安徽省合肥市庐巢八校联考2022-2023学年高二5月期中生物试题 含解析

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【文档说明】安徽省合肥市庐巢八校联考2022-2023学年高二5月期中生物试题 含解析.docx,共(24)页,1.749 MB,由小赞的店铺上传

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以下为本文档部分文字说明:

2022-2023学年度第二学期第二次集中练习高二生物一、单项选择题:1.下列关于传统发酵技术的叙述,正确的是()A.传统发酵的操作过程都需要经过严格的灭菌处理,防止杂菌污染B.果酒制作时,葡萄中的葡萄糖可以为微生物的

发酵提供碳源和氮源C.果醋发酵液中,液面处醋酸菌的密度大于瓶底处的密度D.泡菜制作时只能装八成满,所留空间的氧气可促进主要发酵菌种的增殖【答案】C【解析】【分析】1、果酒制作的原理是利用酵母菌在无氧条件下才能进行酒精发酵产生酒精,若是在有氧条件下则进行有氧呼吸而大量繁殖。果酒发酵

是在18~30℃、缺氧、呈酸性的环境中,其中酵母菌可大量繁殖,而其他绝大多数微生物无法适应这一环境而受到抑制。检验酒精是用酸性条件下的重铬酸钾反应,使溶液变成灰绿色即说明有酒精存在,即检验酒精的试剂是酸性的重铬酸钾。2、果醋的制作原理是

利用醋酸菌在氧气充足的条件将乙醇先转化为乙醛,在进一步转化为醋酸。醋酸菌是好氧菌,必须生活在氧气充足的环境中,且最适生长温度是30~35℃,所以杨梅醋的发酵过程中,需要往发酵液中持续地通入无菌空气(氧气)。【详解】A、传统发酵的操作过程中进行消

毒处理,但没有进行灭菌处理,A错误;B、果酒制作时,葡萄中的葡萄糖可以为微生物的发酵提供碳源,B错误;C、醋酸菌属于好氧菌,果醋发酵液中,液面处的醋酸菌更易接触到充足氧气,因此其密度大于瓶底处的密度,C正确;D、泡菜坛中加入蔬

菜时装至半坛,放入蒜瓣、生姜及其他香辛料,继续装至八成满,避免发酵液溢出坛外,D错误。故选C。2.《诗经》中有“中田有庐,疆场有瓜,是剥是菹,献之皇祖”的诗句。“剥”和“菹”是腌渍加工的意思。许慎在《说文解字》中解释“菹菜者,酸菜也”。

下列叙述正确的是()A.泡菜坛内液体表面可能出现一层由酵母菌繁殖形成的白膜B.为保证泡菜坛内的无氧环境,腌制时应尽量将泡菜坛装满C.为了降低杂菌污染的风险,发酵前需要对器具和蔬菜进行消毒D.腌制过程中乳酸和亚硝

酸盐的含量会先增加后减少再趋于稳定【答案】A【解析】【分析】泡菜的制作原理:泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下,乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。【详解】A、在泡菜坛内液体表面有时会出现一层白膜,这层白膜是由酵母菌大量繁殖所致,A正确;B、泡菜腌制时应装至八成满,以防止发酵

液溢出,B错误;C、为了降低杂菌污染的风险,发酵前需要对器具进行消毒,对蔬菜不需要消毒,C错误;D、腌制过程中亚硝酸盐含量会先增加后减少再趋于稳定,乳酸含量会一直增加后稳定,D错误。故选A。3.酵母菌的品质影响葡萄酒的产量和质量,研究人员为分离出产酒精能力强的

酵母菌菌株,进行了如图Ⅰ所示实验,甲、乙、丙、丁锥形瓶内分别加入100mL完全培养基,下列说法正确的是()A.在传统葡萄酒发酵过程中,为避免污染发酵装置需严格灭菌B.用稀释涂布平板法计算出葡萄酒过滤液的活菌数为

6.8×106个/L,此数值可能低于实际的活菌数C.对培养基进行灭菌的方法是高压蒸汽灭菌法,菌种接种过程中的试管口、瓶口等无需再灼烧灭菌D.由图Ⅱ可知,丙瓶出现的原因可能是培养瓶密封不严,丁组酵母菌产酒精能力比乙强【答案】D【解析】【分析】果酒制

作过程中的相关实验操作:材料的选择和处理→灭菌→榨汁→发酵。利用葡萄皮表面野生型酵母菌在缺氧的环境下发酵产酒精。若对菌液计数,需选取菌落数处于30~300的培养皿计数。平均菌落数除以涂布体积乘上稀释倍数求的是每百毫升发酵液的微生物数量,还应该再乘10算每升发酵液的微生物数。【详

解】A、在传统葡萄酒发酵过程中,利用的是葡萄皮表面的天然酵母菌,不需要严格灭菌,A错误;B、若对菌液计数,需选取菌落数处于30~300的培养皿计数。平均菌落数除以涂布体积乘上稀释倍数求的是每毫升发酵液的

微生物数量,还应该再乘1000算每升发酵液的微生物数,故先求平均菌落数为(62+68+74)÷3=68,除以涂布体积0.1mL后等于680个/mL,稀释倍数为1×104,再乘1000,最后为6.8×109个/L,计数过程中两个

或两个以上细胞连在一起,平板上生长出一个菌落,所以数目偏小,B错的误;C、培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌,玻璃器皿、接种用具可采用干热灭菌,接种时的玻璃瓶口等都需在酒精灯火焰处进行灼烧灭菌,C错误;D、乙、丙、丁挑取不

同的菌落培养,丙瓶与乙、丁瓶相同条件培养,但培养液没有酒精产生,且瓶内活菌数量不低,丙瓶出现的原因可能是培养瓶密封不严,进行有氧呼吸;丁组的活菌数比乙组少,但是产生的酒精和乙组一样多,所以丁组产生酒精能力比乙强,D正确。故选D。4.下列关于菊花组织培养的叙述,正确的是()A.菊花茎段培养

前需用适宜浓度的酒精和次氯酸钠的混合液消毒B.菊花组织培养的全过程都要在有光条件下进行C.切取幼嫩的菊花茎段进行培养是因为该部位容易诱导形成愈伤组织D.组培苗常移植到蛭石中锻炼是因为蛭石带菌量低且营养丰富【答案】C【解析】【分析】植物组织培养过程是:离体的植物器官、组织或细胞脱分化

形成愈伤组织,然后再分化生成根、芽,最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。【详解】A、流水冲洗后的外植体先用酒精消毒,无菌水清洗后再用次氯酸钠消毒,A错误;B、诱导愈伤组织期间一般不需要

光照,B错误;C、幼嫩的菊花茎段分裂旺盛,因而容易诱导形成愈伤组织,C正确;D、移植到蛭石中炼苗主要是因为蛭石保水透气,可优化土壤结构,有利于植物根系的生长和小苗的稳定发育,D错误。故选C。5.为培育具有市场竞争力的奉节无籽柑橘,研究者设计如下流程.相关叙述错误的是()A.过程①需

在低渗环境中使用纤维素酶和果胶酶处理B.可用离心操作实现②,再生细胞壁是其成功的标志C.过程③需在生长素和细胞分裂素的调控下进行D.三倍体植株因减数分裂异常可产生无籽柑橘【答案】A【解析】【分析】分析图示可知,①过程为原生质体的制

备过程,需要纤维素酶和果胶酶,②过程为原生质体的融合过程,需要诱导剂诱导融合,③过程为植物组织培养的过程。【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶,所以过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理,但为避免

原生质体吸水涨破,一般在等渗环境中进行,A错误;B、诱导融合的方法有物理法和化学法,可用离心法诱导植物原生质体融合,再生出细胞壁是融合成功的标志,B正确;C、过程③是植物组织培养过程,该过程需在生长素和细胞分裂素的调控下进行,C正确;D、三倍体植株含有三个染色体组,

减数分裂时联会紊乱,可产生无籽柑橘,D正确。故选A。6.花椰菜(2n=18)种植时容易遭受病菌侵害形成病斑,紫罗兰(2n=14)具有一定的抗病性。科研人员利用植物体细胞杂交技术培育具有抗病性状的花椰菜新品种如图1所示。通过蛋白质电泳技术分析了亲本及待测植株中某些特异性

蛋白,结果图2所示。下列有关叙述错误的是()A.图1培育杂种植株所用的技术体现了植物细胞全能性和细胞膜流动性原理B.图1过程①是在无菌水中进行,过程②是在固体培养基中进行C.图2中属于杂种植株的是4和5,1

可能是花椰菜D.病菌悬浮液均匀喷施于杂种植株叶片上,一段时间后,测定病斑面积占叶片总面积的百分比,可筛选抗病性强的杂种植株【答案】B【解析】【分析】1、植物体细胞杂交技术:就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞,并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。植

物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株,而不是形成杂种细胞就结束;杂种植株的特征:具备两种植物的遗传特征,原因是杂种植株中含有两种植物的遗传物质;植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍。2、根据图谱分析,4号和5号个体

含有紫罗兰和花椰菜两种类型的蛋白质,说明是杂种细胞,而1、2、3号个体只有紫罗兰中的蛋白质,说明不是杂种细胞。【详解】A、植物体细胞杂交技术将杂种细胞培养成完整植株,体现了植物细胞全能性;两个物种细胞

的融合体现了细胞膜流动性原理,A正确;B、图一过程中①是在等渗或高渗溶液中进行,而不是在无菌水中,B错误;C、根据图谱分析4号和5号个体含有两种类型的蛋白质是杂种细胞,而1号个体只有1种蛋白质可能是花椰菜,C正确;D、可将病菌悬浮液均匀

喷施于杂种植株叶片上,一段时间后,测定病斑面积占叶片总面积的百分比,筛选出抗病性强的杂种植株,D正确。故选B。7.灭活疫苗是将培养扩增的活病毒通过物理或化学手段灭活后,经过系列纯化制备的生物制剂。国产新冠灭活疫苗的大致生产流

程如下,将抗原性强的病毒接种到Vero细胞中培养,再使病毒经过β-丙内酯灭活等过程制备成疫苗。下列相关说法错误的是()A.Vero细胞的细胞膜上存在新冠病毒能够特异性识别的受体B.培养Vero细胞时,需要对培养液和所有培养用具进行灭菌,以保证无毒的环境C.培养时

,需将Vero细胞置于含95%空气和5%CO2的气体环境中D.β-丙内酯灭活会使新冠病毒失去感染能力但不会破坏其抗原结构【答案】B【解析】【分析】动物细胞培养的条件:1、营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等)。通常需要加入血

清。2、温度、pH和渗透压。3、无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。4、气体环境(95%的空气+5%CO2的混合气体),其中5%CO2气体是为维持培

养液的pH稳定。【详解】A、题干中用Vero细胞培养新冠病毒,因此Vero细胞的细胞膜上需存在新冠病毒能够特异性识别的受体,便于病毒识别,A正确;B、培养Vero细胞时,需要对培养液和所有培养用具进行灭菌,以保证无菌的环境;培养液需要定期更换,及时清除代谢产物,以保证细胞培养的无

毒的环境,B错误;C、需将Vero细胞置于含95%空气和5%CO2混合气体的培养箱中进行培养,O2是细胞代谢所必需的,CO2主要作用是维持培养液的pH,C正确;D、β-丙内醋灭活会使新冠病毒失去感染能力,但不会破

坏其表面的蛋白结构,保留其抗原性,D正确。故选B。8.绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,有关说

法正确的是()A.①过程只能产生一种杂交瘤细胞B.②过程筛选出的杂交瘤细胞都能产生抗HCG抗体C.③过程以HCG为抗原进行抗原-抗体检测D.④过程可在人体内进行,也可在体外进行【答案】C【解析】【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体。通常采用杂

交瘤技术来制备,杂交瘤抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的效应B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为杂交瘤细胞,杂交瘤细胞既能产生抗体,又能无限增殖。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针

对一种抗原的特异性抗体即单克隆抗体。【详解】A、①过程是动物细胞融合,可产生多种杂交瘤细胞,A错误;B、②过程筛选出的杂交瘤细胞不一定全部产生抗HCG抗体,还需要进行专一抗体检测,B错误;C、③过程以HCG为抗原,利用行抗原-抗体杂交进行检测,C正确;D、④过程应体外

进行培养,不能在人体内培养,D错误。故选C。9.如图是利用体细胞核移植技术克隆优质奶牛的简易流程图,有关叙述正确的是()在A.需要对乙和丙进行超数排卵处理B.后代丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定C.过程②常使用显微操作去核法对受

精卵进行处理D.过程③将激活后的重组细胞培养至原肠胚后移植【答案】B【解析】【分析】分析图解:图示过程为体细胞克隆过程,取甲牛体细胞,对处于减数第二次分裂中期的乙牛的卵母细胞去核,然后进行细胞核移植;融合后的细胞激活后培养到早期胚胎,再进行胚胎移植,最终得

到克隆牛。【详解】A、此过程为核移植过程,不需要对丙进行超数排卵,可以对乙进行超数排卵,A错误;B、乙牛提供细胞质遗传物质,甲牛提供大部分遗传物质,所以后代丁的遗传性状由甲和乙的遗传物质共同决定,B正确;C、过程②常使用显微操作去核法对卵母细胞进

行处理,C错误;D、过程③将激活后的重组细胞培养至桑葚胚或囊胚后移植,D错误。故选B。10.为了加快良种牛的繁殖速度,科学家采用了以下两种方法。下列说法正确的是()A.方法Ⅰ获得公牛的新鲜精液,可直接用于受精作

用B.胚胎体外培养过程中不需要利用相关技术去除透明带C.E和F的培育过程中均用到了胚胎移植技术,均属于有性生殖D.如图方法Ⅱ,产生的F牛的性别与C牛相同,性状也与C牛完全一致【答案】B【解析】【分析】试管动物属于有性生殖,克隆动物属于无性生殖。【详解】A、在体外受精前,要对精子进行获能处理,

通常采用的体外获能方法有培养法和化学诱导法两种,A错误;B、动物胚胎发育的早期有一段时间是在透明带中完成的,胚胎体外培养过程中不需要利用相关技术去除透明带,B正确;C、E和F的培育过程中均用到了胚胎移植技术,但是E是通过体外受精得到的,属

于有性生殖,F是通过核移植得到的,属于无性生殖,C错误;D、如图方法Ⅱ,产生的F牛的性别与C牛相同,但是性状不与C牛完全一致,一方面是因为性状还与所处环境有关,另外一方面是卵细胞中的质基因也会对牛的性

状有所影响,D错误。故选B。11.关于“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”的说法合理的是()A.都属于无性繁殖B.都能体现细胞的全能性C.在形成过程中一般都有卵细胞的参与D.它们的遗传物质都只来自于一个亲本【答案】C【解析】【分析】“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”都用到动物细

胞培养技术和胚胎移植技术,但试管羊和转基因羊没有用到核移植技术;它们的遗传物质都不只来自一个亲体,克隆羊也有少量遗传物质来自供质的亲本;克隆羊属于无性生殖,试管羊、转基因羊属于有性生殖;转基因羊中,往往把目的基因导入受精卵细胞。【详解】A

、克隆羊属于无性生殖,试管羊、转基因羊属于有性生殖,A错误;B、克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”都用到动物细胞培养技术和胚胎移植技术,但试管羊和转基因羊没有用到核移植技术;且核移植技术的原理是动物细胞核具有全能

性,B错误;C、“克隆羊”、“试管羊”、“转基因羊”都需要卵细胞的参与,C正确;D、它们的遗传物质都不只来自一个亲体,克隆羊也有少量遗传物质来自供质的亲本,D错误。故选C。12.制作传统发酵食品利用的主要微

生物相关信息如下表所示,其中错误的是()产品名称腐乳酸奶果酒果醋异化作用类型①需氧型②厌氧型③兼性厌氧型需氧型是否有成形细胞核是②是是④否A①B.②C.③D.④【答案】B【解析】【分析】果酒的制作离不开酵母菌,

酵母菌是兼性厌氧微生物在有氧条件下,酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖,把糖分解成二氧化碳和水;果醋制作所需的菌种主要是醋酸菌,在有氧条件下将糖类或乙醇发酵为乙酸。【详解】A、制作腐乳时利用的微生物主要是毛霉,为真核生物

,有成形的细胞核,其异化作用类型为需氧型,A正确;B、制作酸奶主要利用乳酸菌,为原核生物,无成形的细胞核,异化作用类型为厌氧型,B错误;C、果酒制作所需的微生物主要是酵母菌,属于真核生物,有成形的细胞核,其异化作用类型为兼性厌氧型,C正确;D、果醋制作所需

的菌种主要是醋酸菌,属于原核生物,无成形的细胞核,其异化作用类型为需氧型,D正确。故选B。13.已知固体培养基会因碳酸钙存在而呈乳白色,且乳酸菌能分解培养基中的碳酸钙。某同学以新鲜的泡菜滤液为材料进行了分离纯化乳酸菌的实验。下列叙述错误的是

()A.分离纯化所用的培养基都要进行严格的灭菌处理B.分离纯化乳酸菌时,应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌C.分离纯化乳酸菌时,需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释D.加入碳酸钙的培养基属于选择培养基,且碳酸钙作为唯一碳源【答案】D【

解析】【分析】培养基的概念及营养构成(1)概念:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出的供其生长繁殖的营养基质;(2)营养构成:各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐,此外还要满足微生物生长对pH、

特殊.营养物质以及氧气的要求.例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时需将培养基的pH调至酸性,培养细菌时需将pH调至中性或微碱性,培养厌氧微生物时则需要提供无氧的条件。【详解】A、微生物实验中使用的培养基必须要经过灭菌处理,以防止杂菌污染,确保实验能够顺利进行,分离

纯化所用的培养基也要进行严格的灭菌处理,A正确;B、由题意可知,乳酸能分解培养基中碳酸钙形成透明圈,故分离纯化乳酸菌时,应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌,B正确;C、分离纯化乳酸菌时,了获得单个菌落,需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,将稀释液均匀涂布在

培养皿表面,经培养后可形成单个菌落,C正确;D、题意显示,乳酸能分解培养基中碳酸钙,故分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用是中和乳酸菌代谢过程中产生的乳酸,形成透明圈,有利于乳酸菌的鉴别,该培养基属于鉴别培养基,且乳酸菌不能利用碳酸钙作为碳源,D错误。故选D。14.除

草剂丙草胺能抑制土壤微生物的生长。为获得能分解丙草胺的微生物,研究人员从某地土壤中取样,将1mL土壤样液稀释100倍,在3个平板上分别接种0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、57和58。下列叙述错误的是()A.一般选择菌落数为30~300的平板进行计数B

.计算得出土壤样液中活菌大约为5.7×107个/LC.此方法统计的菌落数往往比实际的活菌数目低D.显微镜直接计数法统计的是稀释液中的活菌数【答案】D【解析】【分析】统计菌落数目的方法:(1)显微镜直接计数法:原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显

微镜下计算一定容积的样品中微生物数量;方法:用计数板计数;缺点:不能区分死菌与活菌。(2)间接计数法(活菌计数法):原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。注意事项:a、设置重复

组,增强实验的说服力与准确性;b、为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。为c、计算公式:每克样品中的菌株数=(c/V)×M,其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M代表稀释倍数。【详解】A、一般选择菌落数在30-300的

平板进行计数,A正确;B、将1mL样品稀释100倍,在3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为56、58和57,据此可得出每升样品中的活菌数为(56+58+57)/3=0.

1×1000×100=5.7×107个,B正确;C、由于两个或多个细菌形成一个菌落,所以统计的菌落数往往比实际的活菌数目低,C正确;D、显微镜直接计数法统计的都是稀释液中所有个体的数目,包括死菌,D错误。故选D。15.如图所示,将由2种不同的抗原分别制备的单

克隆抗体分子,在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体,简称双抗。下列说法错误的是()A.双抗可同时与2种抗原结合B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞【答案】D【解

析】【分析】单克隆抗体的制备过程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,

即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测,双抗可同时与2种抗原结合,A正确;B、根据抗原与抗体能够发生特异性结合的特性,利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞,从而使药物发挥相应的作用,B正确

;C、在两种不同的抗原刺激下,B细胞增殖、分化产生不同的浆细胞分泌形成两种抗体,因此,筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原-抗体检测,从而实现对双抗的筛选,C正确;D、同时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同

的浆细胞,而不是分化成产双抗的浆细胞,D错误。故选D。二、多项选择题:16.中国科学家运用合成生物学方法构建了一株嗜盐单胞菌H,其以糖蜜(甘蔗榨糖后的废弃液,含较多蔗糖)为原料,在实验室通过发酵生产出PHA等新型高附加值可降解材料,从而提高了甘蔗的整体利用价值。具体的工艺流程如下图所示。下列

说法错误是()A.为提高菌株H对蔗糖的耐受能力和利用效率,应在液体培养基中添加包含蔗糖在内的多种有机物作为碳源,并不断提高蔗糖的浓度B.为统计培养液中H菌的数目,可在培养过程中定期取样并采用平板划线法进行菌落计数C.若菌株H具有嗜盐、酸碱耐受能力强等特性,则发酵系统不需要进行灭菌处理D.若在适宜

营养物浓度、温度和pH条件下发酵,菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期且产生了少量的乙醇,则说明氧气是高密度培养的限制因素【答案】ABC【解析】【分析】1、在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微

生物生长的培养基,称为选择培养基。虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源(提供碳元素的物质)、氮源(提供氮元素的物质)和无机盐。2、统计菌落数目的方法:(1)显微镜直接计数法:①原理:利用特定细菌计数板或血细胞计数板,在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量;

②方法:用计数板计数;③缺点:不能区分死菌与活菌。(2)间接计数法(活菌计数法):①原理:当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌.通过统计平板上的菌落数,就能推测出样品中大约含有多少活菌。

②操作:a、设置重复组,增强实验的说服力与准确性;b、为了保证结果准确,一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。③计算公式:每克样品中的菌株数=(c÷V)×M,其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M

代表稀释倍数。【详解】A、由题干信息分析可知,为提高甘蔗的整体利用价值,需提高嗜盐单胞菌H对蔗糖的耐受能力和利用效率,故在液体培养基中将蔗糖作为唯一碳源,并不断提高其浓度,A错误;B、平板划线法只能分离菌种,不能进行计数,可采用血球计数板计数的方法进行菌落计数,B错误;C、若菌株H具有嗜盐、酸碱

耐受能力强等特性,在高盐、强碱条件下,也可能有杂菌生长,故该系统仍需要灭菌,C错误;D、若在适宜营养物浓度、温度和pH条件下发酵,菌株H细胞增殖和PHA产量均未达到预期且产生了少量的乙醇,这说明发酵条件中氧气不足,使菌种进行无氧呼吸产生了乙醇。据此推测可知

,氧气(O2或溶解氧)是限制高密度培养的重要因素,D正确。故选ABC。17.细胞融合不仅在自然条件下常见,在现代生物技术中也被经常应用。下图为细胞融合的简略过程,下列说法不正确的是()A.若细胞d是杂交瘤细胞,则在选择性培养基中筛选后即可大规模培养生产单抗B.若细胞a、

b分别取自优良奶牛,则采集的卵母细胞和精子可直接体外受精C.若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞,则完成融合的标志为核的融合D.细胞融合过程都涉及膜的流动性,常用聚乙二醇、电激等进行促融处理【答案】ABC【解析】【分析】1、植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细

胞,进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。2、单克隆抗体制备流程:先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应,之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞;诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合,利用选择培养基筛

选出杂交瘤细胞;进行抗体检测,筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞;进行克隆化培养,即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养;最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。【详解】A、单克隆抗体的制备过程中需要进行二次筛选,第一

次是用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞后,还需要用抗原-抗体特异性结合的原理筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞,再进行大规模培养,A错误;B、采集来的卵母细胞培养到减数第二次分裂中期,精子要经过获能处理,方可进行体外受

精,B错误;C、若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞,则完成融合的标志为产生新的细胞壁,C错误;D、细胞融合过程都涉及膜的流动性,常用聚乙二醇、电激等进行促融处理,D正确。故选ABC。18.我国研究人员以小鼠(2n=40)和大鼠(2n=42)为材料

,通过细胞融合技术创造出一种新型干细胞——异种杂合二倍体胚胎干细胞,该细胞具有多向分化潜能,在科研上具有较高应用价值,相关过程如下图所示。下列叙述正确的是()A.注射促性腺激素可促进小鼠超数排卵,通过获能液可使大鼠精子获得受精的能量B.胚胎1、2均发育到囊

胚阶段,其中的滋养层具有发育成胎盘和胎膜的能力C.异源二倍体ES细胞全能性的表达需要移植到经同期发情的代孕受体内完成D.异源二倍体ES细胞的染色体数为41,发育成的杂种鼠仅有一条性染色体【答案】BC【解析】【分析】囊胚:细胞开始分化,其中个体较大的细胞叫内细胞团将来发育成

胎儿的各种组织;而滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘;胚胎内部逐渐出现囊胚腔。【详解】A、注射促性腺激素可促使小鼠超数排卵,获能液能使精子获能,精子的获能是指精子获得受精“能力”而非获得能量,A错误;B、胚胎1、2均发育到囊胚

阶段,该时期细胞出现分化,有内细胞团和滋养层,其中的滋养层具有发育成胎盘和胎膜的能力,B正确;C、异源二倍体ES细胞全能性的表达需要最终发育为完整个体,该过程需要移植到经同期发情的代孕受体内完成,保证供、受体生殖器官的生理变化相同,为胚胎移入受体提供相同的生理环境,C正确;D、据图可知,异

源二倍体ES细胞的染色体数为(40+42)/2=41条,但有来自小鼠和大鼠的性染色体各一条,D错误。故选BC。19.试管婴儿包括体外受精、体外胚胎培养和胚胎移植三个阶段。下列相关叙述正确的是()A.体外胚胎培养后,

需要检查才能移植进入母体子宫B.精子接触透明带时,卵细胞会发生阻止多精入卵的生理反应C.从父亲体内取出的精子需要经过获能处理才能用于体外受精D.胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移【答案】ACD【解析】【分析】试管婴儿是指用人工的方法使精子与卵细胞在体外

的试管中结合形成受精卵并进行早期胚胎发育,然后把胚胎移植进母体的子宫内,胚胎和胎儿的发育在子宫中进行,直至发育成熟,分娩产出。可见,“试管婴儿”的生命始于一个细胞--受精卵,受精的部位是试管,其胚胎发育的主要场所是子宫,试管只是初期发育的场所。【详

解】A、体外胚胎培养后,通过筛选出发育完好的胚胎移植进入母体子宫,即需要检查才能移植进入母体子宫,A正确;B、在精子触及卵细胞膜的瞬间,会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应,这个反应称作透明带反应,B错误;C、体外受精之前,要对精子进行获能处理,采集

的卵母细胞,都要在体外经人工培养成熟后,才能与获能的精子受精,C正确;D、胚胎移植实质上是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移,该技术的理论基础是受体子宫对移入的胚胎不发生免疫排斥,D正确。故选ACD。20.

“筛选”是生物工程中常用的技术手段。下列相关叙述正确的是()A.利用以尿素为唯一氮源的培养基可以筛选出尿素分解菌B.在小鼠胚胎细胞原代培养过程中,一定能筛选出能无限增殖的细胞C.植物体细胞杂交过程中,原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选D.单克隆抗体制备过程中,第一次筛选出的细胞既

能无限增殖又能产生所需抗体【答案】AC【解析】【分析】微生物筛选的关键是选择培养基的使用,通过选择培养混合的微生物,仅得到或筛选出所需要的微生物,其他微生物在选择培养基上是不能生存或生存受到抑制。【详解】A、以尿素为唯一氮源的培养基上,其他微生物因为缺少氮源而不能生存,故可以筛选

出尿素分解菌,A正确;B、在小鼠胚胎细胞原代培养过程中,细胞分裂能保持正常的二倍体核型,故不一定能筛选出能无限增殖的细胞,B错误;C、植物体细胞杂交过程中,原生质体融合后获得的细胞有多种融合类型,故需要进行筛选,C正确;D、单克隆抗体制备过

程中,第一次筛选出的细胞既能无限增殖又能产生特定抗体,但不一定是所需抗体,D错误。故选AC。三、填空题:21.磷是植物生长的重要元素,施入土中的磷大多数与Ca2﹢等离子结合形成难溶性磷酸盐。科研人员从贡柑果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌,主要流程见下图,请回答

下列问题:(1)步骤③将土壤悬浮液稀释了______________倍。经步骤③最后一次稀释之后若在3个平板上分别接入0.1mL稀释液,经适当培养后,得到的结果是:39、38、37,则每克土样中的活菌数为

______________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_________,原因是____________________。(2)步骤④中的培养基的成分是:葡萄糖、(NH4)2SO4、NaC1、MgSO4·7H2O、KCl、FeSO4·

7H2O、MnSO4、Ca3(PO4)2、琼脂粉等,其中碳源是_____________________。(3)步骤④中待菌落长好后挑出溶磷圈直径(D)与菌落直径(d)比值较_______________

__的菌落。采用步骤⑤方法分离水样中的细菌时,为了将聚集的菌体分离,在第二次及以后的划线时,一定要从_________开始划线。通常情况下,对获得的纯菌种可以依据________________对细菌进行初步的鉴定和分类。【答案】(1)①.1000②.3.8×106

③.偏小④.一个菌落可能来自于两个或多个细胞(2)葡萄糖(3)①.大②.从上一次划线的末端③.菌落(的形状、大小、颜色等)特征【解析】【分析】稀释涂布平板法:将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在

,再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。【小问1详解】步骤③将土壤悬浮液0.5mL放入4.5mL无菌水中,相当于稀释了10倍,再取0.5mL移至4.5mL中,相当于稀释了100倍,再取0.5mL移至4.5mL中,相当于稀释了1000倍;0.1mL中有(

39+38+37)÷3=38个,1mL中含有380个,而1mL是稀释了1000倍后的土壤悬浮液,因此原1mL土壤悬浮液中含有380×1000个=3.8×105个,100mL土壤悬浮液中含有3.8×107个,100mL土壤悬浮液是1

0g土壤所得,因此1g土壤中含有的活菌数为3.8×107÷10=3.8×106个;平板上两个或两个以上细菌距离过近时可能会形成一个菌落,因此稀释涂布平板法所获得的数据比实际值一般要偏小。【小问2详解】碳源,是用于构成微生物

细胞和代谢产物中碳素来源的营养物质,葡萄糖是该培养基中的碳源。【小问3详解】要筛选高效解磷菌,待菌落长好后挑出溶磷圈直径(D)与菌落直径(d)比值较大的菌落;划线分离法,在第二次及以后的划线时,一定要从上一次划线的末端开始划线,这样才能将菌液的密度不断降低,有希望获得单菌落;

菌落,是指由单个或少数微生物细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度,形成以母细胞为中心的一团肉眼可见的、有一定形态、构造等特征的子细胞集团,不同的细菌菌落特征不同。22.酥梨的糖分含量比柚子高,而柚子具有独特的香味,以酥梨柚子发酵而成的复合果醋,

在滋味、香气方面二者可互补协调。下图是以新鲜酥梨、柚子为原材料,经过酒精发酵和醋酸发酵酿造酥梨柚子复合果醋的流程图,请回答:(1)酵母菌进行无氧呼吸的场所在______,产物是______。(2)实验前要将发酵瓶、榨汁机等器具要体积分数为______酒

精消毒。酒精发酵过程中发酵瓶要留有1/3的空间,原因是______。(3)酒精发酵结束后,接入醋酸菌,同时加入柠檬酸/碳酸氢钾的目的是______,温度一般控制在______℃,同时进行220r·min-1的摇瓶振荡培养的目的是______。(4)科研人员还研究了酵母接种量以及V(酥梨汁):V(柚

子汁)的比值对酒精发酵的影响,实验结果如下图:的①图2中V(酥梨汁):V(柚子汁)比值过大酒精度下降的原因是______②根据图1和图2实验结果可以得出最佳的发酵条件是______【答案】(1)①.细胞质基质②.酒精和二氧化碳(C2H5OH和CO2)(2)①.70%②

.便于酵母菌有氧呼吸大量增殖,防止发酵旺盛时发酵液的溢出(3)①.维持pH呈现酸性(维持pH稳定)②.30-35③.增加溶解氧(增加溶解氧、增加与营养物质的接触)(4)①.酥梨汁较柚子汁的含糖量高,糖度过高产生的高渗会抑制酵母菌的活性②.酵母接种量

为0.2%,V(酥梨汁):V(柚子汁)=2:1【解析】【分析】1、果酒制作的原理是利用酵母菌在无氧条件下才能进行酒精发酵产生酒精,若是在有氧条件下则进行有氧呼吸而大量繁殖。果酒发酵是在18~30℃、缺氧、呈酸性的环境中,其中酵母菌可大量繁殖,而

其他绝大多数微生物无法适应这一环境而受到抑制。检验酒精是用酸性条件下的重铬酸钾反应,使溶液变成灰绿色即说明有酒精存在,即检验酒精的试剂是酸性的重铬酸钾。2、果醋的制作原理是利用醋酸菌在氧气充足的条件将乙醇先转化为乙醛,在进一步转化为醋酸。醋酸菌是好氧菌,必须

生活在氧气充足的环境中,且最适生长温度是30~35℃,所以杨梅醋的发酵过程中,需要往发酵液中持续地通入无菌空气(氧气)。【小问1详解】酵母菌无氧呼吸的场所是细胞质基质,无氧呼吸产物是酒精和CO2。【小问2详解】用体积分数为70%酒精对发酵瓶、榨汁机等器具

进行消毒,酒精发酵过程中发酵瓶要留有1/3的空间,便于酵母菌有氧呼吸大量增殖,防止发酵旺盛时发酵液的溢出。【小问3详解】发酵液中加入柠檬酸/碳酸氢钾等缓冲物质,其目的是维持pH呈现酸性(维持pH稳定),醋酸发酵的温度一般在30-35℃,为了增加溶解氧

(增加溶解氧、增加与营养物质的接触)进行220r·min-1的摇瓶振荡培养。【小问4详解】①酥梨汁较柚子汁的含糖量高,糖度过高产生的高渗会抑制酵母菌的活性,所以图2中V(酥梨汁):V(柚子汁)比值过大酒精度下降。②据图可知,酵母接种量为0.2%,V(酥梨汁):V(柚子汁)=2:1时是最佳发酵条

件。23.豆科牧草二倍体沙打旺(2n=16)具有耐旱、耐贫瘠、抗风沙的特点,同源四倍体紫花苜蓿(4n=32)固氮能力较强,科研人员利用体细胞杂交技术获得兼具两者优点的杂种植株,实验流程如下,请回答:(1)通过植物体细胞杂交技术可以克服______,获得兼具两

者优良性状的豆科牧草,这种牧草属于______倍体。(2)过程I用______处理获得原生质体。已知红色荧光染料能使得植物细胞质呈现红色,绿色荧光染料能使得细胞核呈现绿色,在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察,当观察到______现象时,可判断该原生质体是由沙打旺和紫花苜蓿融合而成的。(3)过

程IV脱分化形成的愈伤组织的特点为______,过程V中的培养基中常添加的植物激素有______。(4)待幼苗长出较为发达的根系后进行移栽炼苗,炼苗的目的是______。(5)科研人员研究了不同浓度的聚乙二醇(PEG)对沙打旺和紫花苜蓿原生质体

融合率的影响,实验结果如下图,异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率,已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用:①诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外还有______。②实验结果表明诱导苜蓿与沙打旺原生质体融合的最

佳PEG浓度为______,理由是______。【答案】(1)①.远缘杂交不亲和的障碍②.(异源)六倍体(2)①.纤维素酶和果胶酶②.发两种荧光(3)①.不定型的薄壁组织团(没有特定形态、结构和功能的薄壁细胞)②.细胞

分裂素和生长素(4)让其适应自然环境(5)①.物理融合法(电融合法)②.35%③.该浓度下异源融合率最高,同时PEG浓度相对较低对细胞的毒害作用较小【解析】【分析】植物的体细胞杂交是将不同植物的细胞通过细胞融合技术形成杂种细胞,进而利用植物的组织培养将杂种细胞培育成多倍

体的杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。【小问1详解】如图培育过程采用的是植物体细胞杂交技术,可以克服远缘杂交不亲和的障碍。豆科牧草二倍体沙打旺(2n=16)和同源四

倍体紫花苜蓿(4n=32)融合形成的细胞含有6个染色体组,属于六倍体。【小问2详解】植物体细胞杂交需要先用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁,为了便于杂种细胞的筛选和鉴定,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记紫花苜蓿和百脉

根的原生质体膜上的蛋白质,可用显微镜观察,根据细胞膜表面荧光的不同可观察到3种不同的原生质体,即只有红色荧光的原生质体,只有绿色荧光的原生质体,有2种荧光的原生质体,其中两个原生质体融合所形成的细胞,其细胞膜上含有两种颜色的荧光

标记,既有红色荧光又有绿色荧光。【小问3详解】经脱分化形成的不定型的薄壁组织团(没有特定形态、结构和功能的薄壁细胞)是愈伤组织。过程V是再分化过程,需要添加一定比例的细胞分裂素和生长素促进细胞分化。【小问4详解】为了让幼苗能适应野外环境,需要将幼

苗长出较为发达的根系后进行移栽炼苗。【小问5详解】①人工诱导原生质体融合的方法除了PEG诱导融合,还有电刺激、离心等物理方法。②实验结果显示诱导苜蓿与沙打旺原生质体融合的最佳PEG浓度在35%,因为该浓度下总融合率较低,但异源融合率最高,同时PEG浓度相对较低对细胞的毒害作用较小

。24.世界首个核移植“三亲婴儿”在美国诞生。其培养过程如下图,请据图回答下列问题:(1)在卵母细胞的获取过程中,需要对女性进行______处理,该处理的方法是给女性注射______激素,该处理可能会带来的危害有:①_______;②_______。(2)细胞A的培养过程③所需气体主要有

O2和CO2,CO2的主要作用是_______。(3)卵子与精子在发生上的重要区别是_______;对采集到的精子要先经过_____处理,才能用于体外受精;过程④受精完成的标志是_______。(4)为了提高已有胚胎的

利用率,可采用_________技术。若选用囊胚期的胚胎,操作过程中要特别注意的问题是______。(5)设计试管婴儿技术与解决不孕问题而进行的试管婴儿技术的主要区别是前者需要在植入前对胚胎进行________。(6)婴儿的遗传物

质来自于_________。【答案】(1)①.超数排卵②.促性腺③.对孕妇的身体健康不利(或:导致卵巢早衰、影响孕妇内分泌功能、影响胎儿的健康发育等)④.影响胎儿的健康发育(或:对孕妇的身体健康不利、导致卵巢

早衰、影响孕妇内分泌功能等)(2)维持培养液的pH(3)①.精子的发生是连续的而卵子的发生是不连续的②.获能③.雌雄原核融合(4)①.胚胎分割②.将内细胞团均等分割(5)#遗传学诊断##基因检测##基因诊断#(6)甲乙丙【解析】【分

析】1、试管婴儿技术是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精,并通过培养发育为早期胚胎后,再经移植后产生后代的技术。设计试管婴儿技术是通过体外受精获得许多胚胎,然后从中选择符合要求的胚胎,再经移植后产生后代的技术。2、

分析题图:图示表示三亲婴儿的培育过程,由图可知,三亲婴儿的培育采用了核移植技术、早期胚胎培养技术和胚胎移植技术等。【小问1详解】在卵母细胞的获取过程中,需要对女性进行超数排卵处理,该处理的方法是给女性注射促性腺激素,该处理可能会带来的危害有:①对孕妇的身体

健康不利(或:导致卵巢早衰、影响孕妇内分泌功能、影响胎儿的健康发育等);②影响胎儿的健康发育。【小问2详解】动物细胞培养所需气体有O2和CO2,CO2的主要作用是维持培养液的pH。【小问3详解】精子的发生是从初情期一直到生殖机能衰退;多数哺乳动物卵子的形成和在卵巢内的贮备是胎儿出生

前完成的;对采集到的精子要先经过获能处理,才能用于体外受精;受精完成的标志是雌雄原核融合形成一个核。【小问4详解】为了提高已有胚胎的利用率,可采用胚胎分割技术。若选用囊胚期的胚胎,特别注意的问题是将内细胞团均等分割,防止影响胚胎的

进一步发育。【小问5详解】设计试管婴儿技术与解决不孕问题而进行的试管婴儿技术的主要区别是前者需要在植入前对胚胎进行遗传学诊断,筛选符合需要的胚胎再移殖。【小问6详解】由图可知,婴儿的遗传物质来自母亲甲的卵母细胞细胞核,捐献者乙的卵母细胞细胞质及父亲丙的精细胞细胞

核。25.据《细胞报告》报道,我国科学家成功将小鼠的颗粒细胞(卵泡中卵母细胞周围的细胞)转化为GV卵母细胞(尚未完全恢复减数分裂),进而恢复减数分裂能力并顺利培育出健康后代(如下图)。据图回答下列问题:(1)图中过

程②为___________,X细胞需要培养到___________(时期)才具备与精子受精的能力。(2)图示过程③运用了胚胎工程中的___________和___________两大技术,该健康幼鼠是通过___________

(填“无性”或“有性”)生殖方式获得的。为了保证移植的成功率,需要对供体母鼠和受体母鼠进行___________处理。(3)胚胎移植成功原因之一是外来胚胎与受体母鼠的子宫可建立正常的生理和组织联系,一般情况下供体胚胎遗传特性在孕育过程中___________(填“受”或“不受”)受体母鼠影响。

若想获得一卵双胎或多胎,应结合___________技术,一般处理___________(时期)的胚胎,该技术的要点在于将内细胞团___________。(4)科学家将该项技术应用于保护濒危动物,其意义是_

_____________________。【答案】(1)①.减数分裂②.MⅡ(2)①.体外受精②.胚胎移植(顺序可反)③.有性④.同期发情(3)①.不受②.胚胎分割③.桑葚胚或囊胚④.均等分割(4)解决因卵细胞不足导致后代数量有限的问题【解析】

【分析】分析题图:①表示卵泡中的颗粒细胞经诱导成为多能干细胞,②表示GV卵母细胞减数分裂产生卵细胞过程,X应该为卵细胞;③涉及体外受精、早期胚胎培养及胚胎移植等技术。【小问1详解】图中X细胞能与精子结合形成受精卵,则X应该为卵细胞,GV卵母细胞需要经过减数分裂才能形成卵细胞,因

此过程②表示GV卵母细胞减数分裂产生卵细胞过程。卵细胞培养到减数第二次分裂中期时,才具有与精子受精的能力,因此X细胞需要培养到MⅡ才具备与精子受精的能力。【小问2详解】图中过程③涉及到卵细胞和精子结合形成受精卵,受精卵发育形成早期胚胎,胚胎移植到受体

子宫,最后生出健康的幼鼠,此过程运用了胚胎工程中的体外受精、胚胎移植两大技术。该健康幼鼠形成过程中经过两性生殖细胞的融合(卵细胞和精子结合),此生殖方式属于有性生殖。动物发情排卵后,同种动物的供、受体生殖器官的生理变化是相同的,这就

为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境,据此可知,胚胎移植时需要对供体母鼠和受体母鼠进行同期发情处理,为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境,保证了移植的成功率。【小问3详解】外来胚胎与受体母鼠的子宫可建立正常的生理和组织联系,一般情况下供体胚胎遗传特性在孕

育过程中不受体母鼠影响。由于来自同一个胚胎的后代具有相同的遗传物质,因此要获得同卵双胎或多胎的个体,应采用胚胎分割技术,进行胚胎分割时,应选择发育良好、形态正常的桑椹胚或囊胚,对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细

胞团均等分割,否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。【小问4详解】获得更多资源请扫码加入享学资源网微信公众号www.xiangxue100.com

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