株中超量表达，切割目的基因时需要把强启动子和P基因连在一起切割下来，因为ClaⅠ的酶切位点在T－D

NA外侧，因此需要用BamHⅠ切割，另一种酶可以用KpnⅠ或SacⅠ，在质粒中，KpnⅠ识别序列在BamHⅠ识别序列的左侧，终止子在右侧，如果用KpnⅠ切割，目的基因和质粒连接后，目的基因不在启动子和终止子

之间，将无法转录，因此在构建基因表达载体时，应优先选用的限制酶是BamHⅠ和SacⅠ。(3)据题图可知，利用Ti质粒的T－DNA可将目的基因整合到玉米细胞染色体DNA上，T－DNA中含有的标记基因是潮霉素抗性基因，因此植物组织培养时培养基

中需加入潮霉素，筛选出的愈伤组织经再分化过程形成丛芽，最终获得转基因玉米植株。章末检测试卷(四)1．B[我国成立国家农业转基因生物安全委员会，加强农业转基因技术的研发和监管，在确保安全的基础上慎重推广，C不符合题意；

我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，以保证生物技术伦理性等，D不符合题意。]2．D[转基因生物可能会对生物多样性构成威胁，进而影响生态系统的稳态，D错误。]3．C[先用Ca2＋处理大肠杆菌细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，然后再将含牛

乳酶基因的重组载体导入其中，获得能生产凝乳酶的工程菌。]4．A[基因污染会随着生物的繁殖而不断扩散，A错误；转基因生物具有某些特殊性质，它们在某地区的竞争能力较强，可能成为“外来物种”，威胁生态系统中其他生

物的存在，从而影响生态系统的稳定性，B正确；转基因植物的抗除草剂基因有可能通过花粉传播进入杂草，使杂草成为用除草剂除不掉的“超级杂草”，C正确；杂草、害虫从它的近亲获得抗性基因，具有竞争优势，可能会破坏生态系统的稳定性，D正确。]5．A[三倍体转基因

鲤鱼在减数分裂过程中，由于染色体联会紊乱，不能产生正常的配子，因此三倍体转基因鲤鱼与正常鲤鱼不能结合产生后代，也就不会导致自然种群被淘汰，A符合题意；载体的标记基因有些是抗生素抗性基因，由于自然选择，可能会出

现有利于抗性进化的产物；目的基因(如抗虫基因)本身编码的产物可能会对人体产生毒性；转基因生物释放到环境中，可能会对生物多样性构成潜在风险和威胁，B、C、D不符合题意。]6．A[治疗性克隆是将病人的体细胞通过核移植技术、早期胚胎培养技术获得胚胎干细胞，然后定向诱导分化成病人所需

要的细胞、组织和器官，再进行移植，不以个体的出生为目标，A错误。]7．D[我国政府允许治疗性克隆，但不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，D错误。]8．C[设计试管婴儿技术必须获得政府部门的审批，以防该技术的滥用，试管婴儿技术为许多

不孕不育夫妇解决了不孕不育问题，同样也需要得到政府的审批，C错误。]9．B[对动物基因进行编辑存在安全性与伦理问题，A错误；其他物种的器官经基因编辑后移植到人体可能会引起排斥反应，C错误；跨物种器官移植手术获得成功，是对供体生物进行的基因编辑，

而不是对人体基因进行大规模编辑，D错误。]10．C[科学家用iPS技术克隆出活体小鼠的过程属于无性生殖，C错误。]11．A[血友病是伴性遗传病，由细胞核基因控制，该技术主要降低患细胞质基因控制的遗传病的概率，A错误；Leigh氏综合征的致

病基因位于细胞质内，不遵循孟德尔的遗传规律，B正确。]12．B[母亲患色盲，父亲正常，为保证生一个色觉正常的孩子，根据伴X染色体隐性遗传的规律，生育的女孩一定色觉正常，A正确；可以取少量囊胚的滋养层细胞进行遗传物质分析，B错误；试管婴儿技术是指通过人

工操作使卵细胞和精子在体外条件下成熟和受精，属于有性生殖的范畴，C正确；试管婴儿技术的成熟并不意味着可以随意选择和“定制”孩子，要遵守法律规定和伦理要求，D正确。]13．A[种植转基因作物应该与传统农业种植区隔离，以防基因污染，A错误。]14．C[我国在任何情况下

不发展、不生产、不储存生物武器，并反对生物武器及其技术和设备的扩散，C错误。]15．D[若转基因作物产生了对人类健康及环境的负面影响，我们应该放弃该转基因作物，而并非放弃转基因技术，D错误。]16．A[过程①和②分别采用的是核移植技

术和早期胚胎培养技术，A错误；如果克隆过程中需要进行基因改造，则应选择b细胞(内细胞团细胞)为受体细胞，其具有较强的全能性，D正确。]17．B[转入油菜的抗除草剂基因，可能会通过花粉传入环境中，B错误；设计试管婴儿可以设

计婴儿的性别，反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿，C正确。]18．C[对待转基因技术的正确做法是趋利避害，不能因噎废食全面禁止，C错误。]19．(1)遗传物质DNA(2)遗传密码亲缘关系(3)成就：将抗病基因转移到水稻中

形成抗病水稻新品种；将人胰岛素基因转移到大肠杆菌体内，生产胰岛素，治疗糖尿病。灾难：转基因作物通过花粉传播可能与亲缘关系较近的植物杂交，可能产生优势物种，危及自然生态系统的生物多样性(4)开放性题目，只要学生用生物学知识说明即可(如：不赞成，因为基因被吃入后，和

其他生物大分子物质一样被消化分解，不可能以原状进入细胞，更不可能补充或整合到人体原有的基因组中去。赞成：基因被吃下去后，消化分解为简单物质，可以作为合成DNA的原料)20．(1)细胞核移植、动物细胞培养、胚胎干细胞诱导分化等(2)全能性选择性表达囊胚(3)胚胎移

植“克隆人”会引起人类社会的伦理道德发生混乱(4)不会发生免疫排斥反应21．(1)无性生殖生殖性该过程从个体水平来获得人的复制品(2)不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验(3)受精卵胚胎移植有性生殖(4)遗

传学诊断(将胚胎细胞取出，进行特定基因的检测)22．(1)胞嘧啶(C)、尿嘧啶(U)、腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)不可以因为不知道该病毒RNA是单链还是双链(2)8RNA复制和RNA的逆转录(3)幸存者因感染过病毒，故产生抗体；1918年以后出

生的人没有感染过该病毒，故不产生抗体(4)利用基因重组技术获得的生物武器较一般生物武器危害性大人类从未接触过该致病微生物，一旦发病则无药可医模块检测试卷(一)1．C[酵母菌发酵产生酒精时需要无氧的环境，所以制作果酒时瓶口应密闭，而醋酸菌是好氧

细菌，所以制作果醋时要适时通氧，中断通氧会引起醋酸菌死亡，A正确；利用传统发酵技术制作腐乳时利用的微生物有酵母、曲霉和毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，B正确；制作泡菜时需要控制严格的无氧条件、发酵温度和发酵时间等，C错误；果酒发酵的酵母菌可来自葡萄皮表面的

野生酵母菌，泡菜发酵所需的乳酸菌可来自蔬菜表面，D正确。]2．D[水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的，D错误。]3．D[步骤②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基上，A错误；扩大培养应选用液体培养基，且液体培养基中不应加入琼脂，B、C错误。]4．A[在涂

布前，在培养皿的皿底做标记，以避免混淆，并将培养皿倒置培养，防止冷凝水滴入培养基，B错误；计算平板上的菌落数时，应选择菌落数为30～300的平板进行计数，C错误；若空白对照组中有7个菌落，则说明培养基灭菌

不彻底，需要重新进行实验，D错误。]5．C[植物组织培养过程中脱分化和再分化的培养基中激素的含量不同，C错误。]6．C[植物体细胞杂交培育新品种时，应该采用植物体细胞作为实验材料，而不是花粉粒，C错误。]7．C[簇毛麦与普通小麦是

两个物种，二者之间存在生殖隔离，A正确；幼胚细胞经过脱分化形成愈伤组织，愈伤组织经过再分化形成胚状体或丛芽，从而得到完整植株，B正确；杂种植株细胞内由于没有同源染色体，减数分裂时染色体无法正常联会，C错误。]8．B[从

大型动物体中采集的卵母细胞，要经体外人工培养成熟后才具备受精能力，精子也需要进行获能培养，A正确；促进动物多排卵的激素是外源促性腺激素，B错误；试管牛的核遗传物质一半来自甲牛的卵子，一半来自乙牛的精子，

C正确；该技术可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力，D正确。]9．C[替换毒蛋白基因，使神经元不能合成毒蛋白，从而达到治疗的目的，A正确；植入神经干细胞，可增殖、分化形成相应的运动神经元，使受损的运动功能得到恢复，B正确；诱导多能干细胞分化成

多种细胞属于细胞分化过程，细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞中的核遗传物质不变，C错误，D正确。]10．B[经①形成的杂交细胞不一定都能无限增殖并产生特定抗体，需要经过克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B错误。]11．B[用限制

酶切割外源DNA分子获得一个目的基因时，需要切割目的基因的两侧，因此被水解的磷酸二酯键有4个，A错误；－↓CATG－和－G↓GATCC－序列被限制酶切出的黏性末端不同，不能用DNA连接酶连接，C错误；用不同的限制酶处理含目的基因的DNA片段和质粒，若产生的黏性末端相同，也能形成重组质粒，D错误

。]12．C[向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌，鸡血细胞会吸水涨破，但在蒸馏水中不会析出DNA，C错误。]13．B[PCR技术大量扩增目的基因时，缓冲液中需要加入的引物个数计算公式为2n＋1－2(n为循环次数)，因此PCR过程完成4轮循环，理论上至少需加入引物24＋1－2＝3

0(个)，A正确；由于DNA聚合酶只能从5′端→3′端延伸子链，因此扩增目的基因时应选择引物1和4，B错误；①是基因表达载体的构建过程，若使用限制酶EcoRⅠ切割质粒会将目的基因插入启动子上游，目的基因不能正常表达；使用限制酶HindⅢ切割质粒将破坏标记基因，不利于目的基因的

鉴定和筛选，因此该过程中应使用限制酶BamHⅠ切割质粒，C正确；为了防止污染环境，对于转化失败的大肠杆菌及其培养基应进行灭菌处理，D正确。]14．C[①过程用到的工具酶有限制酶、DNA连接酶，载体不是工具酶，A错误；⑤

过程是植物组织培养，在脱分化阶段，由于细胞内没有叶绿体还不能进行光合作用，培养基中还需要加入有机营养，如蔗糖、氨基酸等，B错误；抗虫特性针对的是虫害，需要做抗虫接种实验，D错误。]15．C[耐高温淀粉酶分解菌存在于高温环境的土壤中，土壤可取自

高温热泉环境，A正确；从图中看出，土壤样液的接种方法为稀释涂布平板法，B正确；培养温度应控制在较高温度而不是37℃左右，C错误；D/d代表微生物分解淀粉的能力大小，丙菌落的D/d值最大，淀粉酶的活性较高，D正确。]16

．D[为避免接触抑制并使细胞与培养液充分接触，通过细胞培养得到大量的供体细胞1，需将动物组织块分散成单个细胞，A正确；若题图表示植物体细胞杂交过程，形成3的过程表示原生质体的融合，完成融合的标志是再生出新的细胞壁，D错误。]17．B[若psy基因和crtI基因的序列中含有用到的限制

酶的识别序列，则会破坏目的基因，B错误；利用抗原－抗体杂交技术能检测目的基因是否表达出相应的蛋白质，D正确。]18．C[在采集卵母细胞之前，需要给供卵者注射适量的促性腺激素，促进超数排卵，A错误；从卵巢中吸取的卵母细胞，必须经体外培养成熟后才能与获能的精子受精，B错误；

受精过程中，卵细胞的透明带和卵细胞膜会依次发生生理反应，这是防止多精入卵的两道屏障，C正确；以治疗为目的的设计试管婴儿技术，是救治患者最好、最快捷的办法之一，若该项技术用于其他方面，则存在伦理问题，可能造成社会危害，D错误。]19．(1)磨碎米

粒并利用口腔唾液中的淀粉酶将米粒中的淀粉初步水解(2)酵母菌细胞质基质乙酸(3)③BC皿底(4)菌落(5)排除培养基本身被污染的可能性20．(1)无性(2)生长素细胞分裂素(3)诱发基因突变愈伤组织细胞处于不

断增殖的状态，易受到培养条件和诱变因素的影响而产生突变较高浓度的盐水(或氯化钠溶液)21．(1)细胞核(2)核移植技术基因工程(或重组DNA技术)(3)其细胞质中含有促进细胞核全能性表达的物质(4)②为胚胎干细胞，这类细胞分化程度很低

，具有发育全能性，可以定向诱导分化成各类细胞、组织、器官(5)没有排斥反应22．(1)5′ScaⅠ、HamHⅠ(2)T－DNA(3)新霉素绿色荧光油菜细胞的基因组中本身就有PEP基因(4)B链以B链为模板转录出的RNA与以A链

为模板转录出的RNA配对形成双链，抑制了PEP基因的翻译过程解析(1)为将PEP基因反向连接在启动子后，构建反义PEP基因，根据图中启动子及终止子的位置以及质粒上的限制酶种类分析，若要构成反义PEP基因表达载体，需要将限制酶切割位点设计在引物上，PEP

基因的上游引物和下游引物的5′端应分别引入ScaⅠ、HamHⅠ的酶切位点。(2)利用T－DNA可转移的特性，将目的基因插入到油菜细胞的基因组中。(3)筛选时，需在油菜愈伤组织培养基中加入新霉素进行初步选择，能保留下

来的是导入了目的基因的细胞。在激光照射下，存活的细胞一般会发出绿色荧光，因为目的基因与新霉素抗性基因以及绿色荧光蛋白基因同时进行了转移从而能检测目的基因是否成功导入，检测反义PEP基因是否整合到染色体上，研究者通常检测细胞中是否存在neo基因，而不检测PEP基因。

不直接检测PEP基因的原因是油菜细胞的基因组中本身就有PEP基因，而没有neo基因，而neo基因的存在能说明目的基因成功导入。(4)已知PEP基因的转录模板为A链，由于目的基因进行了反向连接，则反义PEP基因的转录模板为B链，进而使转反义PEP基因油菜中PEP基因的表达受阻，因为以B链为模板转录出

的RNA与以A链为模板转录出的RNA配对形成双链，抑制了PEP基因的翻译过程，进而无法表达，从而实现了油菜籽中含油量的提高。模块检测试卷(二)1．B[在自然界中，乳酸菌分布广泛，空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内都有乳酸菌分布，A错误；在

坛沿水已干涸的泡菜坛内，液体表面出现“生花”“长膜”现象，这主要是由兼性厌氧微生物——酵母菌形成的，C错误；在配制泡菜水时，应先用清水和食盐配制相应质量分数的盐水，然后再煮沸冷却，D错误。]2．B[将接种环

灼烧灭菌并冷却后蘸取菌液进行第一次划线，以后的每一次划线前都要将接种环进行灼烧灭菌，B错误。]3．D[⑥与⑦形成对照，其中一组加入对羟基苯甲酸，另一组不加，D错误。]4．B[过程Ⅱ必须先利用纤维素酶和果胶酶去除

细胞壁，获得具有活力的原生质体，再用聚乙二醇作为化学诱导剂来诱导原生质体的融合，B错误。]5．C[生长素通过促进bZIP59－LBD复合体的形成促进FAD－BD基因的转录，这有助于愈伤组织的形成，愈伤组织是一团未分化的细胞，全能性较高，说明生

长素通过调控植物细胞的基因表达而影响植物细胞全能性的表达，A正确；脱分化阶段一般不需要光照，愈伤组织再分化到一定阶段，形成叶绿体，能进行光合作用，需要弱光照射，B正确；离体的植物组织不能灭菌处理，需要消毒，

C错误；离体的植物组织培养到愈伤组织阶段的过程不能把无机物合成为有机物，因此培养基中需要加入有机物，D正确。]6．B[卵母细胞中含有激发细胞核全能性表达的物质，核移植过程中选择MⅡ期的卵母细胞有利于细胞核全能性的恢复，A正确；②表示早期胚胎培养过程，②重构胚的培养经历了卵裂、桑葚胚阶段，B

错误；过程③是诱导分化过程，其关键是利用特定条件诱导胚胎干细胞相关基因表达，C正确；过程④移植的神经元细胞由取自该小鼠的自身细胞诱导分化而来，移植后小鼠不会发生免疫排斥反应，D正确。]7．D[单克隆抗体是经过细胞融合技术产生的，A错误；能诱导骨髓瘤细胞与B淋

巴细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，B错误；利用杂交瘤技术获得杂交瘤细胞要经过克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，才可以获得专一产生抗CD14抗体的杂交瘤细胞，C错误。]8．D[若此图表

示基因工程的操作流程，甲为目的基因，则乙不一定为质粒，还可以是其他的载体(如噬菌体、动植物病毒等)，A错误；若此图表示动物细胞融合过程，则形成丙(杂种细胞)的原理是细胞膜的流动性，B错误；若此图为克隆牛的培育过程，甲为体细胞核，则乙为减数分裂Ⅱ的次级卵母细胞，C错误；若此图为试管牛生产

的技术流程图，则获能后的甲(精子)可与乙(成熟的卵母细胞)进行体外受精，然后经过早期胚胎培养到适宜的时期后进行胚胎移植，D正确。]9．A[根据题干信息可知，荧光蛋白指示的应是脑神经元活动，但脑活动不能被离体

观察，为了防止其他体细胞的荧光信号对实验结果造成干扰，M应当是一种只在脑组织中启动基因表达的启动子，A正确；据图分析可知，只有与启动子M相邻的荧光蛋白基因会表达，在没有Cre酶存在的条件下，小鼠脑神经元活动时只会发出红色荧光，B错误；Cr

e酶可以随机识别两个相同的loxP序列，并将两段序列之间的DNA敲除，当酶识别的是loxP1序列时，小鼠脑神经元活动时发出黄色荧光，当识别的是loxP2序列时，小鼠脑神经元活动时发出蓝色荧光，C错误；聚乙二醇(PEG)多用于诱导细胞融合，动物细胞转基因时常用显微注射技术，显微

注射技术不需要用到PEG，D错误。]10．A[四倍体与二倍体杂交后得到的是三倍体，三倍体是高度不育的，能防止基因污染。]11．C[卵母细胞采集后，要在体外培养成熟(MⅡ期)再去核，作为核移植的受体细胞，B正确；根据

RT－qPCR最终的荧光强度不可计算出基因Bcl－2在相应细胞中的翻译水平，在荧光信号指数扩增阶段，PCR产物量的对数值与起始模板量之间存在线性关系，可以选择在这个阶段进行定量分析，C错误；胚胎在受体子宫发育过程中，其遗传特性不受影响，受体子宫只是提供了一个发育的场所，D正确。]12．B[据图

分析，将四个关键基因转入高度分化的小鼠的成纤维细胞，再通过培养转变成iPS细胞，运用了转基因技术，原理是基因重组，同时培养小鼠的成纤维细胞应用了动物细胞培养技术，A正确；iPS细胞分化成各种组织细胞的过程中，细胞的形态、结构和生理功能发

生改变，细胞分化的实质是基因的选择性表达，使得细胞内mRNA和蛋白质改变，但DNA(遗传物质)不变，B错误，C正确；iPS细胞可定向分化成各种细胞，可见其分裂分化能力比成纤维细胞强，D正确。]13．B[预变性过程是使双链DNA完全变性解聚，A错误；后延伸过程是

为了让引物延伸完全并让单链产物完全复性形成双链结构，可使目的基因的扩增更加充分，B正确；延伸过程需要引物参与，C错误；转基因品种不只需要检测是否含有目的基因，还要检测目的基因是否表达，还有是否存在安全性问题，D错误。]14．D[

构建DNA疫苗时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒，A错误；EcoRⅠ切割后获得的是黏性末端，B错误；用EcoRⅠ切割目的基因和质粒，再用DNA连接酶连接，能产生多种连接产物，如目的基因自身环化、质粒自身环化、目的基

因与质粒正向连接、目的基因与质粒反向连接等，C错误。]15．C[①介绍的是泡菜制作技术，配制的盐水要煮沸冷却后使用，以杀灭盐水中的微生物，防止杂菌污染，A正确；传统酿醋工艺先是淀粉在微生物的作用下分解成葡萄糖，葡萄糖再在酵母菌的作用下反应生成酒精，醋酸菌是好氧

细菌，当氧气、糖源都充足时，能通过复杂的化学反应将糖分解成乙酸；当缺少糖源时，则直接将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为乙酸，C错误；从微生物培养的角度看，豆腐是固体培养基，接种时不需要对其进行严格灭菌，发酵好的豆腐上布满了菌落，其中起主要作用的是毛霉，D正确。]16．A[动物细胞融

合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均不完全相同，动物细胞融合后不能形成杂种个体，而植物体细胞杂交后能形成杂种个体，但两者都能形成杂种细胞，B错误；在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，可能发

生细胞脱分化，由于脱分化过程进行的是有丝分裂，因此该过程中会发生染色体变异或基因突变，不可能发生基因重组，C错误；试管婴儿实质上就是体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植的产物，无法使不能产生精子或卵细胞的夫妇得到自己的孩子，D错误。]17．C[①过程(基因表达载体的构建)是基因工程的核心步骤，B正确

；②过程为将目的基因导入受体细胞，常采用显微注射的方法，受体细胞一般选择受精卵，不选择体细胞，C错误。]18．A[对枯草杆菌蛋白酶进行改造通过改造基因来实现，A错误；基因工程生产的蛋白质是自然界中已存在的蛋白

质，而蛋白质工程能生产出自然界中不存在的新蛋白质分子，两者的氨基酸序列不同，B正确。]19．(1)湿热灭菌(2)杀灭杂菌(3)一个菌落代表一个活菌小当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落形状、大小、颜色、隆起程度(4)37750271

00解析(4)结合题意可知，报告菌落总数时，应选取菌落数30～300的培养皿作为菌落总数的测定标准。当有两个梯度菌落值在30～300之间时，报告结果由二者菌落数比值决定，若比值不大于2，则取平均数；若比值大于2，则报告稀释度较低的培养皿菌落数。因此例次2应

选择10－2和10－3的菌落数求平均数，故例次2的菌落总数为(295÷10＋46)÷2×1000＝37750，例次3应选取10－2的菌落数报告，则例次3的菌落总数为271×100＝27100。20．(1)清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，同时为细胞生长、增

殖提供充足的营养贴壁生长和接触抑制胰蛋白酶(2)外源促性腺激素卵母细胞中含有促进细胞核全能性表达的物质(3)胚胎分割将内细胞团均等分割21．(1)动物细胞培养、动物细胞融合(2)能产生特异性抗体的B淋巴(3)灭活的病毒(或电融合)聚乙二醇(4)只有丙既能大量增殖，又

能产生特定抗体(5)能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，并可大量制备诊断试剂22．(1)基因表达载体的构建B有标记基因，复制原点不会被限制酶切割(2)PvuⅠ引物(3)EcoRⅠ1.25.5(4)在含有氨苄青霉素和X－gal的培养基上培养，形成白色菌落的为导

入重组质粒的受体细胞解析(1)基因工程操作的核心步骤是基因表达载体的构建。图甲中三种质粒适宜作为载体的为质粒B，因为质粒B含有EcoRⅠ、PvuⅠ两种酶切位点、氨苄青霉素抗性基因和蓝色显色基因，而且相应的限制酶切割后，可以保留氨苄青霉素

抗性基因的完整性。与另外两种质粒相比，其作为载体的优点是有标记基因，复制原点不会被限制酶切割。(3)由于EcoRⅠ在目的基因和质粒上都有酶切位点，为选出正向连接的重组质粒，使用EcoRⅠ对重组质粒完全酶切后，进行电泳分析。质粒B中Eco

RⅠ酶切位点与PvuⅠ酶切位点距离为0.2kb，若是正向连接载体，重组质粒中2个EcoRⅠ酶切点之间的距离是0.2＋1＝1.2(kb)，重组质粒长度为2.7＋4＝6.7(kb)，故EcoRⅠ酶切后，正向连接载体的情况下，电泳图谱中出现长度为1.2kb和5.5kb两条带。